Главне одредбе програма "људски геном"
када је створио програм "људског генома", три главна циља овог програма су идентификоване: стварање тачног генетске карте, стварање физичке мапе људског генома и редоследа( одређивање) читавог људског генома.
Креирање генетску
геном карту тачна генетска карта може бити израђен уколико је следећа два услова: откривањем у геному великог броја полиморфних( различитих) генетских маркера и присуство довољног броја породица за повезивање анализу између ових маркера и успостављање њихове међусобне аранжмана.Проблем генетских маркера решен је након откривања различитих типова ДНК полиморфизама.Редослед њиховог увођења приликом генетске анализе су први открио рестрикционих фрагмената дужине полиморфизма( РФЛП скраћено), затим полиморфизам због различитих бројева тандем понављања( ВНТР-полиморфизам).Сваки од ових типова има своје предности и мане, али све заједно омогућавају да означи људски геном са веома високе густине.
Чак и прва 4 типа полиморфизма помогли да се створи генетски слику људског генома.Подесите релативни положај маркера дозвољених колекцију, или банку, ћелијских линија изведених из свих чланова неколико стотина породица, који је укључивао бар три генерације.Ова банка ћелијских линија је створена у Француској за проучавање полиморфизма у ХЛА систему и веома корисни за генетичку мапирање људског генома.Након сваког хромозома је мапиран и нашао релативну позицију 10-15 полиморфних маркера, рад са узастопним маркера је изведена на материјал добијен од чланова ових породица.
Стварање физичке мапе генома У циљу стварања физички мапу генома, у клонирани фрагменти људског генома такође морао да обележи.Ово је постигнуто преко мање од секвенци( ДНК региона са већ дефинисан секвенцом), тзв СТС, чије хромозомски локализација се тачно зна.СТС се лако идентификују помоћу полимеразне ланчане реакције( ПЦР).Примио више од 50 000 СТС.расути широм генома, и током физичког мапирање се успоставља када узајамни аранжман ДНК фрагменти геномске библиотеке користе као маркери СТС преклапања ДНК сегменте.
дефиниција генома
људског наставку резимира главне резултате "нацрт" људског генома, који, како је већ речено, објављени су у фебруарском издању часописа «Природа» у 2001.
року "нацрт" се односи пре свега на чињеницида се дефиниција генома наставља.У вези са овим, у овом тренутку, студије не могу бити уређене по реду и усмјерити многе мале секвенце.Непотпуна редослед наравно представља проблем тек идентификовати гене наслеђене болести, јединствене гене и друге генетске структуре.
Треба напоменути да је у последњој четвртини 20. века.Секвенци су геноме 599 вируса и других микроорганизама, као и макроорганизми( животиње).Искуство стечено као резултат овог рада у потпуности се користи у секвенцирању људског генома.
стратеги Људски геном учења у јавном пројекту подразумева добијање генетске и физичке мапе људског генома, накнадно увођење ових картица резултата секвенцирања појединачних клонова геномске ДНК( секвенцирање "клон клона" стратегија).Физичка мапа људског генома је клонска основа, који је развијен од стране научника Олсон у 1981. Овај приступ је следећи.Геном је сјечен у сегменте делимичном дигестијом са ензимским специфичним ендонуклеазама.Ове велике ДНК сегменти су постављени у бактеријског вештачког хромозома( БАЦ), и унео у бактерије, где се копирају у свакој секцији бактерија.Као резултат, формирани су клонови идентичних молекула ДНК.Такви клони који покривају људски геном треба да буду отприлике 20 000.
Поред тога, раније развијене СТС картице су коришћене за утврђивање реда клонова.Резултат је физичка мапа генома.Појединачни БАЦ клонови су пресушени на фрагменте и клонирани.Проучавани су субклони добијени као резултат фрагмента клонирања.Сваки пут одређен велики број идентичних субклоновима бити сигуран да сваки део оригиналних БАЦ клонова анализира неколико пута и не дозвољене грешке.Секвенце појединачних фрагмената су комбиноване како би се добила секвенца нуклеотида у сваком почетном БАЦ клону.На крају, секвенца читавог генома је сакупљена комбиновањем секвенци БАЦ скупа који су преклапали читав геном.Тако креирана мапа секвенце људског генома има више од 1000 дисконтинуитета.Ово може бити због више разлога, а нарочито на чињеницу да су оригинални БАЦ клонови који покривају цео геном, као и преклапање између клонова недостају због присуства великих понављања у геному.Секвенцијална мапа створена као резултат имплементације пројекта укључује секвенце које садрже у просеку неколико милиона нуклеотидних парова дужине.Сегменти ове дужине су довољни да прекрије мапу засновану на клонима на другим мапама са нижим резолуцијом.Позиција на генетској мапи секвенционих секвенци такође је одређена у односу на мапирање СТС.
Генерално, секвенцирани и састављени уз помоћ компјутерских програма у протеже од око 90% еуцхроматин регионима генома.
Упркос непотпуност секвенцирање, број добијен уз помоћ резултата сада је од великог значаја.Ово се првенствено односи на продубљивање појма организације људског генома.