Детекција вируса хепатитиса Ц
ХЦВ у материјалу је обично одсутан.
разлику ХЦВ серолошки дијагностичке методе где откривају антитела на ХЦВ, ПЦР може открити присуство ХЦВ РНК и директно квантификовати његову концентрацију у тест матери
ле.Тест има специфичну специфичност и високу осетљивост: десет ХЦВ РНК молекула у тестираном материјалу су довољни за његово детекцију.Детекција антитела на ХЦВ само потврђује чињеницу инфекције пацијента, али не даје индикацију активног инфекције( вирусом за репликацију) и прогнозу болести.Поред тога, антитела на ХЦВ откривена у крви болесника са акутним и хроничним хепатитисом, као и оних пацијената који су болесни и опоравио, а често АТ у крви појављују само неколико месеци након почетка клиничке болести, што отежава дијагнозу.Детекција ХЦВ у крви помоћу ПЦР-а је информативнија дијагностичка метода.Детекција ХЦВ РНК у ПЦР сведочи о виремији, омогућава процену репликације вируса у телу и служи као један од критеријума за ефикасност антивирусне терапије.Детекција ХЦВ РНК помоћу ПЦР у раним фазама развоја вирусне инфекције на позадини потпуног одсуства било каквих серолошких маркера може послужити као најранији доказ инфекције.Међутим, изолована детекција ХЦВ РНК у односу на позадину потпуног одсуства било којих других серолошких маркера не може у потпуности елиминисати лажно позитиван резултат ПЦР-а.У таквим случајевима потребна је свеобухватна евалуација клиничких, биохемијских и морфолошких студија, уз поновљено поновљено потврђивање присуства ПЦР инфекције.Алгоритам за дијагностиковање ХЦВ применом ПЦР методе приказан је на Сл.
велике важности је примена ПЦР код пацијената са хроничном ХЦВ, јер већина њих нема корелацију између присуства вирусне репликације и активности ензима јетре.У таквим случајевима, само ПЦР омогућава процјену присуства репликације вируса, посебно ако је крајњи резултат изражен квантитативно.У већини случајева нестанак ХЦВ РНК из серума јавља касније нормализацију ензима јетре, међутим, њихов нормализација не може користити да прекину антивирусно лечење.
практични значај детектовати ХЦВ РНК помоћу ПЦР да испита не само серум крви, али и лимфоцити, гепатобиоптати.Вируси се могу детектовати 2-3 пута чешће у ткиву јетре него у серуму.Приликом процене резултата испитивања серумског крви за ХЦВ РНК, треба запамтити да виремија може варирати у природи( као што је промјена активности ензима).Стога, након позитивних резултата ПЦР студије, може се добити негативни резултат и обрнуто.У таквим случајевима, како би се ријешило сумње које се појављују, боље је истражити хепатобиобате.
Детекција ХЦВ РНК у материјалу који користи ПЦР користи се за следеће сврхе:
■ рјешавање упитних резултата серолошких студија;
■ диференцијација ХЦВ из других облика хепатитиса;
■ детекција акутне фазе болести у односу на преносену инфекцију или контакт;стадијум инфекције новорођенчади из серопозитивних ХЦВ мајки;
■ праћење ефикасности антивирусног третмана.
Све горе наведене карактеристике евалуације резултата и приступа дијагнози ХЦВ-а користећи ПЦР релевантне су за друге инфекције.
Метода ПЦР дозвољава не само откривање ХЦВ РНК у тестираном материјалу, већ и успостављање свог генотипа.Одређивање генотипа вируса је од великог значаја за избор пацијената са хроничним ХЦВ-ом у лечењу интерферона-алфа и рибавирина.Лабораторијске индикације за лечење хроничног ХЦВ интерферона алфа су следеће:
■ повећана активност трансаминаза;
■ присуство ХЦВ РНК у крви;
■ генотип 1 ХЦВ;
■ висока виремија у крви( више од 8к105 копија / мл).
Сада је могуће квантитативно одредити садржај ХЦВ РНК у крвном серуму помоћу ПЦР-а, што је од великог значаја за лечење интерферона алфа третмана.Ниво виремије се процењује на следећи начин: за ХЦВ РНК од 102 до 104 копије / мл - слаб;од 105 до 107 копија / мл - средња, изнад 108 копија / мл - висока.Са ефикасно лијечењем, ниво виремије се смањује.