Odkrivanje virusa hepatitisa C

HCV v materialu je navadno odsoten.

razliko HCV serološke diagnostične metode, kjer odkrivanje protiteles HCV, PCR lahko zazna prisotnost HCV RNA in se neposredno količinsko njegove koncentracije v preskusni gradiva

le. Preskus je vrstno specifičnost in visoko občutljivost: deset HCV RNA molekule v materialu dovolj za njegovo odkrivanje. Dokaz protiteles proti HCV samo potrjuje dejstvo okužbe pacientovega, vendar ne pokažeta aktivne okužbe( virus za replikacijo) in prognozo bolezni. Poleg tega, protitelesa proti HCV odkrili v krvi bolnikov z akutnim in kroničnim hepatitisom, kot tudi pri tistih bolnikih, ki so bolni in predelali ter pogosto AT v krvi pojavijo le nekaj mesecev po nastopu kliničnih znakov bolezni, zaradi česar je težko diagnosticirati. Odkrivanje HCV v krvi z uporabo PCR je bolj informativna diagnostična metoda. Identifikacija HCV RNA glede na dokaze PCR viremije, kaže replikacije virusa v telesu in je eno od meril za učinkovitost protivirusnega zdravljenja. Odkrivanje HCV RNA s PCR v zgodnjih fazah virusne okužbe na podlagi popolne odsotnosti seroloških označevalcev lahko prvi znaki okužbe. Vendar pa izoliramo odkrivanje HCV RNA v ozadju popolne odsotnosti drugih seroloških označevalcev ni mogoče povsem izključiti lažno pozitivni rezultat PCR.V takih primerih, celovito oceno kliničnih, biokemičnih in morfoloških študijah s ponavljajočimi se ponovi potrditev PCR prisotnosti okužbe. Algoritem za diagnosticiranje HCV z uporabo PCR metode je prikazan na sl.

velik pomen je uporaba PCR pri bolnikih s kronično HCV-ja, saj je večina od njih nimajo korelacijo med prisotnosti virusne replikacije in aktivnosti jetrnih encimov. V takih primerih samo PCR omogoča presojo prisotnosti virusne replikacije, še posebej, če je končni rezultat izražen kvantitativno. V večini primerov se pojavi izginotje HCV RNA iz seruma kasneje normalizacije jetrnih encimov, vendar pa je njihova normalizacija ni mogoče uporabiti za prenehanje antivirusno zdravljenje.

praktičen pomen za odkrivanje HCV RNA s PCR preučiti ne samo krvnega seruma, ampak tudi limfocitov, gepatobioptaty. Viruse je mogoče odkriti 2-3 krat pogosteje v jetrnem tkivu kot v serumu. Pri ocenjevanju rezultatov študiji krvnega serumskega HCV-RNA, je treba upoštevati, da lahko viremija nosijo niha učinek( kot tudi sprememba encimske aktivnosti).Zato lahko po pozitivnih rezultatih študije PCR dobimo negativen rezultat in obratno. V takšnih primerih je za rešitev dvomov, ki se pojavijo, bolje raziskati hepatobiobate.

Odkrivanje HCV RNA v materialu s PCR z uporabo naslednje namene:

ločljivosti ■ vprašljive rezultate seroloških raziskav;

■ razlikovanje HCV od drugih oblik hepatitisa;

■ odkrivanje akutne faze bolezni v primerjavi z okužbo ali stikom, ki se prenaša;faza okužbe novorojenčkov s seropozitivnimi materami HCV;

■ spremljanje učinkovitosti protivirusnega zdravljenja.

Vse zgoraj navedene lastnosti rezultatov ocenjevanja in pristopov k HCV diagnostike z uporabo PCR velja za druge okužbe. Postopek

PCR lahko zazna ne samo HCV RNA v materialu, temveč tudi, da vzpostavi svojo genotip. Določanje genotipa je velikega pomena za izbiro bolnikov s kronično HCV za izvedbo zdravljenje z interferonom alfa in ribavirinom. Laboratorijske indikacije za zdravljenje kronične HCV z interferonom alfa naslednja:

■ povečana aktivnost od transaminaze;

■ prisotnost HCV RNA v krvi;

■ genotip 1 HCV;

■ visoka viremija v krvi( več kot 8x105 kopij / ml).

sedaj mogoče izmeriti vsebnost HCV RNA v serumu s PCR, kar je zelo pomembno za konrolya za zdravljenje z interferonom alfa. Raven viremije se ocenjuje na naslednji način: za HCV RNA s 102 na 104 kopij / ml - šibka;od 105 do 107 kopij / ml - medij, nad 108 kopij / ml - visoka. Z učinkovitim zdravljenjem se raven viremije zmanjša.