Reacția în lanț a reacției polimerazice în diagnosticul bolilor infecțioase

PCR - una dintre metodele de diagnosticare ADN care să permită creșterea numărului de copii ale unei porțiuni detectabilă a genomului( ADN) de bacterii sau virusuri este de un milion de ori folosind o enzimă ADN polimerază.Un test pentru acest segment specific de acid nucleic genomic multiplicat în mod repetat( amplificat), care permite identificarea acestuia.În primul rând, o moleculă de ADN de bacterii sau virusuri prin încălzire împărțit în două lanțuri, apoi în prezența primerilor ADN sintetizat( secvență de nucleotide specifice genomic definit) este legarea lor cu porțiuni complementare ale ADN-ului, a sintetizat doua catenă a acidului nucleic după fiecare primer în prezența unei ADN polimerază termostabilă.Două molecule de ADN sunt obținute. Procesul se repetă de mai multe ori. Pentru diagnostic, este suficientă o moleculă de ADN, adică o bacterie sau o particulă virală.Reacționând un pas suplimentar - sinteza ADN-ului pe molecula de ARN utilizând enzima revers transcriptaza - a permis să testeze virusurile ARN, cum ar fi virusul HCV.PCR - proces în trei etape, cicluri repetate de denaturare, hibridarea amorselor, sinteza ADN( polimerizare).Cantitatea sintetizată de ADN este identificată prin ELISA sau prin electroforeză.

PCR poate fi utilizat diverse materiale biologice - ser sau plasmă sanguină, răzuire a uretrei, biopsia, lichidul pleural, lichidul cefalorahidian, etc. Primul PCR a fost utilizat pentru diagnosticarea bolilor infecțioase, cum ar fi HBV, HCV, HBV, infecția cu CMV, infecție sexual infecțioase cu transmitere( gonoree, gunoi diynaya, plasma mico, infecție ureaplasmal), tuberculoza, HIV și așa mai departe.d.avantaj

PCR în diagnosticul bolilor infecțioase asupra studiilor alte metode este următoarea: agent infecțios

■ poate fi detectată în orice mediu biologic al organismului, inclusiv acele materiale obținute prin biopsie;

■ Diagnosticul bolilor infecțioase în primele stadii ale bolii;

■ posibilă evaluarea cantitativă a rezultatelor cercetării( ca un virus sau bacterii conținute în materialul);

■ sensibilitate ridicată a metodei;de exemplu, sensibilitatea PCR pentru detectarea ADN-ului viral VHB in sange este 0,001grame pg / ml( aproximativ 4h102 copii / ml), în timp ce sensibilitatea unei metode de hibridizare a ADN folosind sonde ramificați - 2,1 pg / ml( aproximativ 7h105 copii / ml).