Imuno-eletroforese de proteínas séricas
As paraaproteínas no soro sanguíneo estão normalmente ausentes.
As imunoglobulinopatias ou gammopatias combinam um grande grupo de condições patológicas caracterizadas por hipergamaglobulinemia policlonal ou monoclonal. Ig consistem em duas cadeias pesadas( H)( peso molecular 50,000) e duas cadeias leves( L)( peso molecular 25,000).As cadeias são conectadas por pontes dissulfureto e consistem em estruturas chamadas domínios( H-out of 4, L-of 2 domain).Sob a ação das enzimas proteolíticas, a Ig é separada em fragmentos
: o fragmento Fc e o fragmento Fab. As cadeias pesadas de Ig humana são representadas por cinco variantes estruturais, que são indicadas pelas letras do alfabeto grego. Eles correspondem a 5 classes Ig - G, A, M, D, E. As cadeias leves são representadas por duas variantes estruturalmente diferentes: k( kappa) e X( lambda), que correspondem a dois tipos de Ig de cada classe. Em cada molécula de Ig, ambas as cadeias pesadas e leves são idênticas. Todas as pessoas normalmente têm Ig de todas as classes e ambos os tipos, mas seu conteúdo relativo não é o mesmo. A proporção de moléculas para e X em diferentes classes de Ig também não é a mesma. A detecção de uma violação de Ig ou seus fragmentos desempenha um papel crucial no diagnóstico de imunoglobulinas monoclonais. Monoclonal
immunoglobulinopatiya( paraproteinemia) - uma síndroma que é expressa na acumulação no soro e / ou urina de todos os pacientes com parâmetros biológicos homogénea físico-química e Ig, ou seus fragmentos. Ig monoclonal( paraproteínas, M-proteínas) - secreção produto clone único de linfócitos B( células de plasma), e, portanto, representam uma piscina estruturalmente homogénea de moléculas possuindo uma cadeia pesada de uma classe( subclasse) da mesma cadeia de tipo fino e a região variável da mesma estrutura. As imuno-globulinopatias monoclonais geralmente são divididas em benignas e malignas. Em formas benignas de gammapathias monoclonais, a proliferação de células plasmáticas é controlada( possivelmente pelo sistema imunológico) de forma que os sintomas clínicos estão ausentes. Em formas malignas, ocorre a proliferação descontrolada de células linfóides ou plasmáticas, que determina o quadro clínico da doença. A classificação de immunoglobulinopaty monoclonal mostrado na Tabela. .
Tabela de Classificação de immunoglobulinopaty monoclonal
tabela de classificação de proteínas séricas imunoelectroforese immunoglobulinopaty
monoclonais permite detectar mo-noklonalnye( patológica) IgA, IgM, IgG, da cadeia H e L, paraproteínas. Com eletroforese convencional, Ig normal, propriedades heterogêneas, estão localizadas na região y, formando um platô ou uma banda larga. Devido à sua homogeneidade, a Ig monoclonal migra principalmente para a zona Y, ocasionalmente para a região p e até para a região a, onde formam um pico alto ou uma faixa claramente delineada( gradiente M).
O mieloma múltiplo( doença de Rustitzky-Kahler) é a hemoblastose paraproteinêmica mais freqüente;é detectado não menos freqüentemente do que leucemia mielocitária e linfocítica crônica, linfogranulomatose e leucemia aguda. A classe eo tipo de Ig patológica segregadas pelo mieloma determinam a variante imunoquímica da doença. A freqüência de classes e tipos de Ig patológica no mieloma como um todo correlaciona-se com a proporção de classes e tipos de Ig normais em pessoas saudáveis (Tabela).
Além do aumento do conteúdo de Ig patológica no soro de pacientes com mieloma múltiplo, determina-se a Ig normal em uma concentração reduzida. O teor de proteína total aumenta acentuadamente - até 100 g / l. A atividade do processo com mieloma G é estimada pelo número de plasmócitos no ponto esternal, a concentração de creatinina e cálcio no soro( seu aumento no cálcio indica uma progressão da doença).A concentração de proteína M( na urina é chamada de proteína Bens-Jones) serve como critério para avaliar a progressão da doença no mieloma A.A concentração de paraproteínas no soro e na urina varia durante o curso da doença sob a influência da terapia.
Para o diagnóstico de mieloma múltiplo, os seguintes critérios são necessários [DeVita V. T. et al., 1989].
Grandes critérios
1. Plasmitatoma com base em resultados de biópsia.
2. Plasmocitose na medula óssea vermelha( mais de 30% das células).
3. Picos de Ig monoclonais( patológicas) na eletroforese da proteína do soro: mais de 35 g / l para o pico de IgG ou mais de 20 g / l para o pico de IgA.Excreção de cadeias k e lambda na quantidade de 1 g / dia ou mais, revelada por eletroforese de urina em um paciente sem amiloidose.
Pequeno critério
1. Plasmocitose na medula óssea vermelha de 10-30% das células.
2. Peg PI no soro em uma quantidade inferior à indicada acima.
3. Lesões letais dos ossos.
4. A concentração de IgM normal é inferior a 0,5 g / l, a IgA é inferior a 1 g / l ou a IgG está abaixo de 0,6 g / l.
Tabela concretizações imunoquímicas chave de mieloma múltiplo e suas características Tabela
chave concretizações imunoquímicas de mieloma múltiplo e
característicos para a fixação diagnóstico mieloma múltiplo requer pelo menos uma grande e uma pequena critério ou três pequenas critérios presença obrigatória indicados nos pontos 1 e 2.
Para determinar o estágio do mieloma, é utilizado um sistema Dury-Salmon padronizado, que reflete o volume de dano tumoral( Tabela) [Munker R. et al., 2000].Todos os grupos
mielomas divididas em subclasses, dependendo do estado da função renal: A - a concentração de creatinina no soro inferior a 2 mg%( 176,8 umol / L), B - 2 mg%.No mieloma alta concentração de b2-microglobulina no soro( mais de 6000 ng / ml) sugere um mau prognóstico, bem como uma elevada actividade de LDH( superior a 300 UI / L, o que representa a reacção a 30 ° C), anemia, insuficiência renal, hipercalcemia, hipoalbuminemia e um grande volume tumoral.
Doenças das cadeias pulmonares( mieloma Bence-Jones) representam aproximadamente 20% dos casos de mieloma. Com o mieloma de Bence-Jones, são formadas cadeias leves exclusivamente livres que são detectadas na urina( proteína Bens-John-sa), na ausência de Ig patológica sérica( gradiente M).Tabela fases
de múltiplos estágios mieloma
Tabela de mieloma múltiplo
concretizações imunoquímicas raras incluem não-secretoras paraproteínas mieloma de mieloma em que só pode ser detectada no citoplasma de células de mieloma e mieloma e mieloma diklonovye-M.macroglobulinemia de Waldenstrom
- leucemia crónica subleukemic, origem da célula B, morfologicamente representado por linfócitos, células de plasma, e todas as formas de transição de células que sintetizam RIgM( macroglobulina).O tumor tem um baixo grau de malignidade. Na medula óssea vermelha, a proliferação de pequenos linfócitos basofílicos( linfócitos plasmocitóides) é detectada, o número de mastócitos é aumentado. No electrophoregram proteínas séricas revelar zona M-gradiente B- ou y-globulinas, pelo menos paraprotein não migra num campo eléctrico, permanecendo no lugar. Imunoquimicamente, ele representa PIgM com um tipo de cadeia leve. A concentração de PIgM no soro sanguíneo com macroglobulinemia de Waldenstrom varia de 30 a 79 g / l. Em 55-80% dos pacientes, uma proteína Bens-Jones na urina é encontrada. A concentração de Ig normal no sangue diminui. A insuficiência renal se desenvolve com pouca frequência. Linfomas
.Os linfomas secretores de IgM são gravados com maior frequência, o segundo lugar é ocupado por linfomas paraproteinémicos que secretam IgG, os linfomas com paraproteinemia IgA são extremamente raros. A redução da concentração de Ig normal( geralmente em uma pequena extensão) com lim-phom é registrada na maioria dos pacientes.
Doenças de cadeias pesadas - tumores linfáticos de células B, acompanhados da produção de fragmentos monoclonais de cadeias pesadas de Ig. As doenças das cadeias pesadas são muito raras. Existem 4 tipos de doenças da cadeia pesada. A doença das cadeias pesadas nos homens geralmente ocorre em homens com menos de 40 anos, caracterizados por aumento do fígado, baço, linfonodos, edema do palato macio e da língua, eritema, febre. A destruição dos ossos, como regra geral, não se desenvolve. A concentração de globulina patológica no soro sanguíneo é baixa, a ESR é normal. As células linfóides e as células plasmáticas de diferentes graus de maturidade são encontradas na medula óssea. A doença prossegue rapidamente e acaba com a morte dentro de alguns meses. A doença das cadeias pesadas é detectada principalmente nos idosos, é mais frequentemente manifestada pela hepatoesplenomegalia. Tumor de substrato - elementos linfóides de vários graus de maturidade. São descritos casos simples de doença da cadeia pesada 8, que ocorre como um mieloma. A doença das cadeias pesadas é a forma mais freqüente, desenvolvendo principalmente em crianças e pessoas com menos de 30 anos, 85% dos casos estão registrados no Mediterrâneo. A imunoeletroforese do soro sanguíneo e da urina é o único método de diagnóstico da doença, uma vez que o gradiente M clássico no eletroforese de proteínas séricas está frequentemente ausente.
Jet Paraproteinemia ocorrer na presença de uma predisposição genética em resposta a infecções bacterianas e virais( hepatite, infecção CMV) ou de uma infestação parasítica( leishmaniose, toxoplasmose, esquistossomose).Esta forma de imunoglobulinopatia monoclonal foi registrada durante transplante de órgãos, tratamento com citostáticos, imunodeficiências hereditárias ou adquiridas. As paraproteinemias transitórias são caracterizadas por baixas concentrações séricas de PIg, a ausência ou vestígios da proteína Bence-Jones na urina.
A paraproteinemia associada acompanha uma série de doenças na patogênese das quais os mecanismos imunes desempenham um papel: doenças auto-imunes, tumores, infecções crônicas. Essas doenças incluem AL-amiloidose e crioglobulinemia.
A paraproteinemia idiopática ocorre nos idosos e pode ser premiada. Nesses casos, é necessário um exame minucioso para identificar o estágio inicial da doença e a observação dinâmica prolongada.
Paraproteinemia benigna Os sintomas incluem: ausência de proteína de Bence-Jones, alterações na concentração de Ig normal, o número de células de plasma no pontuada medula óssea menos do que 15%, menos do que 20% de linfócitos, concentração paraprotein soro é inferior a 30 g / l.