Agregação de plaquetas com ristocetina
Os valores de referência da atividade do fator von Willebrand são 58-166%.
von Willebrand fator sintetiza células endoteliais e megacariócitos.É necessário a adesão normal das plaquetas e tem a capacidade de prolongar a meia-vida do fator VIII.O factor VIII de coagulação de plasma - globulina anti-hemofílico A - circula no sangue como um complexo de três subunidades, designada VIII-k( unidade de coagulação), VIII-AH( principal marcador antigénico) e VIII-vWF( factor de von Willebrand associada com VIII-Ar).Acredita-se que o fator de von Willebrand regula a síntese da parte de coagulação da globulina A anti-hemofílica( VIII-k) e participa da hemostasia plaquetária vascular.doença de
de von Willebrand - uma doença hereditária, que é caracterizada por um aumento da duração da hemorragia, redução de urra actividade ristocetina-cofactor e uma diminuição( em diferentes graus) de actividade coagulante do factor VIII.As manifestações clínicas da doença são semelhantes às da trombocitopatia. No entanto, em pacientes com uma diminuição significativa na atividade do fator VIII, podem-se observar hematomas e hemartroses.
Com base em estudos de laboratório que determinam a estrutura e a atividade do fator de von Willebrand, as seguintes formas da doença são distinguidas.
■ Tipo I( 70% de todos os casos) é caracterizada por uma ligeira cofactor-ristocetina gota( factor de von Willebrand) e actividade coagulante( VIII-k) durante estrutura macromolecular normal do factor de von Willebrand.
■ Tipo II: a base é a deficiência seletiva de polímeros do fator de Willebrand de alto peso molecular devido a anormalidades na estrutura desta proteína.
O tipo de PV é devido ao aumento da interação entre o fator de von Willebrand e as plaquetas, e a depuração aumentada dos agregados plaquetários leva à trombocitopenia.
■ O tipo III é caracterizado por um déficit quantitativo severo do fator de von Willebrand, o que leva a uma diminuição clinicamente significativa da atividade do fator VIII( VIII-k).
O conteúdo do fator von Willebrand é determinado nos casos em que o tempo de sangramento é aumentado, o número de plaquetas está dentro dos valores de referência e não há causas óbvias de disfunção plaquetária. Para avaliar o factor de von Willebrand, a determinação do conteúdo quantitativa de factor de von Willebrand( pesquisa de actividade ristocetina-cofactor) foi examinada induzida por ristocetina aglutinação de plaquetas e a estrutura antigénica vWF relacionado com o factor VIII( VIII-vWF).
A determinação da agregação plaquetária com ristocetina no plasma é utilizada para quantificar o fator de von Willebrand. Foi estabelecida uma relação linear entre o grau de agregação ristocetinica e a quantidade de fator de von Willebrand. O método é baseado na capacidade deste
Fig. Rotas de agregação plaquetária e pontos de aplicação antiplaquetária
Fig. As formas de agregação plaquetária e o ponto de aplicação de antibióticos antiplaquetários
( ristocetina) estimulam a interação in vitro do fator von Willebrand com a glicoproteína Ib de plaquetas. Na maioria dos casos de doença de von Willebrand, há uma violação da agregação de ristocetina com uma resposta normal aos efeitos de ADP, colágeno e adrenalina. A perturbação da ristocetina-agregação também é encontrada na trombotransfisia macrocítica de Bernard-Soulier( ausência de receptores de agregação ristocetinica na membrana plaquetária).Para a diferenciação, é utilizado um teste com adição de plasma normal: com a doença de von Willebrand após a adição de plasma normal, a agregação de ristocetina é normalizada, enquanto na síndrome de Bernard-Soulier isso não acontece.
O estudo também pode ser usado no diagnóstico diferencial de hemofilia A( deficiência do fator VIII) e doença de von Willebrand. Na hemofilia, o conteúdo de VIII-k é acentuadamente reduzido e o conteúdo de VIII-PV está dentro do intervalo normal. Clinicamente, essa diferença é manifestada pelo facto de que na hemofilia ocorre tipo gematomny de aumento da hemorragia, e com a doença de von Willebrand - petequiais-gematomny [Ogston D., Bennett, B., 1977].
A aglutinação de plaquetas induzida por Ristocetina é reduzida na maioria dos casos de doença de von Willebrand, com exceção de PV.
estrutura antigénica do factor de von Willebrand ligado ao factor VIII( VIII-vWF), a identificação de vários métodos imunológicos, mas a distribuição de factor de von Willebrand por tamanho molecular determinado por electroforese em gel de agarose. Esses testes são usados para estabelecer o tipo de doença de von Willebrand.
O estudo da agregação plaquetária com vários indutores é realizado não só para detectar anormalidades das funções de agregação das plaquetas. Este estudo permite avaliar a eficácia da terapia antiplaquetária, selecionar doses individuais de drogas e realizar o monitoramento de medicamentos. Na Fig.os principais medicamentos com efeito antiplaquetário e os pontos de sua aplicação estão listados.