womensecr.com
  • Reakcja łańcuchowa polimerazy

    click fraud protection

    PCR - Najnowsze postępy w genetyce molekularnej stosowane do amplifikacji DNA i pozwala szybko rozprzestrzeniać in vitro konkretny kawałek

    DNA( czyli każdy interesujący gen) jest ponad 200 000 razy. Aby przeprowadzić reakcję, wystarczy posiadać materiał DNA z jednej komórki;liczba PCR wzmocnionego DNA jest tak duża, że ​​DNA może być w prosty sposób pomalowane( zastosowanie sond radioaktywnych nie jest wymagana po elektroforeza).Warunkiem koniecznym do PCR - znajomość sekwencji nukleotydowej amplifikowanego regionu DNA do odpowiedniego doboru sztucznie zsyntetyzowane startery nukleotydów.

    Obecnie PCR jest procesem, który zachodzi w pojedynczej rury, składające się z powtarzających się cykli amplifikacji( reprodukcja, kopia) specyficznych sekwencji DNA w celu uzyskania dostatecznie dużej liczby kopii, które można zidentyfikować za pomocą elektroforezy. Jednym z kluczowych elementów w reakcji - „podkłady” - syntetyczne oligonukleoti-DY składający się z 20-30 podstaw komplementarny „Strony”( obszary) wyżarzania( połączenie) do zidentyfikowania części matrycy DNA.

    instagram viewer

    PCR odbywa się automatycznie w programowalnym termostatem - termocykler( termocykler).Cykl trzech etapach, w których otrzymuje się repliki identyfikujące część matrycy DNA powtórzono 30-50 razy, zgodnie z ustalonym z góry programem cyklu termicznego-RA.W pierwszym cyklu oligoprimer hybrydyzacji z oryginalnej matrycy DNA, a następnie( w kolejnych cyklach) i świeżo zsyntetyzowanych cząsteczek DNA jako ich akumulacji w mieszaninie reakcyjnej. W tym ostatnim przypadku, synteza DNA, nie kończy się w wyniku zmian temperatury, a po osiągnięciu przez polimerazy DNA amplifikowano vannogo części brzegowe, która określa wielkość nowo syntetyzowanych regionu DNA do jednego nukleotydu.

    jako sposób wykrywania cząsteczki DNA, uzyskanych przy użyciu elektroforezy w którym rozdzielanie odbywa amplifi niematerialne kwalifikacjach wielkości amplikonów( produkty amplifikacji).

    Korzystanie PCR można bezpośrednio badać przypuszczalną lokalizację mutacji lub miejsce polimorficzne, a także w celu zbadania obecności innych specyficznych cech DNA.