Reakcja łańcuchowa polimerazy w diagnostyce chorób zakaźnych

PCR - jedną z metod diagnostyki DNA umożliwiających zwiększenie liczby kopii wykrywalnego fragmentu genomu( DNA), bakterii i wirusów jest milion razy stosując enzym polimeraza DNA.Test na tym segmencie genomowego kwasu nukleinowego wielokrotnie mnożone( amplifikowany), który pozwala na jego identyfikację.Po pierwsze, cząsteczki DNA bakterii lub wirusów przez ogrzewanie podzielona na dwa łańcuchy, a następnie w obecności zsyntetyzowane startery DNA( sekwencja nukleotydów specyficzne dla określonego genomowego) wiąże ich z odpowiednimi odcinkami DNA syntetyzowane drugą nić kwasu nukleinowego, po każdego startera w obecności termostabilnej polimerazy DNA.Otrzymano dwie cząsteczki DNA.Proces powtarza się wiele razy. Dla diagnostyki tylko jedna cząsteczka DNA, to znaczy jedna bakteria lub cząstek wirusów. Dodatkowy etap reakcji - synteza DNA w cząsteczce RNA przy użyciu enzymu odwrotnej transkryptazy - pozwoliła sprawdzić, wirusów RNA, takich jak wirus HCV.PCR - trzyetapowy proces, powtarzające się cykle denaturacji, przyłączania starterów do syntezy DNA( polimeryzacji).Ilość DNA syntetyzowane identyfikowano za pomocą testu ELISA lub elektroforezy.

PCR można stosować różne materiały biologiczne - surowicę lub osocze krwi, wymazu z cewki moczowej, biopsji, płynu opłucnowego, płynu mózgowo-rdzeniowego, etc. Pierwszy PCR w diagnostyce chorób zakaźnych, takich jak HBV, HCV, HBV, zakażenie CMV seksualnie zakaźny( zakażenie rzeżączką, śmieci diynaya, osocze MójKomp, zakażenie ureaplasmal), gruźlica, HIV i tak dalej.e. Zaletą

PCR w diagnostyce chorób zakaźnych powyżej badania inne metody jest następujący:

■ czynnik zakaźny można wykryć w każdym środowisku biologicznym w organizmie, w tym tych materiałów otrzymanych w wyniku biopsji;

■ możliwość diagnozy chorób zakaźnych, w najwcześniejszych stadiach choroby;

■ możliwa ocena ilościowa wyników badań( jako wirusa lub bakterii zawartych w materiale);

■ wysoka czułość metody;na przykład, czułość PCR w celu wykrycia DNA wirusa HBV we krwi wynosi 0,001 pg / ml( około 4h102 kopii / ml), podczas gdy czułość metody hybrydyzacji DNA za pomocą sondy rozgałęzione - 2,1 pg / ml( około 7h105 kopii / ml).