ניתוח אימונזינזים( EIA) - גורם, תסמינים וטיפול.MF.

immunosorbent assay( ELISA) - חקירת מעבדה מודרנית, שבמהלכו החיפוש להיות נוגדנים או אנטיגנים ספציפיים בדם למחלות ספציפיות לזהות לא רק האטיולוגיה אבל גם השלב של מחלה.התוצאות של ELISA ניתן לתת איכותית וכמותית.

לעכשיו EIA מוחל במצבים הבאים:

1) חיפוש עבור נוגדנים ספציפיים לכל מחלה מדבקת;
2) לחפש אנטיגנים של כל מחלות( זיהומיות, מין);
3) בדיקה של הסטטוס ההורמונלי של המטופל;
4) בדיקה עבור oncomarkers;בדיקה עבור נוכחות של מחלות אוטואימוניות.שיטת יתרונות ELISA

:

1) סגולי גבוהה ורגישות של ELISA( מעל 90%).
2) יכולת לקבוע ולפקח על דינמיקת תהליך המחלה, דהיינו השוואת כמות הנוגדנים במרווחי זמן שונה.
3) זמינות של אבחון ELISA בכל מוסד רפואי.

חוסר יחסית:

1) איתור של תגובה חיסונית( נוגדנים), אבל לא של הפתוגן.מושגי

לפני להבהיר את מהות שיטת ELISA, בקצרה זה להבין מושגים מסוימים.נוגדנים
( או אימונוגלובולינים - איג) - חלבונים ספציפיים המיוצרים על ידי B - לימפוציטים
( תאי מערכת החיסון) בתגובה כניסתו לגוף של פתוגן זיהומיות( וירוס, חיידקים, פטריות, וכו ').מפרישות אימונוגלובולינים( IgA), אימונוגלובולין E( IgE), אימונוגלובולינים M( IgM), אימונוגלובולינים G( IgG), אימונוגלובולינים D( IGD).הם נבדלים זה מזה ויוצרים / nonparticipation השתתפות בחיים חצי מולקולרי המונים בתהליכים זיהומיות, לזהות את העיתוי מרגע ההדבקה.אם ניקח בחשבון את המשקל המולקולרי, הכי הוא IgM - הוא pentamer( 950,000 דא), בניגוד לשאר איג( מ 150 ל 200 000 Da), כך IgM פשוט לא יכול לעבור דרך מחסום השליה.לכן, זיהוי IgM בתינוק בן שנה הוא תמיד סימן של זיהום בעובר.עיקר אימונוגלובולינים סרום מיוצג IgG( 75-85%), והנמוך ביותר - IgE( 0003%).תהליך זיהומיות מעורב ישירות לוקח רק IgA, M, ג IgE הוא סימן של תגובות אלרגיות ומצבים, ו IGD - ניתן לאתר רק את הלימפה ורקמות שקדים, משחק תפקיד ביצירת החסינות מקומית.כיתות

של אימונוגלובולינים

אנטיגנים - משקל מולקולרי גבוה חומרים אורגניים, ב פתוגנים זיהומיות בפרט ומחלות אחרות, כמו גם תאים מהונדסים חומרים שונים המיוצרים מחלה מסוימת( מחלה אוטואימונית, סרטן).

מורכב החיסון הוא קומפלקס נוגדן אנטיגן המעורב בתהליך החיסון.מהי שיטת ה- IFA?

כמה סוגי ELISA מובחנים( ישירה, עקיפה, מתחרי שיטת חסימה), אבל בפועל נפוצים ביותר immunoassay אנזים הטרוגנית או ELISA( אנזים assay immunosorbent המקושר)

בסיס immunoassay של התגובה החיסונית של אנטיגן הנוגדן להקים קומפלקס חיסוני: אנטיגן-אנטיבודי, וכתוצאה מכך שינוי בפעילות האנזימטית של תוויות ספציפיות על פני השטח של נוגדנים.השיטה

ELISA

במונחים פשוטים, תהליך זה יכול להיות מחולק לכמה שלבים:

1) על פני השטח של צלחת רופא-חור, הבוחן הוא הפתוגן specific antigen המטוהר.בעת הוספת החומר הביולוגי( בסרום דם) של תגובת מטופל ספציפית מתרחש בין אנטיגן לבין הנוגדנים הרצויים( אימונוגלובולינים).תרכובת זו תפעל בשלב הבא בתור "אנטיגן מיוחד".

2) בשלב זה של היווצרות הוא IR( מתחמים חיסוניים) - התגובה בין "אנטיגן ספציפי" ו המצומד( אימונוגלובולינים זה שכותרתו עם אנזים peroxidase).כרום מיוחד נוסף.התוצאה של תגובת אנזימטית זו היא ההיווצרות של חומרים צבעוניים הבארות הצלחת, את עוצמת הצבע של אשר תלוי במספר של אימונוגלובולינים חולים( נוגדנים) כלולים בחומר.

3) בהמשך הפרשנות שם: הפוטומטריה באמצעות ספקטרופוטומטר רב ערוצית השוואת הצפיפות האופטית של חומר למבחן עם צפיפות אופטית של דגימות בקרה, תוצאות עיבוד מתמטיות.כמות הנוגדנים אצל המטופל תלוי בגובה של הצפיפות האופטית של הבארות.

נהוג להשתמש 96 צלחות היטב.סכום

( או ריכוז) של נוגדנים בנפח יחיד בפרט כאשר מדידת הצפיפות האופטית( OD) של נוזל המדגם מחושב.תוצאת מושווה אז עם מדגם מלא.

יש לזכור: לכל מערכת בדיקה פותחה כדי להביא תוצאות ביצועים אישיים חשבון, סטנדרטים גבוהים והפתולוגיה( כלומר "ער ייחוס").זה אמור להיות מובא בחשבון בעת ​​הערכת התוצאות של כל מקרה.לפרש נכון את התוצאות של מעבדת מעבדת "ערכי ייחוס" אחרת.זה גם לא נכון להשוות תוצאות ממעבדות שונות ביחד.בעת הגדרת תגובות

ELISA ויש לו מושג כזה ערך כמו שׁוֹקְקוּת נוגדן.הלהיטות
נוגדן - נוגדן זה את הכוח מחייב אנטיגן ואת כמות האנטיגן הממוקם הגומלין עם immnoglobulinami( נוגדנים).להיטות היא בעלת חשיבות רבה בהערכת הזיהום לכאורה של המונח, וזה מאוד חשוב באבחנה של זיהום ראשוני אצל נשים בהריון.מבחן שׁוֹקְקוּת

בסיס נוגדן מורכב הטיפול מורכב החיסון( אנטיגן-נוגדן) תמיסת אוריאה כדי להרוס את החלבון.קישורי Vysokoavidnye נותרו על כנן, ועל להיטות נמוכה נהרסה.התוצאה ניתנת כמדד שׁוֹקְקוּת, מבוטא באחוזים( %).מחלות מה

מזוהים על ידי-אבחון ELISA?

1. מחלות זיהומיות הפטיטיס A ויראלי 1.1
( IgM, G), B אנטיגנים -HBsAg, HBeAg, נוגדן - IgM HBcorAg, איג הכולל HBcorAg, IgG HBeAg), C( M איג נוגדן, G HCV), D( IgM,G), E( Ig M, G) ואחרים.
1.2 הידבקות ב- HIV( IgG)
1.3 זיהום ציטומגלווירוס( נוגדנים IgM, G)
1.4 אפשטיין בר זיהום או mononkleoz( IgM נוגדנים, G כדי EA, VCA, חלבונים NA של הנגיף)
1.5 זיהומים herpetic( נוגדן IgM, G)
1.6 טוקסופלזמוזיס( נוגדן IgM, G)
1.7 רובלה( IgM, G)
1.8 חצבת( IgM, G), ברוצלוזיס( IgM, G), pseudotuberculosis( IgM, G), סלמונלה( IgM, G), Shigellosis או דיזנטריה(IgM, G), אספרגילוס( IgM, G), דלקת המוח Tick שמקורן, borreliosis, ועוד רבים אחרים.
1.9 parasitosis( giardiasis, toxocariasis, שערנת, opistorhoz, echinococcosis, alveococcosis ואחרים) שבו STD 1.10 זוהה IgG
( המועברת באמצעות מגע מיני מחלות דרך) - Mycoplasmosis( IgM, G), Ureaplasmosis( IgM, G), כלמידיה( IgA, M, G), עגבת( IgG)
1.11 זיהום הליקובקטר( IgG)

2. סמנים למחלות אוטואימוניות מדדי חסינות האדם ( IgE הכולל, IgG הכולל, IgA הכולל, IgM הכולל, IGD הכולל, הפרשה IgA, IgG 2, IgG4, CRC במחזור מתחמי החיסון, נוגדנים IgA ו- IgG כדי גליאדין ואחרים)

3. סמנים Onkologichsekie ( FNאודות - TNF, CEA - אנטיגן carcinoembryonic, PSA - אנטיגן ספציפי לערמונית, hCG - גונדוטרופין כוריוני אנושי, CA 125, alveomutsin ועוד רבים אחרים)

4. הפרעות פוריות לי( אסטרדיול, פרוגסטרון, פרולקטין, טסטוסטרון, AFP AFP-FSH - הורמון מגרה זקיק ואחרות)

5. מחלות התריס( T3 חינם וכרוך, T4, thyroglobulin, peroxidase התריס - TPO, תירוטרופין - TTG).

רשימה זו היא בהחלט לא כולן המחלות מאובחנות על ידי ELISA.חומר

עבור החומר הנפוץ ביותר

גדר ניתוח ELISA ומשול לתגובות ELISA - סרום של המטופל, לקחת על קיבה ריקה.החומר יכול לשמש גם נוזל השדרתי, מי שפיר, תוכן זגוגי, ריר של מטליות תעלת שופכת צוואר רחם.חולי

כנות לקראת הלידה של חומר IFA

הדם נלקחים על בטן ריקה.לפני מסירת הדם לא צריך לקחת שום תרופות.טיפול ספציפי( אנטיבקטריאלי, אנטי, פרזיטים, וכן הלאה) יש להפסיק לפחות לפני 2 שבועות המחקר.

ייצור IFA תאריכי

ניתוח Immunoenzymatic של החומר מתבצע במהירות, במהלך היום.עיכובים יכולים להיות במעבדות שונות בשל הצטברות של מספר מסוים של sera.תוצאות אפשריות

אבחון ELISA כאשר הערכת התוצאות על דלקת ספציפית נוגדני מעמד חשובים זוהו ומספרם.זה משפיע לא רק על שאלת האטיולוגיה של דלקת( כלומר זה או לא), אבל בשלב המשוער של המחלה( האקוטית וכרונית), כמו גם הנוכחות של זיהום פעיל( האקוטית או חמרה של כרוני) בעת הסקר.

מה הם התנאים המקורבים למראה הנוגדנים( אימונוגלובולינים-איג)?

הנוגדנים המוקדמים ביותר הם IgM .זיהוי זה יכול להיות 1-3 שבועות לאחר זיהום אפשרי, המאפיין את השלב החריף של תהליך זיהומיות.המצב השני עם הופעת הנוגדנים IgM הוא הפעלה( או החמרה) של התהליך הכרוני.IgM נוגדנים להפיץ בממוצע על 3 חודשים, ואז מספרם בהדרגה נעלם.עם זאת, בחולים מסוימים, כמויות של IgM מעקב ניתן לזהות בתוך 1-2 שנים מזמן ההדבקה.

מערכות בדיקה מודרניות בעלות רגישות גבוהה, וכתוצאה מכך תוצאות חיוביות שגויות לא ספציפיות( לעיתים קרובות אצל נשים בהריון).לכן, בקבוצה זו של חולים, IgM חיובי יש לבדוק מחדש!

נוגדני IgA מופיע 2-4 שבועות לאחר ההדבקה, אך בסכום מספיק כדי לזהות - חודש.סרום IgA מסונתז על ידי תאי פלזמה של הטחול, בלוטות לימפה ו IgA פרשה הרירי התרכז ריריות לבצע התפקיד ההגנתי שלה - מעורב חסינות מקומית.

על פוסט-זיהום 4 שבוע מתחילים להופיע נוגדנים מסוג IgG .ברוב הדלקות, titer שלהם עולה בהדרגה עם מקסימום בזמנים שונים( בממוצע לאחר 1.5-2 חודשים), אז titer נשאר ברמה נמוכה מציין חסינות.בשנת מחלות מסוימות( mycoplasmosis, כלמידיה, trichomoniasis) רמת IgG הוא לא גבוה, מצטמצם משמעותית בשל העדר חסינות ב זיהומים אלה.התגלמויות

זיהוי של נוגדנים מסוגים שונים:

- זיהוי נוגדני IgM בודד מניח זיהום ראשוני
.
- זיהוי סימולטני של IgM דם וזיהומים העיקרי
מאפיין IgG ב 2-3 החודשים הקודמים, כמו גם החמרה של מחלה כרונית.לכן, בהיריון, הנוכחות של IgM אינה תמיד סימן לדלקת ראשונית.
- איתור של IgG מבודד ועשוי להצביע על חסינות כדי המחלה,
ו דלקת כרונית.במצב השני, מספר הנוגדנים( titer) הוא גם חשוב, ואת השינוי titer זה בדינמיקה.בדרך כלל, מחקרים נערכים במרווחים של 2-4 -6 שבועות.
- איתור IgA מבודד או עם IgM מצביע על דלקת ראשונית.כאשר מראה
עם IgG IgA להניח הפעלה של דלקת כרונית( בממוצע 2 שבועות מהרגע של חמרה).

שׁוֹקְקוּת Definition נוגדנים מסוג IgG מהווה השלמה מצוינת לשלב האבחנה של זיהום ראשוני מהזיהום ארוכת שנים כי יש משמעות קלינית שלה, במיוחד כאשר מעריכים את הסיכון לזיהום תוך רחמי של העובר.זיהוי של IgG ברמה נמוכה מציין זיהום ראשוני מזוהה בממוצע 4-6 חודשים לאחר ההדבקה, לעתים קרובות יותר.מינון נמוך IgG דורש ראיות מעבדה אחרות של זיהום ראשוני( IgM).נוגדנים גבוהים הם גם סימן למחלה כרונית או להחמרה שלה, או לחסינות נוצר.

במיוחד אצל תינוקות: אצל ילדים מתחת לגיל שנה אחת, ולפעמים אפילו 1.5 שנים בדם מחזורי נוגדנים מסוג IgG אימהי לזיהומים שונים( כלומר, לא היה חדירה שלהם דרך השליה מהאם לעובר ברחם).זה לא כשלעצמו סימן של זיהום בהווה.אם באותו גיל נמצא IgM( זכרו כי איגמה אימהית אינה יכולה לחדור לשיליה), אז זהו סימן לזיהום תוך רחמי או לזיהום שנרכש לאחר הלידה.

שיטת ELISA כמותית

התוצאה של האבחון של ELISA( בעזרת אימונואיסאי אנזים) ניתנת ביחידות מסוימות:
- צפיפות אופטי( OP) של המדגם היא ריכוז של נוגדנים ספציפיים ליחידת נפח.ככל המדגם OP, ריכוז גבוה יותר של נוגדנים.תוצאות מסוימות מתייחסות למקדם של חיובי( KP) - זה גם צפיפות אופטית של המדגם.
- יחידות של ריכוז נוגדן( nanogram / milliliter או ng / ml).
- בצורה של titers בסרום: 1:20, 1:40, 1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1200 וכן הלאה.אבחנות אבחון( שבהן המחלה מאובחנת, ולא עובדה של זיהום) עבור מחלות שונות הם שונים.
- בצורת סמלים - "+", "-", "?"( +, +, +++, ++++).
- בצורה של הערכה איכותית המבוססת על קריטריון נתון( חיובי או שלילי).

נכון להעריך את מספר הנוגדנים, וריאציה של זיהוי מחלקה של אימונוגלובולינים, וכתוצאה מכך, לחשוף את השלב של המחלה ואת הצורך בטיפול יכול להיעשות רק על ידי רופא.

אין לשכוח כי עבור כל מערכת בדיקה, "ערכי הייחוס" שלהם( גרסאות של הנורמה) מפותחים, כאשר עולה על איזו מחלה או אחרת מאובחנת( וריאציות פתולוגיה).עבור מערכות בדיקה שונות, "ערכי הייחוס" שונים.

השוואה נכונה של תוצאות ELISA שנלקחו בדינמיקה אפשרית רק אם הם מיוצרים באותה מעבדה.

רופא infektsionist Bykova N.I.