Analiza cerebrospinalne tekućine( Cerebrospinalna tekućina) - Uzroci, simptomi i liječenje. MFS.
( ili cerebrospinalna tekućina leđne, CSF) - biološka tekućina, neophodno za funkcioniranje u CNS.Njegovo istraživanje jedno je od najvažnijih vrsta laboratorijskih istraživanja. Sastoji se od pre-analitičke faze( priprema predmeta, prikupljanje materijala i njegova isporuka do laboratorija), analitički( zapravo radi istraživanja) i poslijeanalitičkih( transkript rezultat).Samo ispravno izvršavanje svih manipulacija u svakoj od ovih faza određuje kvalitetu analize.
cerebrospinalna tekućina( CSF), a formira se u koroidni pleksus komore mozga. U odraslim subarhnoidalnyh prostora istovremeno i cirkulira u klijetki mozga od 110-160 ml CSF, u spinalni kanal - 50-70 ml. Tekućina se formira neprekidno brzinom od 0,2-0,8 ml / min, što ovisi o intrakranijalnom tlaku. Dan u zdravoj osobi formira se 350-1150 ml cerebrospinalne tekućine. Tekućina
dobivena punkcijom spinalnog kanala, češće - lumbalne - u skladu s postupcima poznatih neurologa i Neurokirurzi. Njegove prve kapi uklanjaju se( krv "putovanja").Zatim se otopina prikupi najmanje dvije cijevi: cijev u konvencionalnom( kemijski, centrifugi) za opći klinički i kemijsku analizu, sterilnu - za bakteriološku ispitivanja. Na obrascu upućivanje na CSF ispita liječnik treba odrediti ne samo ime pacijenta, ali i kliničku dijagnozu i svrhu istraživanja. Imajte na umu da
dostavljaju uzorke likera laboratorijskih treba zaštititi od pergrevaniya ili ohladi i uzoraka za otkrivanje bakterijski polisaharidi serogicheskih ispitivanja mora biti zagrijana na vodenoj kupelji kroz 3 min.
Zapravo laboratorij studija cerebrospinalnu tekućinu( analitička faza) provodi se u skladu s pravilima prihvaćeni u kliničkom laboratoriju u analizi bilo biološke tekućine, a obuhvaća sljedeće korake:
- makroskopska analiza - procjenu fizikalno-kemijska svojstva( veličinu, boju znakova),
- brojenjem stanica,
- mikroskopom nativni pripremu i citološka boji proizvoda;
- biokemijska studija,
- mikrobiološki pregled( prema indikacijama).
Smatramo primjerenim i informativan u nekim slučajevima dopuni studiju CSF imunološke i eventualno - drugih ispitivanja, od kojih je značaj se raspravlja u literaturi. Objašnjenje pokazatelji
otopina
Normal CSF i bezbojna porozrachna( kao što je destilirana voda, u usporedbi s fizikalna svojstva koja općenito opisuje CSF).Sivkasta
ili sivo-zelena tekućina je obično uzrokovana primjese bakterija i leukocita. Crvena CSF različitih intenziteta( eritrohromiya) pokreće primjesom eritrocita javljaju kada je svježe krvarenje ili ozljede mozga. Vizualno se otkriva prisutnost crvenih krvnih zrnaca kada njihov sadržaj iznosi više od 500-600 u μl. U patološkim procesima
tekućina može biti ksantohromnoy - obojeni žuto ili žutosmeđe produkata razgradnje hemoglobina. Potrebno je zapamtiti i lažno xanthrochromy - boju tekućine uzrokovane medicinskim pripravcima. Rjeđe susrećemo zelenkastu boju CSF-a( purulentni meningitis, apsces mozga).U literaturi se opisuje boju i korchnevy liker - prebacivanje karniofaringiom ciste u cerebrospinalnoj putu tekućine.
Zamućenje cerebrospinalne tekućine može biti posljedica nečistoća krvnih stanica ili mikroorganizama. U potonjem slučaju, zamućenje se može ukloniti centrifugiranjem. Kada CSF sadrži povećanu količinu grubo raspršenih proteina, ona postaje opalescentna.
Relativna gustoća cerebrospinalne tekućine dobivena s lumbalnom punkcijom, 1.006-1.007.Uz upalu meninga, traume mozga, relativna gustoća cerebrospinalne tekućine raste do 1.015.Smanjuje se hiperprodukcijom cerebrospinalne tekućine( hydrocephalus).Kada
Povišene razine fibrinogena u CSF formira film ili fibrozni ugrušak koji se javlja češće tuberkuloznu meningitisa. Ponekad testna cijev s tekućinom ostaje na sobnoj temperaturi tijekom jednog dana( ako je potrebno točno odrediti - je li film oblik?).U prisutnosti fibrinozni njen filmski dissecting igle prenosi na staklenu ploču i obojeni s Ziehl-Neelsen ili drugim postupkom za identificiranje mikobakterije. Normalan CSF je 98-99% vode.
Ipak, proučavanje njegovog kemijskog sastava važan je zadatak. To uključuje određivanje razine bjelančevina, glukoze i klorida, au nekim slučajevima dopunjuju i drugi pokazatelji.
Protein u tekućini
Više od 80% CSF proteina dolazi iz plazme ultrafiltracijom. protein postotak sadržaja u različitim dijelovima: ventrikularna - 0,05-0,15 g / l, cisternal 0,15-0,25 g / l, lumbalni 0,15 do 0,35 g / l. Za određivanje koncentracije proteina u likvoru može se koristiti bilo koji od standardnih metoda( s sulfosalicilna kiselina i amonij sulfata, i drugi).Povećani sadržaj proteina u cerebrospinalnoj tekućini( hiperproteinarhija) može biti posljedica različitih patogenih čimbenika( tablica 1).
studija CSF proteina omogućuje ne samo pojasniti prirodu patoloških procesa, ali i procijeniti stanje krvno-moždanu barijeru. Pokazatelj za te svrhe može poslužiti kao albumin pod uvjetom da se njena razina u CSF odredi pomoću imunokemijskih metoda. Određivanje albumin se provodi u vezi s činjenicom da je, kao što je protein krvi ne sintetizira lokalno i zato može biti „marker” imunoglobulini infiltrirani od protoka krvi zbog smanjene propusnosti barijere. Simultano određivanje albumina u serumu( plazmi) krvi i likvora albumin nam omogućuje da izračunati indeks:
Kada je netaknut krvno-moždana barijera, ovaj indeks je manji od 9, s umjerenim oštećenjem - 9-14, s primjetnom - 14-30, s teškim oštećenjem - 30-100, a povećanje od više od 100 označava potpuno oštećenje barijere.
Posljednjih godina povećao interes za određenu CNS neurona bjelančevina tekućine - enolaza, protein S-100, mijelinski bazični protein( MBP), i drugi. Jedan od obećavajućih među njima za kliničke svrhe je OBM.U normalnoj tekućini praktički je odsutan( njegova koncentracija ne prelazi 4 mg / l) i pojavljuje se samo u uvjetima patologije. Ovaj laboratorijski atribut nije specifičan za određene nosološke oblike, ali odražava opseg lezije( prvenstveno povezan s uništenjem bijele tvari).Neki autori smatraju da obećavaju definiciju MBP u cerebrospinalnoj tekućini za praćenje neurospida. Nažalost, još uvijek postoje problemi vezani uz izravno određivanje koncentracije ovog proteina.
Glukoza Glukoza
CSF koji se nalazi u uobičajenom CSF u koncentraciji od 2.00-4.18 mmol / l. Ova vrijednost je podložna značajnim fluktuacijama, čak iu zdravoj osobi, ovisno o prehrani, vježbanju i drugim čimbenicima. Točno procjenu razine glukoze u likvoru istovremeno odrediti njegovu razinu u krvi, gdje je inače 2 puta veća. Povišene razine glukoze u krvi( giperglikoarhiya) javlja u šećernoj bolesti, akutni encefalitis, ishemijski cirkulatorni poremećaji i drugih bolesti. Gipoglikoarhiya vidio s meningitisom raznih etiologija, ili sterilan upala, maligne lezije mozga i membrane, barem - s herpesom, subarahnoidnom krvarenja.
neke prednosti nad glukozu kao dijagnostički marker je laktat( mliječna kiselina), kao što je njegova koncentracija u likvoru( 1,2-2,1 mmol / l) je neovisno od one u krvi. Njegova razina je znatno povećana u različitim uvjetima povezane sa smanjenom energetskom metabolizmu - meningitisa, osobito - uzrokovana gram-pozitivnih flore, mozga hipoksije i nekih drugih.
Kloridi u tekućini
Kloridi - sadržaj u normalnoj tekućini - 118-132 mmol / l. povećanje koncentracije CSF uočeno krši uklanjanja iz tijela( bubrega, srca) u degenerativnih bolesti i tumora CNS.Smanjenje sadržaja klorida opaža se kod encefalitisa i meningitisa.
Enzimi u tekućini
Liqvor karakterizirana niskom aktivnošću enzima sadrži. Modificiranje enzimske aktivnosti u CSF u različitim bolestima i općenito su nespecifični paralelno opisane promjene u krvi kod tih bolesti( Tablica 2).Drugačiji pristup zaslužuje tumačenje promjena u aktivnosti kreatin fosfokinaze( CPK).Ovaj enzim u tkivima tri frakcije, koje karakterizira ne samo molekularne razlike, ali i priroda distribucije u tkiva: CK-MB( miokarda), CK-MM( mišić), CK-BB( mozga).Ako ukupna aktivnost CK u CSF ne osnovni dijagnostičke vrijednosti( to se može povećati kada se tumor, cerebralnog infarkta, epilepsije i drugih bolesti), frakcija CK-BB relativno specifičan marker oštećenog tkiva mozga i njegova aktivnost u CSF korelaciji s Glasgow skali.
broj stanica i cytogram
otopine u proučavanju bioloških tekućina i CSF, uključujući uobičajeno izračuna broj stanica u cytogram i mrlja obojenog azureozinom( Romanovsky-Giemsa Nocht, Pappenheim).Računajući staničnih elemenata u likvoru( određivanje cytosis) proizvedene pomoću Fuchs-Rosenthal komoru, pre-to uzgoj Samson reagensa 10 puta. Koristeći samo dao boju, nego bilo koji drugi. To omogućuje stanicama da mrlje tijekom 15 minuta, a stanice zadržavaju neizmijenjena do 2 sata.
broj stanica tijekom stanice podijeli se 3 tako dobivene cytosis u 1 Ul. Za veću točnost, uzeti u obzir broj stanica u tri komore. Kada Fuchs-Rosenthal komora odsutnost Goryaeva mogu koristiti aparat, brojanjem stanica preko mreže kako u tri komore, rezultat je pomnožen 0.4.Do sada, ima odstupanja u jedinicama broja stanica - broja stanica u komori, na 1 mm ili 1 litre. Vjerojatno, zgodno je ipak izraziti broj stanica u cytosis mikrolitara. Kako izračunati broj bijelih krvnih stanica i crvenih krvnih stanica u likvoru mogu se koristiti i automatiziranih sustava. Povećan sadržaj
stanica u CSF( pleocytosis) često pojavljuje kod upalnih bolesti, u manjoj mjeri - s meninga iritacije. Najistaknutiji pleocytosis vidio s bakterijskim infekcijama, gljivične oštećenja mozga i tuberkulozan meningitisa. U epilepsije, arahnoiditisom, hidrocefalus, degenerativnih procesa, i nekih drugih bolesti centralnog računati živčani sustav stanica ostaje normalan.
bojenja stanica porijeklom priprema reagens Samson omogućuje dovoljno pouzdano diferencirane stanice. No, točnije njihove morfološke karakteristike postiže nakon fiksiranja i bojenja citoloških preparata pripremljenih. Suvremeni pristup u pripremi takvih proizvoda uključuje korištenje citospinu. Međutim, čak iu SAD-u imaju samo 55% od laboratorija. Stoga, u praksi, mnogo jednostavniji način - polaganje stanica na staklu slajd. Pripreme treba dobro osušiti na zraku, a zatim oslikana.
glavni kut stanični elementi stained pripreme. Oni su uglavnom zastupa krvnih stanica( obično - limfociti i neutrofili, barem - monociti, eozinofili, bazofili) može zadovoljiti plazme i masne stanice, makrofage, Zrnati kugle( degenerativni oblik posebna vrsta makrofaga - lipofagov mogućnosti masna degeneracija), stanice arahnoendoteliya, epindimy, Morfologija tih stanica elemenata općenito dobro poznati liječnicima i laboratorijska dijagnostika je detaljno opisana u mnogim udžbenicima. Razina i priroda cytogram pleocytosis CSF omogućuje određivanje prirodu patološkog procesa( Tablica 3).
leukocitoza često popraćeno akutne infekcije( lokalna i difuznog meningitis).CSF eozinofilija rijetko - kad mozak ehinokokoza, eozinofilni meningitisa. Eozinofilija CSF ne korelira, u pravilu, s brojem eozinofila u krvi. Limfocitna pleocytosis CSF nastaje u meningitisa, multiple skleroze, kronične faze tuberkulozan meningitisa nakon operacija na membrane mozga. U patološkim procesima CNS uočeno polimorfizam limfocita, među kojima su aktivirane. Se karakterizira prisutnost obilne citoplazme s pojedinačnim blijedo azurofilnim granulama, neke stanice otshnurovku ili fragmentaciju citoplazmi( clasmatosis).Stanice plazme se pojavljuju u citogramu virusnog ili bakterijskog meningitisa, sporim upalnim procesima, tijekom oporavka neurosifilisom. Monociti prolaze degeneracija u likvoru brže limfocita promatrane u multiple skleroze, progresivna panencefalitisom, kroničnu upalu tinja. Makrofagi - „bolničari” liker, pojavljuju se krvarenja, infekcije, traumatskih i ishemijske nekroze. Ponekad
CSF otkriti abnormalne stanice - elemente koji po svojim morfološkim karakteristikama ne može pripisati specifičnim staničnim oblicima. Atipičnih stanica se mogu naći u kroničnim upalnim procesima( tuberkulozan meningitisa, multipla skleroza i slično), a često su tumorske stanice. Vjerojatnost pronalaženja tumorskih stanica u cerebrospinalnoj tekućini je mala( ne više od 1,5%).Detekcija blast stanica u CSF u hemoblastozi omogućuje nam da govorimo o neuroleukemiji. Analizirajući
pripravak tekućinu je važno procijeniti omjer proteina i staničnih elemenata( disocijacije).Kod disocijacije staničnog proteina, uočena je izražena pleocitoza s normalnim ili neznatno povećanim sadržajem proteina. To je karakteristično za meningitis. Diskocijacije Belkovokletochnaya karakterizira hiperproteinarhija u normalnoj citozi. Ovo stanje je tipično za stajanje procesa u cerebrospinalnoj tekućini( tumor, arahnoiditis, itd.).
klinička situacija ponekad zahtijevaju računajući broj eritrocita u krvavom likvoru( za objektivizacije volumen krvarenja).Brojenje crvenih krvnih stanica je isto kao u krvi. Kao što je gore navedeno, promjene boje liker ako u 1 mm sadrži više od 500-600 eritrocitimakunića vidljiv bojenje javlja u nazočnosti od oko 2000, a kad postane hemoragijski razinu eritrocita više od 4000 / L.
mikrobiološko ispitivanje cerebrospinalnog fluida
Jedna od najčešćih bolesti CNS je gnojnog meningitisa. U takvim slučajevima, mikorobiološko istraživanje postaje osobito relevantno. To uključuje orijentacijski test - bakterioskopiju lijekova i klasične tehnike kulture. Bakterijska kontrola cerebrospinalne tekućine ima ograničenu dijagnostičku vrijednost, naročito pri dobivanju jasnog CSF.Razmaz pripremljen od likera mulja dobivenog centrifugiranjem okarshivayut metilen plavo ili Gram mrlje, iako neki autori smatraju da je najnovija verzija u boji „raniti” oblikovane elemente i stvara artefakte. Uz meningitis i apsces, pronađena je raznolika flora koja odgovara prirodi bolesti. Bez obzira na rezultate mikroskopije bakterijskog meningitisa dijagnoze mora potvrditi pomoću testa za kulturu koji postaje odlučujući čimbenik u dijagnozi ove skupine bolesti i odabira odgovarajuće terapije. To se provodi u skladu s Red № 375 od Ministarstva zdravstva Ruske Federacije 23.12.98 „o mjerama za jačanje nadzora i sprječavanje meningokokne infekcije i gnojni bakterijski meningitis.”Najčešći uzrok bakterijskog meningitisa je gram-negativna Diplococcus Neisseria meningitidis, koja je 80% slučajeva može se otkriti čak i kada mikroskopije.
mikroskopija liker normalno prisutna u CSF samo limfocite i monocite. Uz različite bolesti i patološke uvjete u cerebrospinalnoj tekućini, mogu se pojaviti i druge vrste stanica.
Limfociti u veličini slični su crvenim krvnim stanicama. Limfociti imaju veliku jezgru i usku, neumjetnu cjevčicu citoplazme. Uobičajeno, tekućina sadrži 8-10 stanica limfocita. Broj njih povećava se s tumorima središnjeg živčanog sustava. Limfociti se nalaze u kroničnim upalnim procesima u membranama( tuberkulozni meningitis, cysticercosis arachnoiditis).
Plasmatske stanice u tekućini. Stanice veće od limfocita, velikom jezgrom, smješten ekscentrično, velike količine citoplazmu s relativno malom količinom jezgre( veličine stanica - 6,12 mm).stanice plazme u CSF mogu naći samo u patološkim slučajevima, trajanje sadašnjih upalnih procesa u mozgu i membrane, s encefalitis, meningitis tuberkulozan, arahoiditis tsistitserkoznom i drugih bolesti u postoperativnom periodu, kada je trom zarastanje rana.
Monociti tkiva u tekućini. Veličina stanica je od 7 do 10 μm. U normalnoj tekućini, ponekad se mogu pojaviti u obliku pojedinačnih uzoraka. Monociti su pronađena u likvoru nakon operacije na središnji živčani sustav, s dugim trenutnim upalnih procesa u školjkama. Prisutnost tkivnih monocita sugerira aktivnu tkivnu reakciju i normalno zacjeljivanje rane.
Makrofagi u tekućini. Može imaju jezgre od različitih oblika, najčešće se nalazi na periferiji citoplazmi jezgre stanica sadrži vakuole i inkluzije. U normalnoj tekućini makrofagi se ne nalaze. Prisutnost makrofaga s normalnim brojem stanica u cerebrospinalnoj tekućini promatrana je nakon krvarenja ili u upalnom procesu. U pravilu se javljaju u postoperativnom razdoblju, koje imaju prognostičku vrijednost i govore o aktivnom pročišćavanju CSF-a.
Zrnaste kuglice u tekućini. Stanice s masnom infiltracijom - makrofagi s prisustvom kapljica masti u citoplazmi. U preparatima u boji tekućine, stanice imaju malu periferno lociranu jezgru i veliku staničnu citoplazmu. Veličina stanica je drugačija i ovisi o uključenim kapljicama masti. Granuliranih kuglice nalaze u patološkom tekućine dobivene iz ciste mozga u moždanom tkivu žarišta raspada u tumorima.
Neutrofili u tekućini. U komori neutrofili periferne krvi izgledaju identično. Prisutnost neutrofila u CSF i u minimalnim količinama, ili ukazuje na prethodni, ili imaju upalnu reakciju. Prisutnost izmijenjenih neutrofila ukazuje na slabljenje upalnog procesa.
Eozinofili u tekućini. Odredite u cerebrospinalnoj tekućini uniformnom, sjajnom granularnošću. Eozinofila pojaviti u SAH, meningitis, tuberkuloza i syphilitic tumora mozga.
Epitelne stanice u CSF.Epitelne stanice, koje ograničavaju prostor subarachnoida, nalaze se u cerebrospinalnoj tekućini vrlo rijetko. To su velike okrugle stanice s malim okruglim ili ovalnim jezgrama. Otkrivena je neoplazmi, ponekad s upalnim procesima.
Tumorske stanice i kompleksi u cerebrospinalnoj tekućini. Pronađeni su u stanici i obojenom pripravku likera. Maligne stanice mogu se odnositi na sljedeće vrste tumora:
- meduloblastoma;
- spongioblastoma;
- astrocitom;
- karcinom.
Kristali u tekućini. Rijetko se pojavljuju u cerebrospinalnoj tekućini, u slučaju propadanja tumora.
elementi Echinococcus u likvore- kuke scolexes, hitina ljuska fragmenti - u likvoru su rijetki.
PCR dijagnostika
CSF Posljednjih godina neki obećanje u etioloških dijagnostički neuroinfections povezanih s razvojem molekularnih tehnikama genetskog za otkrivanje nukleinskih kiselina infektivnih agensa u likvoru( PCR) za dijagnostiku.
tome, tekućina je medij jasno reagira na patološke procese u središnjem živčanom sustavu. Dubina i priroda njegovih promjena rezultat su dubine patofizioloških poremećaja. Ispravna procjena laboratorijskih likoroloških simptoma omogućuje razjašnjenje dijagnoze i procjenu učinkovitosti liječenja.
V.V.Bazari profesor UGMA-a, zamjenik glavnog liječnika OKB broj 1