Polymeraasiketjureaktio tartuntatautien diagnoosissa

PCR - yksi menetelmistä DNA-diagnostiikan, jonka avulla voidaan lisätä useita kopioita havaittavissa genomin osan( DNA) bakteerien tai virusten on miljoona kertaa käyttäen DNA-polymeraasia entsyymi. Testi tätä erityistä genomisen nukleiinihapposegmenttiä kerrotaan toistuvasti( monistettu), joka mahdollistaa sen tunnistamisen. Ensimmäinen DNA-molekyyli, bakteerien tai virusten kuumentamalla jaettu kaksi ketjua, niin läsnä ollessa syntetisoidun DNA-aluketta( sekvenssi nukleotidien spesifinen määritelty genomi) on sitova niitä täydentäviä DNA-jaksojen, syntetisoitiin toinen juoste nukleiinihapon jokaisen alukkeen läsnä ollessa lämmönkestävän DNA-polymeraasin. Kaksi DNA-molekyyliä saadaan. Prosessi toistetaan monta kertaa. Diagnoosiin riittää yksi DNA-molekyyli, toisin sanoen yksi bakteeri tai viruspartikkeli. Saattamalla ylimääräinen vaihe - DNA-synteesi RNA-molekyyli käyttäen käänteiskopioijaentsyymiä - on mahdollisuus testata RNA-virusten, kuten HCV-virus. PCR - kolmivaiheinen prosessi, toistuvien denaturointi, alukkeiden pariutuminen, DNA-synteesin( polymerointi).DNA: n syntetisoitu määrä tunnistetaan ELISA: lla tai elektroforeesilla.

PCR voidaan käyttää erilaisia ​​biologisen materiaalin - seerumin tai veriplasmasta, kaavinta virtsaputken, koepala, keuhkopussin nestettä, aivo-selkäydinneste, jne. Ensimmäinen PCR käytettiin infektiotautien diagnosointiin, kuten HBV, HCV, HBV, CMV-infektio, tarttuvan sukupuoliteitse tarttuvien infektioiden( tippuri, roskat diynaya, sienihormoneja plasma, ureaplasmal infektio), tuberkuloosi, HIV ja niin edelleen.d.

PCR etu infektiotautien diagnosointiin verrattuna muihin menetelmiin tutkimuksissa on seuraava:

■ tarttuva aine voidaan havaita missä tahansa biologisen ympäristön organismin, mukaan lukien ne materiaalit, saatiin biopsialla;

■ Tartuntatautien diagnoosi taudin varhaisimmissa vaiheissa;

■ mahdollista määrällistä arviointia tutkimustulokset( kuten virus tai bakteerien sisältämien materiaali);

■ menetelmän korkea herkkyys;esimerkiksi, herkkyys PCR havaitsemiseksi hepatiitti B -viruksen DNA veressä on 0,001 pg / ml( noin 4h102 kopiota / ml), kun taas herkkyys DNA-hybridisaatiolla, jossa käytetään haarautunut koettimia - 2,1 pg / ml( noin 7h105 kopiota / ml).