Ensüümide ja isoensüümide uurimine

Ensüümid on spetsiifilised valkud, mis täidavad bioloogiliste katalüsaatorite rolli organismis. Ensüümid on kõikides organismi rakkudes, kus nende kontsentratsioon on palju suurem kui vereplasmas. Uuritavaks objektiks on enamasti seerumi

veri, mille ensüümi koostis on suhteliselt konstantne. Normaalne ensüümi aktiivsuse seerumi peegeldab suhet biosünteesi ja vabanemise ensüümide( normaalses rakuvärskendusel), ja nende eemaldumist vereringesse. Ensüümide uuenemise kiiruse, rakkude kahjustuse suurenemine põhjustab tavaliselt ensüümide aktiivsuse suurenemist seerumis. Vere seerumis eristatakse kolme ensüümi rühma: rakuline, sekretoorne ja eritub.

rakuensüümid sõltuvalt asukohast koes jagada kahte gruppi:

■ mittespetsiifilised ensüümid, mis katalüüsivad ühised kõigile kudedele vahetavad reaktsioone ja on enamikel elundite ja kudede;

■ organispetsiifilised või näitaja ensüümid, mis on spetsiifilised üksnes teatud koetehnoloogia jaoks.

Raku ensüümide seerumivastane aktiivsus on väike või puudub. Patoloogiliste protsessidega seerumis ensüümi aktiivsuse selles rühmas sõltub vabanemise kiirust rakkudest, mis omakorda on määratud kiirusega ja kahjustuste ulatust.

sekretoorset ensüüme( tseruloplasmiiniga pseudocholinesterase, lipopro-lipaasi valguga polümeerid) siseneda otse vereplasma ja erifunktsioone täitma seal. Need ensüümid sünteesitakse maksas ja vabanevad plasmas pidevalt. Nende aktiivsus seerumis on suurem kui rakkudes või kudedes. Kliinilises praktikas on need huvipakkuvad, kui nende aktiivsus vere seerumis muutub maksa funktsioonihäire tõttu tavalisest madalamaks. Ekskretoorne moodustatud

ensüümid seedeorganeile( pankreas, soole limaskestast, maksa, sapiteede endoteeli).Nende hulka kuuluvad a-amülaas, lipaas, aluseline fosfataas jne. Tavaliselt on nende seerumi aktiivsus madal ja konstantne. Patoloogia korral, kui mõni tavaline eritumisrada on blokeeritud, suureneb nende ensüümide aktiivsus seerumis.

mõõdetud ensüümi aktiivsus võib olla põhjustatud juuresolekul väga sarnased omadused, aga mõnevõrra erineda üksteisest molekulaarse vormid ensüüme. Neid erinevaid vorme nimetatakse isoensüümideks. Uuring isoensüümide kliinilises praktikas on huvipakkuv, mis moodustuvad, kui üksikute isoensüümide erinevates kudedes( näiteks erinevate LDH isosüümidega ülekaalus südame ja maksa).

Ensüümide aktiivsuse kvantitatiivseks määramiseks soovitas Rahvusvahelise Biokeemilise Liidu ensüümide komisjon rahvusvahelist ühikut( RÜ).Üks ühik aktiivsust tahes ensüümi võttes summa, et soodsatel tingimustel katalüüsib 1 mikromooli substraadi ühes minutis( pmol / min).

Ensüümi aktiivsust hinnatakse katalüüsitud reaktsiooni kiirusega teatud temperatuuril ja keskmise pH väärtusel, substraadi kontsentratsioonil. Seetõttu tuleb ensüümide aktiivsuse määramisel samu tingimusi rangelt kinni pidada.

ensümaatiline reaktsioon on tundlik temperatuurimuutuste suhtes. Seda tehakse tavaliselt temperatuuril

vahemikus 25-40 ° C, kuid erinevatel temperatuuridel on optimaalne pH, puhver, substraat ja muud parameetrid erinevad. Enamiku ensüümide maksimaalset aktiivsust inimese kehas täheldatakse temperatuuril ligikaudu 37 ° C.Seetõttu on rahvusvahelise standardimise eesmärgil ensüümi aktiivsuse mõõtmised antud temperatuuril. Ensüümi aktiivsuse normaalväärtused on toodud allpool temperatuuri 37 ° C juures. Uuring

ensüümid kliinilises praktikas kasutatavate erinevat ülesannet: diagnoosimisel, diferentsiaaldiagnoosimist, hindamise dünaamikat haiguse kindlaks ravi tõhususest omastamisastet ja prognoosi. Seal on kolme tüüpi ensüümide muutused patoloogia: giperfermente mia - suurenenud aktiivsusega ensüüme kui tavaline, hüpoglükeemia-ensüümide sisaldusega - Langustendents disfermentemiya - välimuses vere ensüüme, mida tavaliselt ei leitud.