Reacción en cadena de la polimerasa

PCR - Los recientes avances en la genética molecular, que se utiliza para amplificar el ADN y permite propagar rápidamente

pieza específica in vitro de ADN( es decir, cualquier gen de interés) es más de 200 000 veces. Para llevar a cabo la reacción, es suficiente tener el material de ADN de una célula;la cantidad de ADN amplificado por PCR es tan grande que este ADN puede teñirse simplemente( utilizando sondas radiactivas después de que no se requiera electroforesis).Un requisito previo para llevar a cabo la PCR es el conocimiento de la secuencia de nucleótidos de la región de ADN amplificada para la selección correcta de cebadores sintetizados artificialmente.

Actualmente, la PCR es un proceso que ocurre en un solo tubo y que consiste en ciclos repetitivos de amplificación( reproducción, copia) de secuencias de ADN específicas con el fin de obtener un número suficientemente grande de copias que se pueden identificar mediante electroforesis. Uno de los componentes clave de la reacción - "cebadores" - oligonukleoti-dy sintético que consta de 20-30 bases de recocido complementaria "Sitios"( áreas)( conexión) a la porción de identificación del ADN molde.

PCR se ejecuta automáticamente en un termostato programable - termociclador( termociclador).El ciclo de tres pasos, que da como resultado réplicas de la parte identificable del ADN molde, se repite 30-50 veces de acuerdo con el programa preestablecido del termociclador. En el primer ciclo oligocebador hibridan con el ADN molde original y, a continuación( en los ciclos posteriores) y las moléculas de ADN recién sintetizadas como su acumulación en la mezcla de reacción. En el último caso, la síntesis de ADN no termina debido a cambios de temperatura, y al llegar a la polimerasa-amplificado vannogo porción de límite de ADN, que determina el tamaño de la región de ADN recién sintetizado dentro de un nucleótido.

Como un método de detección de moléculas de ADN obtenidos usando electroforesis, por el que la separación se lleva a amplicones de tamaño amplifi-materiales cualificados( productos de amplificación).

Usando PCR puede examinar directamente la localización supuesta mutación o sitio polimórfico, así como para estudiar la presencia de cualesquiera otras características específicas de ADN.