Detección del virus de la hepatitis C
HCV en el material normalmente está ausente.
diferencia de HCV métodos de diagnóstico serológicos donde detectan anticuerpos para HCV, la PCR puede detectar la presencia de ARN del VHC y cuantificar directamente su concentración en la materi prueba
le. La prueba tiene especificidad específica y alta sensibilidad: diez moléculas de ARN del VHC en el material de prueba son suficientes para su detección. La detección de anticuerpos a HCV sólo confirma el hecho de infección del paciente, pero no da una indicación de infección activa( el virus para la replicación) y el pronóstico de la enfermedad. Además, los anticuerpos contra el VHC detectados en la sangre de pacientes con hepatitis aguda y crónica, así como en aquellos pacientes que están enfermos y se recuperó, y con frecuencia el AT en la sangre aparecen sólo unos meses después de la aparición de la enfermedad clínica, por lo que es difícil de diagnosticar. La detección del VHC en la sangre mediante PCR es un método de diagnóstico más informativo. Identificación de ARN del VHC por pruebas PCR de viremia, da una indicación de la replicación del virus en el cuerpo y es uno de los criterios para la eficacia de la terapia antiviral. La detección de ARN de VHC mediante PCR en las primeras etapas de la infección viral en el fondo de la ausencia completa de cualquier marcadores serológicos puede ser la evidencia más temprana de la infección. Sin embargo, la detección de aislados de ARN del VHC en el fondo de la ausencia completa de cualquier otro marcadores serológicos no puede descartar completamente un resultado de falso positivo de la PCR.En tales casos, una evaluación exhaustiva de los estudios clínicos, bioquímicos y morfológicos con REPETIDA confirmación por PCR de la presencia de la infección. El algoritmo para diagnosticar el VHC usando el método de PCR se muestra en la Fig.
gran importancia es la aplicación de PCR en pacientes con hepatitis C crónica, ya que la mayoría de ellos no tienen correlación entre la presencia de la replicación viral y la actividad de las enzimas hepáticas. En tales casos, solo la PCR permite juzgar la presencia de replicación viral, especialmente si el resultado final se expresa cuantitativamente. En la mayoría de los casos desaparición de ARN del VHC a partir del suero se produce más tarde la normalización de las enzimas hepáticas, sin embargo su normalización no se puede utilizar para terminar el tratamiento antiviral.
importancia práctica para detectar el ARN del VHC mediante PCR para examinar no sólo el suero sanguíneo, sino también linfocitos, gepatobioptaty. Los virus se pueden detectar 2-3 veces más a menudo en el tejido hepático que en el suero. En la evaluación de los resultados del estudio de suero de la sangre de HCV-RNA debe ser recordado que viremia puede llevar fluctuante carácter( así como el cambio en la actividad de la enzima).Por lo tanto, después de los resultados positivos del estudio de PCR, se puede obtener un resultado negativo y viceversa. En tales casos, para resolver las dudas que surjan, es mejor investigar hepatobiobaths.
detectar el ARN del VHC en el material por PCR usando los siguientes fines: resultados cuestionables
■ resolución de estudios serológicos;
■ diferenciación del VHC de otras formas de hepatitis;
■ detección del estadio agudo de la enfermedad en comparación con la infección o el contacto transferidos;la etapa de infección de los recién nacidos de madres seropositivas al VHC;
■ monitoreo de la efectividad del tratamiento antiviral.
Todas las características anteriores de resultados de la evaluación y enfoques para el diagnóstico de VHC usando PCR se aplica a otras infecciones.método
PCR no sólo puede detectar el ARN del VHC en el material, sino también para establecer su genotipo. Determinación del genotipo es de gran importancia para la selección de los pacientes con hepatitis C crónica para llevar a cabo el tratamiento con interferón alfa y ribavirina.indicaciones de laboratorio para el tratamiento de la hepatitis C crónica con interferón alfa siguientes:
■ aumento de la actividad de las transaminasas;
■ presencia de ARN del VHC en la sangre;
■ genotipo 1 HCV;
■ alta viremia en la sangre( más de 8x105 copias / ml).
ahora es posible cuantificar el contenido de ARN del VHC en suero por PCR, que es de gran importancia para konrolya para el tratamiento con interferón alfa. El nivel de viremia se evalúa de la siguiente manera: para el ARN del VHC de 102 a 104 copias / ml - débil;de 105 a 107 copias / ml - medio, por encima de 108 copias / ml - alto. Con un tratamiento efectivo, el nivel de viremia disminuye.