Agregace krevních destiček s ristocetinem
Referenční hodnoty aktivity von Willebrandova faktoru činí 58-166%.
Von Willebrandův faktor syntetizuje v endoteliálních buňkách a Megakom-riotsity. To je nutné pro normální adhezi krevních destiček a má schopnost prodloužit poločas faktoru VIII.Faktor VIII plazmového srážení - antihemophilic globulin A - cirkuluje v krvi, jako komplex tří podjednotek, označených VIII-K( koagulační jednotka), VIII-AH( hlavní antigenní značky) a VIII-vWF( von Willebrandův faktor spojený s VIII-Ar).Předpokládá se, že von Willebrandův faktor, reguluje syntézu koagulaci antihemophilic globulinu A( VIII-a) a podílí se na vaskulární destiček hemostázy.
von Willebrandova choroba - dědičné onemocnění, které je charakterizováno zvýšením doby trvání krvácení, snížení vyl ristocetin-kofaktoru a snížení( v různé míře) faktoru VIII koagulační aktivity. Klinické projevy onemocnění jsou podobné jako u trombocytopatie. Nicméně, u pacientů s významným snížením aktivity faktoru VIII je možno pozorovat a hemartrózy hematom.
na laboratorních studiích za účelem stanovení struktury a aktivity von Willebrandova faktoru, rozlišit následující formy onemocnění.
■ typu I( 70% všech případů) je charakterizován mírným drop-ristocetinového kofaktoru( von Willebrandův faktor) a koagulační aktivity( VIII-K) během normálního makromolekulární struktury von Willebrandova faktoru.
■ Typ II: je založena na selektivní nedostatku vWF polymerů s vysokou molekulovou hmotností v důsledku nepravidelností ve struktuře proteinu.
Typ MF síla je způsobena interakcí mezi von Willebrandova faktoru a krevních destiček a krevních destiček agregáty zvýšené výsledky vůle v trombocytopenie.
■ Typ III je charakterizována těžkou kvantitativním nedostatkem von Willebrandův faktor, který vede ke klinicky významným poklesem aktivity faktoru VIII( VIII-a).
Obsah von Willebrandův faktor se stanoví v těch případech, kdy zvýšené doby krvácení, počet krevních destiček je v rámci referenční hodnoty, a neexistují žádné zjevné příčiny dysfunkcí krevních destiček. Pro posouzení von Willebrandův faktor určující kvantitativní obsah von Willebrandova faktoru( výzkum ristocetin-kofaktor aktivity) byla zkoumána ristocetinu vyvolanou aglutinaci destiček a vWF antigenní struktury vztahující se k faktoru VIII( VIII-vWF).
Stanovení agregace destiček s ristocetinu plazmy se používá pro kvantifikaci von Willebrandův faktor. Lineární vztah mezi stupněm agregace a ristotsetinovoy množství von Willebrandova faktoru. Metoda je založena na schopnosti tohoto
Obr. Cesty agregace krevních destiček a protilátek
Obr. Způsoby agregaci krevních destiček a na místě aplikace antiagregancií
antibiotikum( ristocetinu) stimulaci interakce in vitro von Willebrandova faktoru na destičkový glykoprotein Ib. Ve většině případů, von Willebrandova choroba je porušení ristocetin-Ar-regatsii za normálního odpovědi na ADP, kolagen a adrenalinu. Porušení ristocetin-agregace a identifikovat makrocytární trombodistrofii Bernard-Soulier( absence Agregace destiček ristotsetinovoy membránovým receptorem).Pro diferenciace testu použit s přidáním normální plazmy: von Willebrandova onemocnění po přidání normální plazmy ristocetin agregace normalizované, přičemž syndrom Bernard-Soulier, ke které dochází.Studie
mohou být také použity v diferenciální diagnostiku hemofilie A( nedostatek faktoru VIII) a von Willebrandovy choroby. V hemofilie výrazně snížený obsah VIII-a a obsah VIII-vWF je v normálním rozmezí.Klinicky se tento rozdíl se projevuje tím, že v hemofilie dochází gematomny typ zvýšené krvácení, a von Willebrandova onemocnění - typu petechií-gematomny [Ogston D. Bennett B., 1977].
ristocetin vyvolané aglutinace destiček snížil ve většině případů, von Willebrandova choroba, s výjimkou typu PV.
antigenní struktura von Willebrandův faktor váže na faktor VIII( VIII-vWF), identifikující různé imunologické metody, ale distribuce von Willebrandova faktoru podle molekulové velikosti stanovené elektroforézou na agarosovém gelu. Tyto testy se používají k určení typu von Willebrandovy choroby.
Studium agregace trombocytů s různými induktory se provádí nejen k detekci abnormalit agregační funkce krevních destiček. Tato studie umožňuje zhodnotit účinnost antiagregační léčby, vybrat jednotlivé dávky léků a provádět monitorování léků.Na Obr.jsou uvedeny hlavní léky s antiagregačním účinkem a body jejich aplikace.