Imunofenotyp hemoblastóz
Významný pokrok v hematologických studií sdružených v posledních letech s využitím moderních imunologických metod a automatizovaných nástrojů pro analýzu a třídění buněk periferní krve a kostní dřeně - cytometrech průtoku. Tradiční morfologické a cytochemické studie onemocnění substrátu buněk( krev, červené kostní dřeně, lymfatických uzlin, sleziny, atd.), V mnoha případech, zejména v lymfoproliferativní onemocnění, neukazují celou řadu možností mezi morfologicky podobných formách a identifikovat původ patologického klonu. Tyto problémy lze řešit pouze studiem imunologických vlastností buněk. Každý stupeň diferenciace hemo-poetické buňky má svůj vlastní soubor Ar, který vyzval mezinárodní klasifikace diferenciace a diferenciace jsou rozděleny do shluků, které jsou určeny CD.V bloku diferenciaci neoplastických změn může nastat v jakékoli fázi normálního vývoje buněk, což má za následek buněčného klonu patologického definování onemocnění substrátu a mající charakteristiku stejný imunologický( nebo fenotypové).Po studium těchto markerů v buňkách může být určena jakoukoli formou nebo provedením onemocnění jsou shodné, tj. Na základě imunologické fenotypu buňky diferenciální diagnostiku, které je nejobtížnější v lymfoproliferativních poruch, protože hlavní buněčný substrát patologických onemocnění jsou téměř stejný typ buněk morfologicky. Fenotypizace umožňuje použití monoklonální protilátky typické blastické a zralých myeloidních krvinky, mono-, lymfocytární série v přítomnosti diferenciačních placené-AR( receptory) v buněčné stěně.Na membránách krevních buněk a kostní dřeně může být identifikován v návaznosti na Ar( markery).
■ CD2 je monomerní transmembránový glykoprotein. Je přítomen na povrchu cirkulujících T-lymfocytů a některé NK lymfocyty. CD2 se účastní procesu alternativní aktivace T-lymfocytů.Detekce pomocí CD2 monoklonální protilátky používané v klinické praxi pro Fenaughty hodování-akutní T lymfocytární leukemie, lymfom, chronických zánětlivých a imunodeficience podmínek.
■ CD3 - proteinový komplex, spojený s Ag-specifickou T buněčného receptoru, je hlavní funkční marker T lymfocytů.To usnadňuje přenos aktivačního signálu z membrány nás
do buněčné cytoplasmy. Stanovení CD3 indikován pro diagnózu akutní leukémie T-buněk, lymfomy( CD3 nejsou vyjádřené v non-T-buněk lymfoidních nádorů) a imunitní onemocnění-ných.
■ CD4 - transmembránový glykoprotein exprimován podmnožinu T-helper( indukční cívky), která tvoří 45% lymfocytů periferní krve. V raných fázích vývoje lymfocytů v thymu, Az CD4 i CD8, vyjádřený všechny kortikální lymfocyty. Medulární thymocytů, který je podobný fenotyp zralých CD4 + periferní krve T-buněk( T-helper buňky), výraz-ruyut mají buď CD4 nebo CD8 receptory. V periferní krvi jsou současně označeny CD4 a CD8 až 5% buněk. Mírná exprese CD4 je možná u některých monocytových buněk. CD4 je exprimován ve většině případů, T-buněčného lymfomu, včetně mycosis fungoides, a HTLV-spojená T buněk leukémie( HTLV - virus lidské T-lymfotropický - T lim-fotropny lidský virus).
■ CD5 - jednořetězcový glykoprotein, který se nachází na všech zralých T-lymfocyty a většina thymocytů, je slabě exprimován B lymfocyty. CD5 detekován na neoplastických B buněk lepidlem zpřesnit chronické lymfocytární leukémie a lymfomu tsentrotsitarnoy. U jiných typů maligních onemocnění lymfatických - folikulární lymfom, leukémie z vlasatých buněk, velkobuněčný lymfom - CD5 není exprimován.
■ CD7 - jednořetězcový protein, nejdříve markeru diferenciace T-buněk. Vyslovil se pro-T buňky před jejich migraci do brzlíku. CD7 se detekuje na většině NK buněk, na monocytech je zaznamenána slabá exprese. B-lymfocyty a granulocyty neobsahují Ag.definice CD7 k diagnostice lymfom, dětství T-buněčné lymfoblastické leukémie.
■ CD8 - protein sestávající ze dvou polypeptidových řetězců spojených disulfidovými můstky. To je vyjádřeno subpopulace Qi totoksicheskih a supresorové T-lymfocyty, které tvoří 20-35% lymfocytů periferní krve. Tato Ar mají také NK buněk, kortikálních thymocytů, 30% medulární thymocytovou-ing a subpopulaci buněk kostní dřeně.CD8 byl testován na kvantifikaci obsahu
T-supresorů■ CD 10 - spojená s buněčnou membránou endopeptidázy. CD10 exprimuje mladé formy B lymfocytů a subpopulaci kortikálních lymfocytů.CD10 exprimuje všechny buňky ALL.
■ CD11c exprimují makrofágy, monocyty, granulocyty, NK buňky a buňky leukémie chlupatých buněk na buněčné membráně.
■ CD13 - glykoprotein exprimovaný buňkami řady mielomonotsitar-noha( progenitorové buňky, neutrofily, basofily, eosin-kmen, monocyty a buňky myeloidní leukémie).Není přítomen u T. B-lymfocytů, erytrocytů a krevních destiček.
■ CD14 - povrchový membránový glykoprotein. Vyjadřují se hlavně monocyty a makrofágy. CD14 je určeno více než 95% monocytů periferní krve a kostní dřeně na
.Při akutní myeloblastické leukémii je pozorována silná exprese CD14.U akutní a chronické lymfoblastické leukémie není Ar exprimován.
■ CD15 je oligosacharid. Podílí se na procesech fagocytózy a chemotaxie. Tento Ar je přítomen na povrchu zralých granulocytů a buněk Berezovskij-Sternberga. Exprese Ar CD15 je detekována u Hodgkinovy nemoci. U nehodgkinských limfomů není ve většině případů detekován CD15.
■ CD16 je exprimován na povrchu granulocytů, monocytů, makrofágů a NK buněk. Všechny lymfocyty exprimující tento Ar jsou schopné buněčné cytotoxicity závislé na protilátce. CD16 se určuje při psaní chronických myelocytárních leukémií k charakterizaci NK buněk.
■ CD 19 je glykoprotein přítomný na všech periferních B lymfocytech, stejně jako na všech prekurzorech B buněk. V plazmatických buňkách chybí.Toto je nejstarší značka B-buněk, hraje důležitou roli při regulaci aktivace a proliferace B-lymfocytů.CD19 je exprimován na všech neoplastických buňkách akutní leukémie B-buněčného původu a je přítomen také u některých forem akutní monoblastické leukémie.
■ CD20 je glykosylovaný protein. Při ontogenezi B lymfocytů se po CD19 ve fázi diferenciace lymfocytů před B-buňkami objevuje Ar CD20.Absentuje na plazmatické membráně plazmatických buněk. Vyjádřeno v ALL, B-buněčná chronická lymfocytární leukémie, leukémie vlasových buněk, Burkittův Lim fomah a velmi vzácné - akutní leukémie monoblastny.
■ CD21 - glykoprotein, u významného počtu přítomné na B-lymfocytů v lymfatických orgánech a v malých množstvích - na B buňkách periferní krve. CD21 je receptor pro virus Epna-Stein-Barr.
■ CD22 je protein složený ze dvou polypeptidových řetězců.Vyjadřuje se na membráně většiny B-lymfocytů, včetně progenitorových buněk( prolymphocytů).Ar není exprimován na B-lymfocytech( plazmatických buňkách) po jejich aktivaci. Nejvýraznější Exprese CD22 na buňkách zjištěných na volosatokle-přesný leukémie, slabý - s myeloidní leukémie a non-T ALL kletoch-ných.
■ CD23 je glykoprotein exprimovaný aktivovanými B-limfocyty periferní krve v mnohem větší míře. CD23 zprostředkuje cytotoxicitu a fagocytózu závislou na IgE makrofágy a eozinofily.
■ CD25 je glykoprotein s jedním řetězcem identifikovaný jako receptor s nízkou afinitou pro IL-2.Tento receptor je exprimován na aktivovaných T-lymfocytech a při nižší hustotě na aktivovaných B-buňkách. V periferní krvi zdravých lidí je Ar přítomen ve více než 5% lymfoidních buněk.
■ CD29 - fibronektinový receptor. Je široce distribuován v tkáních, je exprimován leukocyty. Stanovení CD29 buněk v peri
fericheskoy krvi používané pro psaní podskupinu T-lepidlo proud mající fenotyp CD4 + CD29 +, se nazývají helper typu 2( Th2).Tyto buňky, prostřednictvím produkce lymfokinů, se podílejí na realizaci humorální imunitní odpovědi.
■ CD33 - transmembránový glykoprotein. Je přítomen na povrchu buněk myeloidní a monocytární řady. Na povrchu monocytů a v menší míře na granulocytech periferní krve. Přibližně 30% buněk červené kostní dřeně exprimuje CD33, včetně myeloblastů, promyelocytů a myelocytů.Ar chybí na membránách polypotentních kmenových buněk. CD33 se používá k charakterizaci buněk v myeloidních leukémiích. Leukemické buňky lymfatického a erythroidního původu nevyjadřují CD33.
■ CD34 - phosphoglycoprotein, vyjádřený v hemopoetických progenitorových buněk, včetně kmenových buněk monopotentnye. Nejvýraznější exprese Ar je pozorována u raných progenitorů;Když buňky zrají, výraz markeru spadne. CD34 se také nachází na endotelových buňkách. Stanovení CD34 se používá pro charakterizaci buněk u akutní myeloidní a lymfatická-BLAST leukémie. V chronickou lymfocytární leukémií a exprese Lim-fomah Ag CD34 není detekován.
■ CD41a je exprimován trombocyty a megakaryocyty. Monokl funkční-CD41a protilátky pro detekci k diagnostickému použití Me-gakarioblastnogo leukémie. V tomto výrazu trombastenií Glyantsmanna Ag chybí nebo je značně potlačena.
■ CD42b - membrána glykoprotein složený ze dvou polypeptidových řetězců.Značka se nachází na povrchu krevních destiček a megakaryocytů.V praxi detekci klinické CD42b k diagnostickému použití thrombocytopathy - syndrom, Bernard-Soulier.
■ CD45RA patří do třídy transmembránových glykoproteinů.Jedná se o běžný leukocyt Ag. Vyjádřeno na buněčné membráně B-lymfocytů v menší míře T lymfocytů a zralých medulární thymocytů.Marker není exprimován granulocyty.
■ CD45RO - nízké izoformy molekulová hmotnost CD45RA - celkem leukocytů Ag. Identifikace T buňky( paměťové T buňky) subpopulací B lymfocytů, monocytů a makrofágů.Monoklonální protilátky pro interakci s většinou CD45RO thymocytů subpopulaci klidových CD4 + a CD8 + T-lymfocyty a zralé aktivované T-buňky. Buňky myelomonocytického původu, granulocyty a monocyty také nesou toto Ag. Detekuje se s prenatálními a imunoblastickými lymfomy.
■ CD46 - O-glykosylovaný dimer. To je široce distribuován v tkáních a vyjádřeny T- a B-lymfocyty, monocyty, gra-nulotsitami NK-buňky, krevní destičky, endotelové buňky, fibroblasty, ale je přítomno na povrchu erytrocytů.CD46 poskytuje ochranu tkání proti komplementu.
■ CD61 - destička Ag. To je vyjádřeno na krevních destičkách, periferní krve a kostní dřeně, stejně jako na megakaryocytů-minutu a megakaryoblasts. Jeho definice se používá jako Marko
RA s akutní leukémií megakaryoblastová.Exprese Ar je nepřítomná nebo potlačena u pacientů s Glanzmannovou thrombasténií.
■ CD95, také známý jako Fas nebo APO-1, - Gly-transmembránového koprotein, člena rodiny faktoru nekrosy nádorů receptorů.To je vyjádřeno ve významných množstvích v T-lymfocytů( CD4 + a CD8 +) periferní krve a, v menší míře, B-lymfocyty a NK buňky. Tento Ar je také exprimován na granulocytech, monocytech, tkáňových buňkách a neoplastických buňkách. CD95 vázat se na Fas-ligand( CD95L), indukuje apoptózu v buňkách.
■ CD95L nebo Fas ligand, membránový protein patří do rodiny faktoru nekrosy nádorů receptorů.Toto je vyjádřeno Ar CYTO toxický T-lymfocytů, NK buněk a nádorových buněk, velmi často;hlavní induktor apoptózy v buňkách.
■ HLA-DR - monomorfní třídy II determinant molekuly MHC muž( HLA).Etsya marker je exprimován na Langerhansovy buňky, dendritické buňky lymfatických orgánech, a některé typy makrofágů, B lymfocytů, aktivovaných T-buněk a epitelových buněk brzlíku. Studie aktivní značky použité pro kvantifikaci aktivovaných T-lymfocytů s fenotypem CD3 + a HLA-DR +.
použití různých monoklonálních protilátek na selekční marker může vytvořit portrét fenotypické charakteristiky této formy leukemie( tabulka A-7-30).
Kromě použití imunofenotypizace techniky pro diagnostiku a diferenciální diagnostiku hematologických malignit, zejména důležité ukázalo jejich použití v procesu léčby k posouzení stavu remise a zbytkové populace leukemických buněk. Vědět fenotypové „portrét“ z vysokých buněk v době stanovení diagnózy, s těmito značkami je možné najít mobilní leukemické klon v remisi, az nárůstu jejich počtu - předvídat vývoj relaps dlouhý( pro 1-4 měsíců), dokud její klinické a morfologické rysy.
Tabulka immunophenotypic charakterizace leukémie [Myers A. R., 1996]
Tabulka immunophenotypic charakterizace leukémie [Myers A. R., 1996]
Tabulka imunofenotyp ALL [Rich R. R., 2001]
Tabulka imunofenotyp ALL [Rich R. R., 2001]
stolek.
Konec tabulky.
Poznámka: cig q - cytoplazmatický řetězec Ig c;sig q je povrch Ig a řetězec.