Polymeraskedjereaktion

PCR - Senaste framstegen inom molekylär genetik, som används för att förstärka DNA och gör att du snabbt föröka in vitro

specifik del av DNA( dvs varje gen av intresse) är mer än 200 000 gånger. För att utföra reaktionen är det tillräckligt att ha DNA-materialet i en cell;mängden DNA amplifierad av PCR är så stor att detta DNA helt enkelt kan färgas( med användning av radioaktiva sonder efter elektrofores krävs ej).En förutsättning för genomförande av PCR är kunskapen om nukleotidsekvensen för den amplifierade DNA-regionen för korrekt val av artificiellt syntetiserade primers.

närvarande är PCR en process som sker i ett enda rör och bestående av upprepade cykler av amplifiering( reproduktion, kopia) av specifika DNA-sekvenser för att erhålla ett tillräckligt stort antal kopior som kan identifieras genom elektrofores. En av de viktigaste komponenterna i reaktions - "primers" - syntetiska oligonukleoti-dy bestående av 20-30 baser med komplementär "platser"( områden) glödgning( anslutning) och den identifierbara delen av mall-DNA.

PCR körs automatiskt i en programmerbar termostat - termocykler( termocykler).Trestegscykeln, som resulterar i replikor av den identifierbara delen av mall-DNA, upprepas 30-50 gånger i enlighet med det förinställda programmet för termisk cykler. I den första cykeln oligoprimer hybridiserar med den ursprungliga mall-DNA, och därefter( i efterföljande cykler) och de nyligen syntetiserade DNA-molekyler som deras ackumulering i reaktionsblandningen. I sistnämnda fall slutar syntesen av DNA inte på grund av en förändring i temperaturregimen, men efter att ha nått DNA-polymerasgränsen för den amplifierade regionen, vilken bestämmer storleken av den nyligen syntetiserade DNA-regionen till inom en nukleotid.

Som en metod för detekterande DNA-molekyler erhållna med användning elektrofores, genom vilken separationen sker amplifi-materialmannen stora amplikoner( amplifieringsprodukter).

Använda PCR kan direkt undersöka lokalisering förmodade mutation eller polymorf plats, liksom att studera förekomsten av andra DNA-specifika funktioner.