Analys av cerebrospinalvätska( cerebrospinalvätska) - Orsaker, symtom och behandling. MFS.

Liquor( eller cerebrospinal spinalvätska, CSF) - biologisk vätska, som är nödvändig för funktionen hos CNS.Hans forskning är en av de viktigaste typerna av laboratorieforskning. Den består av pre-analytiska fasen( framställning av ämnet, insamling av materialet och dess leverans till laboratoriet), analytisk( faktiskt gör forskning) och postanalytical( avskrift av resultatet).Bara korrekt utförande av alla manipuleringar vid var och en av dessa steg bestämmer analysens kvalitet.

cerebrospinalvätska( CSF) är utformad i koroid plexus av hjärn ventriklarna. I den vuxna mänskliga subarhnoidalnyh utrymmen samtidigt och cirkulerar i kamrarna i hjärnan av 110-160 ml CSF, i ryggradskanalen - 50-70 ml. Alkohol bildas kontinuerligt med en hastighet av 0,2-0,8 ml / min, vilket beror på intrakraniellt tryck. En dag hos en frisk person bildas 350-1150 ml cerebrospinalvätska.

Liquor erhållet genom punktering av ryggradskanalen, oftare - ryggradens - enligt de metoder som är välkända neurologer och neurokirurger. Dess första droppar avlägsnas( "blodväg").Då, luten uppsamlas åtminstone två rör: rör i konventionella( kemiska, centrifug) för allmän klinisk och kemisk analys, steril - för bakteriologisk undersökning. På remiss formuläret på CSF undersökning läkare ska ange inte bara namnet på patienten, men också den kliniska diagnosen och syftet med studien.

Notera att levereras till lab sprit proverna bör skyddas från pergrevaniya eller kyls och prover för att detektera bakteriella polysackarider serogicheskih tester bör värmas i ett vattenbad under 3 min.

Egentligen laboratoriestudie av cerebrospinalvätska( den analytiska fasen) utförs i enlighet med de regler som antagits i det kliniska laboratoriet i analysen av eventuella biologiska vätskor, och innefattar följande steg:

- makroskopisk analys - av fysikalisk-kemiska egenskaper( storlek, färg, tecken),
- räkning av antalet celler,
- mikroskopi av det nativa preparatet och cytologisk studie av den färgade beredningen;
- biokemisk studie,
- mikrobiologisk undersökning( enligt indikationer).

Vi finner det lämpligt och informativ i vissa fall kompletterar studiet av CSF immunologiska och eventuellt - andra tester, vars betydelse diskuteras i litteraturen. Förklaring

indikatorer sprit

Normal CSF färglös och porozrachna( såsom destillerat vatten, jämfört med vilken de fysikaliska egenskaperna beskriver generellt CSF).Gråaktig

eller grå-grönlut orsakas oftast av en blandning av bakterier och leukocyter. Röd CSF varierande intensitet( eritrohromiya) driven genom blandning av erytrocyter förekommande när färsk blödning eller hjärnskada. Visuellt upptäcks närvaron av röda blodkroppar när innehållet överstiger 500-600 i μl. I patologiska processer

vätska kan vara ksantohromnoy - färgade i gula eller gul-bruna produkter av hemoglobin uppdelning. Det är nödvändigt att komma ihåg och falska xantrochromy - vätskans färg som orsakas av medicinska preparat. Mindre ofta möter vi den gröna färgen på CSF( purulent meningit, hjärnabscess).Litteraturen beskriver färgen och korchnevy vätska - de breakout kraniofaryngiom cystor i cerebrospinalvätskan banan.

Turbiditet i cerebrospinalvätskan kan bero på orenhet av blodceller eller mikroorganismer. I det senare fallet kan grumligheten avlägsnas genom centrifugering. När CSF innehåller en ökad mängd grovt dispergerade proteiner blir den opaliserande.

Relativ densitet av cerebrospinalvätska erhållen med ländryggspunktur, 1.006-1.007.Med inflammation i meningesna, hjärntraumas ökar den relativa densiteten hos cerebrospinalvätskan till 1.015.Den minskar med hyperproduktion av cerebrospinalvätska( hydrocephalus).

När förhöjda nivåer av fibrinogen i CSF är bildad fibrinös film eller en propp som förekommer oftare i tubercular meningit. Ibland rör med vätska lämnades vid rumstemperatur under en dag( om det är nödvändigt att exakt ange - Gör film bildas).I närvaro av fibrinös dess film dissekera nålen överförs på ett objektglas och färgades med Ziehl-Neelsen eller annan metod för att identifiera mykobakterier. En normal CSF är 98-99% vatten.

Studien av dess kemiska sammansättning är dock en viktig uppgift. Det innefattar bestämning av protein, glukos och kloridnivåer, och i vissa fall kompletteras med andra indikatorer.

CSF-protein i mer än 80% protein CSF flyter från plasmat genom ultrafiltrering. proteininnehåll hastigheten i olika delar: en ventrikulär - 0,05-0,15 g / I, cisternal 0,15-0,25 g / L, länd- 0,15-0,35 g / I. För att bestämma proteinkoncentrationen i cerebrospinalvätska kan användas vilken som helst av standardiserade metoder( med sulfosalicylsyra och ammoniumsulfat, och andra).Ökat proteininnehåll i cerebrospinalvätska( hyperproteinarchy) kan bero på olika patogenetiska faktorer( tabell 1).

studie av CSF-protein gör det möjligt att inte bara för att klargöra vilken typ av patologiska process, men också för att bedöma tillståndet av blod-hjärnbarriären. Indikatorn för dessa ändamål kan fungera som albumin förutsatt att dess nivå i CSF bestäms genom immunokemiska metoder. Bestämning av albumin genomförs i samband med det faktum att det, som blodet proteinet inte syntetiseras lokalt och kan därför vara en "markör" immunglobuliner infiltrerade från blodflödet på grund av försämrad permeabilitetsbarriär. Samtidig bestämning av albumin i serum( plasma) blod och CSF albumin tillåter oss att beräkna index:

När den intakta blod-hjärnbarriären är detta index mindre än 9, med dess måttliga skador - 9-14, med en märkbar - 14-30, med allvarliga skador - 30-100, och en ökning med mer än 100 indikerar en fullständig skada på barriären.

Under senare år ökat intresse i specifik CNS-proteiner lut - neuron enolas, protein S-100, basiskt myelinprotein( MBP), och andra. En av de lovande bland dem för kliniska ändamål är OBM.I normallut är det praktiskt taget frånvarande( koncentrationen överstiger inte 4 mg / l) och förekommer endast under patologiska tillstånd. Detta laboratorium funktionen är inte specifik för en viss klinisk enheter men reflekterar lesion storlek( oftast i samband med förstörelsen av vitt fast material).Vissa författare anser lovande definitionen av MBP i cerebrospinalvätska för övervakning av neurospida. Tyvärr finns idag fortfarande problem relaterade till direkt bestämning av koncentrationen av detta protein.

Glukos Glukos

CSF som finns i den normala CSF vid en koncentration av från 2,00 till 4,18 mmol / l. Detta värde är föremål för signifikanta fluktuationer, även i en frisk person, beroende på kost, motion, andra faktorer. Korrekt bedömning av glukosnivåerna i cerebrospinalvätskan att samtidigt bestämma nivån i blodet, där det normalt är 2 gånger högre. Förhöjda nivåer av blodglukos( giperglikoarhiya) inträffar vid diabetes mellitus, akut encefalit, ischemiska cirkulationsrubbningar och andra sjukdomar. Gipoglikoarhiya ses med meningit av olika etiologier, eller aseptisk inflammation, neoplastiska lesioner i hjärnan och membranen, åtminstone - med herpesinfektion, subaraknoidalblödning.

viss fördel jämfört med glukos som en diagnostisk markör är laktat( mjölksyra) som dess koncentration i cerebrospinalvätska( 1,2-2,1 mmol / l) är oberoende från den i blod. Dess nivå ökar avsevärt i olika förhållanden som förknippas med försämrad energimetabolism - meningit, särskilt - orsakas av grampositiva flora, hjärna hypoxi och några andra.

klorider i CSF

Klorider - innehåll i normal cerebrospinalvätska - 118-132 mmol / l. ökning av CSF-koncentrationen observerats i strid med deras avlägsnande från kroppen( njure, hjärta), i degenerativa sjukdomar och tumörer i CNS.Reduktion av kloridhalten observeras med encefalit och meningit.

Enzymer i sprit

Liqvor som kännetecknas av låg aktivitet av enzymerna som finns däri. Modifiera enzymaktivitet i CSF i olika sjukdomar är i allmänhet icke-specifik och parallella beskrivna förskjutningarna i blodet vid dessa sjukdomar( tabell 2).Olika synsätt förtjänar tolkning av förändringar i aktiviteten av kreatinfosfokinas( CPK).Detta enzym i vävnaderna i de tre fraktionerna, vilka kännetecknas inte bara av molekylära skillnader, men även naturen av fördelningen i vävnader: CK-MB( myokardium), CK-MM( muskel), CK-BB( hjärnan).Om den totala aktiviteten av CK i CSF har ingen grundläggande diagnostiskt värde( den kan ökas när en tumör, cerebral infarkt, epilepsi och andra sjukdomar), fraktionen av CK-BB är relativt specifik markör av skadad hjärnvävnad och dess aktivitet i CSF är korrelerad med Glasgow skala.

antalet celler och cytogram

vätska I studier av biologiska vätskor och CSF inklusive typiskt räkna antalet celler i cytogrammet och utstryk färgades azureozinom( Romanovsky-Giemsa Nocht, Pappenheim).Räkning av cellelement i cerebrospinalvätskan( bestämning cytosis) framställd med användning av en Fuchs-Rosenthal kammare, för-avel det Samson reagens 10 gånger. Användning av denna färgämne, inte någon annan. Det tillåter cellerna att färga i 15 min, och cellerna bibehåller oförändrade till 2 timmar.

antal celler i hela cellen delas med tre så erhållna cytosis i 1 ul. För större noggrannhet anses cytos i tre kamrar. När Fuchs-Rosenthal kammar frånvaro Goryaeva kan använda kameran, genom att räkna celler över gallret som i de tre kamrarna, är resultatet multipliceras med 0,4.Fram till nu, det finns skillnader i enheter av cellantal - antalet celler i kammaren, i en mm eller 1 liter. Förmodligen är det ändamålsenligt ändå att uttrycka antalet celler i cytosis mikroliter. Att beräkna antalet vita blodkroppar och röda blodkroppar i CSF kan användas och automatiska system.Ökat innehåll

celler i CSF( pleocytos) förekommer ofta i inflammatoriska sjukdomar, till en mindre grad - med meningeal irritation. Den mest framträdande pleocytos ses med bakteriella infektioner, svampinfektioner hjärnskador och tuberkulos hjärnhinneinflammation. I epilepsi, araknoidit, hydrocefalus, degenerativa processer, och några andra sjukdomar i det centrala nervsystemet count systemcell förblir normala.

färgning celler infödda Reagens Samson gör tillräckligt tillförlitligt differentierade celler. Men mer exakt deras morfologiska egenskaper uppnås efter fixering och färgning av cytologiska preparat förberedda. Den moderna inställning till framställningen av sådana produkter innebär användning av cytospin. Men även i USA är de utrustade med endast 55% av laboratorierna. Därför, i praktiken ett mycket enklare sätt - avsättning av celler på en glasskiva. Läkemedel bör torkas väl i luften och sedan målas.

bly count cellulära element i färgade preparat. De huvudsakligen representeras av blodceller( vanligen - lymfocyter och neutrofiler, åtminstone - monocyter, eosinofiler, basofiler) kan uppfylla de plasma och mastceller, makrofager, korniga bollar( degenerativ bildar en speciell typ av makrofag - lipofagov stånd till fettdegeneration), celler arahnoendoteliya, epindimy. Morfologin hos dessa cellelement är i allmänhet välkända för läkare och laboratoriediagnostik beskrivs i detalj i många läroböcker. Nivån och arten av det cytogram pleocytos CSF gör det möjligt att specificera den typ av den patologiska processen( tabell 3).

leukocytos ofta åtföljs av akut infektion( lokal och diffus hjärnhinneinflammation).CSF eosinofili är sällsynt - när hjärnan echinococcosis, eosinofil hjärnhinneinflammation. CSF eosinofili inte korrelerar i regel med antalet eosinofiler i blodet. Lymfocytisk pleocytos CSF inträffar i viral meningit, multipel skleros, kroniska fasen av tuberkulos meningit efter operationer på hjärnmembraner. I patologiska processer i CNS observerade polymorfism av lymfocyter, bland vilka det är aktiverade. De kännetecknas av närvaron av riklig cytoplasma med enkel blekt azurofila granuler, har vissa celler otshnurovku eller fragmentering av cytoplasman( clasmatosis).Plasmaceller visas i cytogrammet i viral eller bakteriell meningit, subakuta inflammatoriska processer, under återhämtning från neurosyphilis. Monocyter genomgår degenerering i cerebrospinalvätskan snabbare lymfocyter som observerats i multipel skleros, progressiv panencefalit, kronisk pyrande inflammation. Makrofager - "sjukvårdare" sprit, visas med blödningar, infektioner, traumatiska och ischemisk nekros. Ibland

CSF detekterades abnorma celler - de delar som genom sina morfologiska särdrag inte kan tillskrivas till specifika cellulära former. Atypiska celler finns i kroniska inflammatoriska processer( tuberkulos meningit, multipel skleros, etc), och ofta är de tumörceller. Sannolikheten att hitta tumörceller i cerebrospinalvätskan är liten( högst 1,5%).Detektionen av blastceller i CSF vid hemoblastos tillåter oss att prata om neuroleukemi. Vid analys

Vätskekompositionen är viktigt att utvärdera förhållandet mellan protein och cellulära element( dissociation).Vid cell-protein-dissociation observeras uttalad pleocytos med ett normalt eller något ökat proteininnehåll. Detta är karakteristiskt för hjärnhinneinflammation. Belkovokletochnaya dissociation kännetecknas av hyperproteinarchy i normal cytos. Detta tillstånd är typiskt för stillastående processer i cerebrospinalvätskan( tumör, araknoidit, etc.).

kliniska situationen ibland kräva att räkna antalet erytrocyter i blodig cerebrospinalvätska( för objectification hemorragi volym).Att räkna röda blodkroppar är detsamma som i blodet. Såsom angivits ovan, de sprit färgförändringar om i 1 mm innehåller mer än 500-600 erytrocyter märkbar färgning sker i närvaro av ca 2000, och när den blir hemorragisk erytrocyt nivå av mer än 4000 / L.

mikrobiologisk undersökning av cerebrospinalvätska

En av de vanligaste sjukdomarna i CNS är en varig meningit. I sådana fall blir mykorobiologisk forskning särskilt relevant. Den innehåller ett orienteringstest - bakterioskopi av läkemedel och klassisk odlingsteknik. Bakterioskopi av cerebrospinalvätska har ett begränsat diagnostiskt värde, speciellt när man erhåller en klar CSF.Smear framställd från slamvätskan erhölls genom centrifugering okarshivayut metylenblått eller Gramfärgning, även om vissa författare anser att den senaste versionen av färgen "traumatize" bildade element och skapar artefakter. Med meningit och abscesser finns en mångsidig flora som motsvarar arten av sjukdomen. Oavsett resultaten av mikroskopi av bakteriell meningit diagnos måste bekräftas av odlingsanalys som blir den avgörande faktorn vid diagnos av denna grupp av sjukdomar och välja lämplig terapi. Det genomförs i enlighet med förordningen № 375 av hälsoministeriet i Ryska federationen 23.12.98 "On åtgärder för att stärka övervakning och förebyggande av meningokockinfektion och purulent bakteriell meningit."Den vanligaste orsaken till bakteriell meningit är en Gram-negativ Diplococcus Neisseria meningitidis, vilket är 80% av fallen kan detekteras även när mikroskopi.

mikroskopi sprit

Normalt förekommer i cerebrospinalvätskan endast lymfocyter och monocyter. Med olika sjukdomar och patologiska tillstånd i cerebrospinalvätskan kan andra typer av celler förekomma.

Lymfocyter i storlek liknar röda blodkroppar. Lymfocyter har en stor kärna och en smal, omärkad cytoplasmfälg. Normalt innehåller vätskan 8-10 celler av lymfocyter. Antalet ökar med tumörer i centrala nervsystemet. Lymfocyter inträffar vid kroniska inflammatoriska processer i skalen( tuberkulös meningit, tsistitserkoznom araknoidit).

Plasmatiska celler i sprit. Celler större än lymfocyter, stor kärna, som ligger excentriskt, en stor mängd av cytoplasma med en relativt liten mängd av kärnor( cellstorlek - 6,12 mm).Plasmaceller i CSF finns bara i patologiska fall, varaktigheten av de nuvarande inflammatoriska processer i hjärnan och membranen, med encefalit, tuberkulos meningit, araknoidit tsistitserkoznom och andra sjukdomar i den postoperativa perioden, när trög sårläkning.

Vävnadsmonocyter i vätska. Storleken på cellerna är från 7 till 10 pm. I en normal vätska kan de ibland förekomma i form av enstaka prover. Monocyter återfinns i cerebrospinalvätska efter operation på det centrala nervsystemet, med en lång ström inflammatoriska processer i skalen. Närvaron av vävnadsmonocyter föreslår en aktiv vävnadsreaktion och normal läkning av såret.

Makrofager i sprit. Kan ha kärnor av olika former, som vanligtvis finns i utkanten av kärnceller cytoplasma innehåller vakuoler och inneslutningar. I normallut kan man inte hitta makrofager. Närvaron av makrofager med ett normalt antal celler i cerebrospinalvätskan observeras efter blödning eller i inflammatorisk process. Som regel inträffar de i postoperativ period, som har prognosvärde och talar om aktiv rening av CSF.

Korniga bollar i sprit. Celler med fet infiltration - makrofager med närvaro av droppar av fett i cytoplasman. I färgade vätskeberedningar har cellerna en liten perifert lokaliserad kärna och en storcellscytoplasma. Storleken på cellerna är olika och beror på de medföljande dropparna av fett. Granulära bollar finns i en patologisk vätska som erhålls från hjärncyster i foci av sönderfall av hjärnvävnad, med tumörer.

Neutrofiler i vätska. I kammaren är neutrofiler av perifert blod identiska i utseende. Närvaron av neutrofiler i cerebrospinalvätskan, även i minimala mängder, indikerar antingen en tidigare eller en befintlig inflammatorisk reaktion. Förekomsten av förändrade neutrofiler indikerar en dämpning av den inflammatoriska processen.

Eosinofiler i sprit. Bestäm i cerebrospinalvätskan med den enhetliga, glänsande granulariteten. Eosinofiler finns i subaraknoida blödningar, meningit, tuberkulos och syfilitiska hjärntumörer.

-epitelceller i CSF.Epitelceller som begränsar subaraknoidutrymmet finns ganska sällan i cerebrospinalvätskan. Dessa är stora runda celler med små runda eller ovala kärnor. Upptäckt av neoplasmer, ibland med inflammatoriska processer.

Tumörceller och komplex i cerebrospinalvätskan. De finns i en cell och en färgad beredning av sprit. Maligna celler kan referera till följande typer av tumörer:

• medulloblastom;
• spongioblastom;
• astrocytom;
• cancer.

Kristaller i sprit. Inträffar i cerebrospinalvätskan sällan, i fallet med tumörförfall.

element Echinococcus i likvore- krokar scolexes, kitin skalfragment - i cerebrospinalvätskan är sällsynta.

PCR diagnostik

CSF Under senare år har några lovande vid etiologiska diagnos neuroinfections associerade med utvecklingen av molekylärgenetiska tekniker för detektering av nukleinsyror enligt smittämnen i cerebrospinalvätskan( PCR diagnostik).

Sålunda är cerebrospinalvätskan miljön som reagerar tydligt på de patologiska processerna i centrala nervsystemet. Djupet och naturen hos dess förändringar beror på djupet av patofysiologiska störningar. En korrekt utvärdering av laboratorievätorologiska symptom gör det möjligt att klargöra diagnosen och utvärdera effektiviteten av behandlingen.

V.V.Bazarian professor i UGMA, biträdande chef doktor OKB nummer 1