Polymeraskedjereaktion vid diagnos av infektionssjukdomar

PCR - en av de metoder för DNA-diagnostik gör det möjligt att öka antalet kopior av en detekterbar del av genomet( DNA) av bakterier eller virus är en miljon gånger med användning av ett DNA-polymerasenzym. Ett test för denna specifika genomiska nukleinsyrasegment multipliceras upprepat( amplifierad) som gör att dess identifiering. Först, en DNA-molekyl av bakterier eller virus genom uppvärmning uppdelad i två kedjor, sedan i närvaro av de syntetiserade DNA-primrarna( sekvens av nukleotider som är specifika för det definierade genomisk) är bindande dem med komplementära sträckor av DNA, syntetiserat den andra strängen av nukleinsyran efter varje primer i närvaro av ett termostabilt DNA-polymeras. Två DNA-molekyler erhålles. Processen upprepas många gånger. För diagnos, endast en DNA-molekyl, dvs en bakterie eller viruspartikel. Omsättning av ett ytterligare steg - DNA-syntes på den RNA-molekyl med användning av enzymet omvänt transkriptas - har gjort det möjligt att testa RNA virus såsom HCV-virus. PCR - trestegsprocess, upprepade cykler av denaturering, annealing av primers, DNA-syntes( polymerisation).Den syntetiserade mängden DNA identifieras genom ELISA eller genom elektrofores.

PCR kan användas olika biologiskt material - serum eller blodplasma, skrapning av urinröret, biopsi, pleuravätska, cerebrospinalvätska, etc. Den första PCR användes för diagnos av infektionssjukdomar, såsom HBV, HCV, HBV, CMV-infektion, infektiös sexuellt överförbara infektioner( gonorré, trash diynaya, myco plasma, ureaplasmal infektion), tuberkulos, HIV och så vidare.d.

PCR fördel vid diagnos av infektionssjukdomar över andra metoder studier är enligt följande:

■ infekterande medlet kan detekteras i varje biologisk miljö av organismen, inklusive de material som erhållits genom biopsi;

■ Diagnos av infektionssjukdomar vid tidigaste skeden av sjukdomen;

■ möjligt kvantitativ utvärdering av resultaten av forskning( såsom ett virus eller bakterier som finns i materialet);

■ Metodens höga känslighet;t ex för att känsligheten hos PCR detektera HBV viralt DNA i blodet är 0,001 pg / ml( approximativt 4h102 kopior / ml), under det att känsligheten hos en DNA-hybridisering metod med användning av grenade prober - 2,1 pg / ml( approximativt 7h105 kopior / ml).