Immunofenotypning av hemoblastoser
Betydande framsteg i hematologiska studier förknippade under de senaste åren med hjälp av moderna immunologiska metoder och automatiserade verktyg för att analysera och sortera celler av perifert blod och benmärg - flödescytometrar. Traditionella morfologiska och cytokemiska studier av substratet cellsjukdom( blod, röd benmärg, lymfkörtlar, mjälte, etc.), i många fall, särskilt i lymfoproliferativa sjukdomar, avslöjar inte hela olika alternativ bland morfologiskt liknande former och identifiera ursprunget för den patologiska klonen. Dessa problem kan lösas endast genom att studera cellernas immunologiska egenskaper. Varje steg av differentiering Hemo-poetiska cell har sin egen uppsättning av Ar, som kallas på den internationella klassificeringen av differentiering och differentiering är uppdelade i grupper, betecknade CD.Vid block differentiering av neoplastiska förändringar kan inträffa när som helst under normal cellutveckling, vilket resulterar i en patologisk cellklon som definierar substrat sjukdom och som har samma immunologiska( eller fenotypiskt) karakteristik. Efter en studie av dessa markörer i celler kan bestämmas med någon form eller utföringsform av sjukdomen är konsekventa, dvs på basis av immunologiska cellfenotyp differentiell diagnos, som är den svåraste i lymfoproliferativa störningar, eftersom de huvudcell substrat patologiska sjukdomar är nästan samma typ av celler morfologiskt. Fenotypning tillåter användning av monoklonala antikroppar som exemplifieras blast och mogna myeloida blodceller, mono-, lymfocytisk serie i närvaro av differentierings-paid-ar( receptorer) i cellväggen. På membran av blodceller och röd benmärg kan följande Ar( markörer) identifieras.
■ CD2 är ett monomeriskt transmembran glykoprotein. Det är närvarande på ytan av alla cirkulerande T-lymfocyter och vissa NK-lymfocyter. CD2 deltar i processen med alternativ aktivering av T-lymfocyter. Detektering via CD2 monoklonala antikroppar som används i klinisk praxis för Fenaughty festa-akut T-cell-leukemi, lymfom, kroniska inflammatoriska och immunbristförhållanden.
■ CD3 - proteinkomplex associerat med Ag-specifik T-cellreceptor, är den viktigaste funktionella markör för T-lymfocyter. Det underlättar överföringen av aktiveringssignalen från
-membranet till cellens cytoplasma. Bestämning av CD3 indikerade för diagnos av akut T-cellsleukemi, lymfom( CD3 inte uttrycks i icke-T-cell-lymfoida neoplasmer) och immunbristsjukdom-tion.
■ CD4 - transmembranglykoprotein som uttrycks av en underuppsättning av T-hjälpar-( induktorer) som utgör 45% av perifera blodlymfocyter. I de tidiga stadierna av lymfocyter utveckling i bräss, Az av CD4, liksom CD8 uttryckte alla kortikala lymfocyter. Märg tymocyter, som liknar fenotypen av mogna CD4 + perifera blod-T-celler( hjälpar-T-celler), uttryck-ruyut har antingen CD4 eller CD8-receptorer. I perifert blod märks upp till 5% av cellerna samtidigt CD4 och CD8.Lite uttryck av CD4 är möjligt på vissa monocytceller. CD4 uttrycks i de flesta fall, T-cell-lymfom, inklusive mycosis fungoides, och i HTLV-associerade T-celleukemi( HTLV - HTLV - T lim-fotropny humant virus).
■ CD5 - enkelkedjigt glykoprotein som är närvarande på alla mogna T-lymfocyter och de flesta tymocyter, är svagt uttrycks av B-lymfocyter. CD5 detekteras på neoplastiska B-celler självhäftande förfina kronisk lymfatisk leukemi och lymfom tsentrotsitarnoy. I andra typer av maligna lymfoida sjukdomar - follikulära lymfom, hårcellsleukemi, storcelligt lymfom - CD5 inte uttrycks.
■ CD7 är ett enkelsträngat protein, den tidigaste markören för T-cell differentiering. Den uttrycks av pro-T-lymfocyter även innan de migrerar till thymus. CD7 detekteras på de flesta NK-celler, svagt uttryck noteras på monocyter. B-lymfocyter och granulocyter innehåller inte denna Ag. Definitionen av CD7 används för diagnos av lymfom, barns T-celllymfoblastisk leukemi.
■ CD8 är ett protein bestående av två polypeptidkedjor kopplade av disulfidbroar. Den uttrycks subpopulation Qi totoksicheskih och suppressor T-lymfocyter, som utgör 20-35% av perifera blodlymfocyter. Detta Ar har också NK-celler, kortikala tymocyter, 30% medullär tymocyt-ning och underpopulation av benmärgceller. CD8 testades för att kvantifiera innehållet i
T-suppressorer■ CD 10 - associerad med cellmembranet av endopeptidas. CD10 uttrycker unga former av B-lymfocyter och en subpopulation av kortikala lymfocyter. CD10 uttrycker alla celler av ALL.
■ uttrycka CD11c på cellmembranet av makrofager, monocyter, granulocyter, NK-celler och hårcellsleukemi.
■ CD13 - glykoprotein uttrycks av celler mielomonotsitar-ben-serien( progenitorceller, neutrofiler, basofiler, eosin-fylum, monocyter och celler av myeloid leukemi).Det är frånvarande i T. B-lymfocyter, erytrocyter och blodplättar.
■ CD14 - ytmembran glykoprotein. Den uttrycks huvudsakligen av monocyter och makrofager. CD14 bestäms av mer än 95% av perifert blod och benmärgsmonocyter på
.Starkt uttryck av CD14 observeras vid akut myeloblastisk leukemi. Vid akut och kronisk lymfoblastisk leukemi är detta Ar inte uttryckt.
■ CD15 är en oligosackarid. Han deltar i processer av fagocytos och kemotaxis. Denna Ar är närvarande på ytan av mogna granulocyter och Berezovsky-Sternberg-celler. Uttryck av Ar CD15 detekteras i Hodgkins sjukdom. I icke-Hodgkins limfomar detekteras inte CD15 i de flesta fall.
■ CD16 uttrycks på ytan av granulocyter, monocyter, makrofager och NK-celler. Alla lymfocyter som uttrycker denna Ar har förmågan för antikroppsberoende cellcytotoxicitet. CD16 bestäms när man skriver kroniska myelocytiska leukemier för att karakterisera NK-celler.
■ CD 19 - glykoprotein närvarande på alla perifera B-lymfocyter såväl som i alla B-cellsföregångare. Det är frånvarande på plasmaceller. Detta är den tidigaste markören av B-celler, spelar en viktig roll vid reglering av aktivering och proliferation av B-lymfocyter. CD19 uttrycks på neoplastiska celler av akut leukemi av B-cellsursprung, och är också närvarande i vissa former av akut leukemi monoblastny.
■ CD20 är ett icke-glykosylerat protein. B-lymfocyten ontogeni Ar CD20 CD19 visas efter steget med pre-B-cell-differential-tsirovki lymfocyter. Det är frånvarande på plasmamembranet av plasmaceller. Uttryckt i ALL, kronisk lymfatisk leukemi, hårcellsleukemi, Burkitt Lim fomah och mycket sällsynt - akut leukemi monoblastny.
■ CD21 - glykoprotein, i ett betydande antal närvarande på B-lymfocyter i lymfoida organ och i små mängder - på B-celler av perifert blod. CD21 är en receptor för Epna-Stein-Barr-virus.
■ CD22 är ett protein bestående av två polypeptidkedjor. Det uttrycks på membranet hos de flesta B-lymfocyter, inklusive stamceller( prolymphocyter).Ar uttrycks inte på B-lymfocyter( plasmaceller) efter deras aktivering. Den mest uttalade uttryck av CD22 på cellerna detekteras vid volosatokle-exakta leukemi, svag - med myeloid leukemi och icke-T ALL kletoch-tion.
■ CD23 - glykoprotein uttrycks av aktiverade B-lim-fotsitami perifert blod mycket mer. CD23 medierar IgE-beroende cytotoxicitet och fagocytos av makrofager och eosinofiler.
■ CD25 är ett enkelkedjigt glykoprotein identifierat som en lågaffinitetsreceptor för IL-2.Denna receptor uttrycks på aktiverade T-lymfocyter och vid en lägre densitet på aktiverade B-celler. I det perifera blodet hos friska människor är Ar närvarande i mer än 5% av lymfoidcellerna.
■ CD29 - Fibronektinreceptor. Det är allmänt fördelat i vävnader, det uttrycks av leukocyter. Bestämning av CD29-celler i peri
fericheskoy blod som används för typning en delmängd av T-adhesiv ström med fenotypen hos CD4 + CD29 +, kallas hjälpar typ 2( Th2).Dessa celler, genom produktion av lymfokiner, deltar i förverkligandet av det humorala immunsvaret.
■ CD33 - transmembran glykoprotein. Det är närvarande på ytan av celler i myeloid och monocytisk serien. Det finns på ytan av monocyter och, i mindre utsträckning, granulocyter av perifert blod. Cirka 30% av röda benmärgsceller uttrycker CD33, inklusive myeloblaster, promyelocyter och myelocyter. Ar är frånvarande på membran av polypotenta stamceller. CD33 används för att karakterisera celler i myeloida leukemier. Leukemi celler av lymfoid och erythroid ursprung uttrycker inte CD33.
■ CD34 - fosfoglykoprotein, uttryckt i hematopoetiska progenitorceller, inklusive stamceller monopotentnye. Det mest uttalade uttrycket av Ar observeras i tidiga progenitorer;när cellerna mognar faller markörens uttryck. CD34 finns också på endotelceller. CD34 används för att karakterisera celler i akut myelogen och lymfocytisk leukemi. Med kronisk lymfocytisk leukemi och limfomuttryck detekteras inte Ar CD34.
■ CD41a uttrycks av blodplättar och megakaryocyter. Monocle funktionella-CD41a antikroppar för detektering för diagnostisk användning Me-gakarioblastnogo leukemi. Med Glązmann trombastheni är uttrycket av denna Ar frånvarande eller undertryckt signifikant.
■ CD42b är ett membran glykoprotein bestående av två polypeptidkedjor. Markören finns på ytan av blodplättar och megakaryocyter. I klinisk praxis CD42b detektering för diagnostisk användning thrombocytopathy - syndrom, Bernard-Soulier.
■ CD45RA tillhör klassen av transmembran glykoproteiner. Detta är en vanlig leukocyt Ag. Uttrycks på cellmembranet av B-lymfocyter i mindre utsträckning T-lymfocyter och mogna medullära tymocyter. Markören uttrycks inte av granulocyter.
■ CD45RO - lågmolekylära isoformen av CD45RA - totalt leukocyt Ag. Identifiera T-cellen( minnes-T-celler) subpopulationer av B-lymfocyter, monocyter och makrofager. Monoklonala antikroppar att interagera med de flesta CD45RO tymocyt subpopulation av vilande CD4 + och CD8 + T-lymfocyter och mogna aktiverade T-celler. Celler av myelomonocytiskt ursprung, granulocyter och monocyter bär också denna Ag. Det detekteras med prenatala och immunoblastiska lymfom.
■ CD46-O-glykosylerad dimer. Det är allmänt fördelade i vävnader och uttryckas T- och B-lymfocyter, monocyter, gra-nulotsitami NK-celler, blodplättar, endotelceller, fibroblaster, men är frånvarande på ytan av erytrocyter. CD46 ger vävnadsskydd från komplementverkan.
■ CD61 - trombocyt Ag. Det uttrycks på trombocyter, perifert blod och benmärg, liksom på megakaryocyter minuten och megakaryoblasts. Dess definition används som ett märke för
ra för akut megakaryoblastisk leukemi. Uttryck av Ar är frånvarande eller undertryckt hos patienter med Glanzmann trombasteni.
■ CD95, även känd som Fas eller APO-1, - Gly-transmembran koprotein, familjemedlem av tumörnekrosfaktor-receptorer. Den uttrycks i betydande mängder i de T-lymfocyter( CD4 + och CD8 +) perifert blod och, i mindre utsträckning, B-lymfocyter och NK-celler. Denna Ar uttrycks också på granulocyter, monocyter, vävnadsceller och neoplastiska celler. Bindning av CD95 till Fas-liganden( CD95L) inducerar apoptos i cellerna.
■ CD95L, eller Fas-ligand, ett membranprotein som tillhör familjen av tumörnekrosfaktor-receptorer. Denna Ag uttrycks av cytotoxiska T-lymfocyter, NK-celler och mycket ofta tumörceller;den huvudsakliga induceraren av apoptos i celler.
■ HLA-DR - monomorfa klass Il determinanta molekyler MHC människa( HLA).Etsya markör uttrycks på Langerhans celler, dendritiska celler av lymfoidorgan, och vissa typer av makrofager, B-lymfocyter, aktiverade T-celler och tymus epitelceller. Studera aktiv markör användes för att kvantifiera de aktiverade T-lymfocyterna med en fenotyp CD3 + HLA-DR +.
användning av olika monoklonala antikroppar mot selektionsmarkören kan skapa stående cell fenotypisk egenskap hos denna form av leukemi( tabell A-7-30).
Förutom att använda immunfenotypning tekniker för diagnos och differentiell diagnos av hematologiska maligniteter, särskilt viktig vände deras användning vid behandlingsprocessen för att bedöma tillståndet i remission och kvarvarande populationen av leukemiceller. Veta fenotypiska "porträtt" av blastceller under perioden för diagnos, till dessa markörer kan hitta cell leukemiklon i remission, och från ökningen av deras antal - att förutsäga utvecklingen av återfall lång( för 1-4 månader) tills dess kliniska och morfologiska egenskaper.
Tabell immunophenotypic karakterisering av leukemi [Myers A.R., 1996]
Tabell immunophenotypic karakterisering av leukemi [Myers A.R., 1996]
Tabell immunofenotypen ALL [Rich R.R., 2001]
Tabell immunofenotypen ALL [Rich R.R., 2001]
End Table.
Slut på tabellen.
Anmärkning: cig q - cytoplasmatisk Igc-kedja;sig q är en yta Ig och en kedja.