Испитивање ензима и изоензима

Ензими су специфични протеини који испуњавају улогу биолошких катализатора у телу.Ензими се налазе у свим ћелијама тела, где је њихова концентрација много већа него у крвној плазми.Серум

крви, састав ензима који је релативно константан, се најчешће користи као предмет истраживања.Нормална активност ензима у серуму одражава однос између биосинтезе и ослобађања ензима( са уобичајеном обнављањем ћелије), као и њиховог чишћења из крвотока.Повећање стопе обнове ензима, оштећења ћелија обично доводи до повећања активности ензима у серуму.У серуму крви се разликују три групе ензима: ћелијска, секреторна и излучива.

Ћелијски ензими су подељени у две групе у зависности од локализације у ткивима:

■ неспецифични ензими који катализују реакције размене, заједничке за сва ткива и налазе се у већини органа и ткива;

■ органски специфични или индикаторски ензими специфични за одређени тип ткива.

Серумска активност ћелијских ензима је ниска или не постоји.У патолошким процесима, активност ензима ове групе у серуму зависи од брзине ослобађања од ћелија, што је, пак, одређено брзином и степеном њиховог оштећења.

Сецреторни ензими( церулоплазмин, псеудохолинестераза, липопротеин липаза) иду директно у крвну плазму и извршавају специфичне функције у њему.Ови ензими се синтетишу у јетри и стално се пуштају у плазму.Њихова активност у серуму је већа него у ћелијама или ткивима.У клиничкој пракси, они су од интереса када њихова активност у серуму у крви постаје нижа од нормалне због поремећене функције јетре.

Екскретни ензими настају у дигестивном систему( панкреас, црева, јетра, ендотел са жучним каналима).Они укључују а-амилазу, липазу, алкалне фосфатазе итд. Нормално је њихова серумска активност ниска и константна.Међутим, у патологији, када је блокирана било која од уобичајених путева излучивања, активност ових ензима у серуму значајно повећава.

Измерена активност ензима може бити због присуства врло блиских особина, али благо различитих молекуларних облика ензима.Ови различити облици се називају изоензимима.Истраживање изоензима у клиничкој пракси је од интереса када се индивидуални изоензими формирају у различитим ткивима( на примјер, у срцу и јетри, преовлађују различити изоензиме ЛДХ).

За квантификацију активности ензима, Комисија за ензиме Међународне биохемијске уније препоручила је стандардну међународну јединицу( ИУ).Јединица активности било ког ензима узима се као његова количина, која под оптималним условима катализује конверзију од 1 μмол супстрата у минути( μмол / мин).

Активност ензима се процењује брзином катализиране реакције на одређеној температури и пХ медијума, концентрацији супстрата.Стога, приликом одређивања активности ензима, исти услови морају бити строго поштовани.

Ензимска реакција је осетљива на промене температуре.Обично се ради на температури унутар

опсега од 25-40 ° Ц, али при различитим температурама, оптимални пХ, пуфер, супстрат и други параметри су различити.Максимална активност већине ензима у људском телу је примећена на температури од око 37 ° Ц.Због тога, у сврху међународне стандардизације, мерења ензимске активности врше се на одређеној температури.Испод нормалних вредности ензимске активности дата су за температуру од 37 ° Ц.

Испитивање ензима се користи у клиничкој пракси ради рјешавања различитих проблема: дијагнозе, диференцијалне дијагнозе, процјене тока болести, одређивања ефикасности терапије, степена опоравка и прогнозе болести.Три типа ензимских промена су познате у случају патологије: хиперфермент-миа - повећана активност ензима у поређењу са нормом, хипоферменација - његов пад, дисферментација - појављивање ензима у крви, обично се не детектују.