Detecção do vírus da hepatite C

HCV no material está normalmente ausente.

Ao contrário dos métodos sorológicos para o diagnóstico de HCV, onde AT é detectado para HCV, a PCR permite a detecção da presença de ARN de HCV diretamente e expressando quantitativamente sua concentração no material de estudo

.O teste tem especificidade específica e alta sensibilidade: dez moléculas de ARN do HCV no material de teste são suficientes para a sua detecção. A detecção de AT ao HCV confirma apenas o fato da infecção do paciente, mas não permite julgar a atividade do processo infeccioso( sobre a replicação do vírus) e o prognóstico da doença. Além disso, o AT ao HCV é encontrado tanto no sangue de pacientes com hepatite aguda e crônica quanto nos pacientes doentes e recuperados, e muitas vezes o AT no sangue aparece apenas alguns meses após o aparecimento do quadro clínico da doença, dificultando o diagnóstico. A detecção de HCV no sangue usando PCR é um método de diagnóstico mais informativo. A detecção de ARN de HCV na PCR atesta a viremia, permite julgar a replicação do vírus no organismo e serve como um dos critérios para a eficácia da terapia antiviral. A detecção de ARN de HCV por PCR nos estádios iniciais do desenvolvimento de uma infecção viral no contexto da ausência completa de marcadores serológicos pode ser a primeira evidência de infecção. No entanto, a detecção isolada de ARN de HCV no contexto da ausência completa de outros marcadores sorológicos não pode eliminar completamente o resultado falso positivo da PCR.Nesses casos, é necessária uma avaliação abrangente de estudos clínicos, bioquímicos e morfológicos, com reiterada confirmação repetida da presença de infecção por PCR.O algoritmo para diagnosticar HCV usando o método de PCR é mostrado na Fig.

O uso do método de PCR em pacientes com HCV crônico é de grande importância, uma vez que a maioria deles não se correlaciona entre a presença de replicação viral e a atividade de enzimas hepáticas. Nesses casos, apenas PCR permite avaliar a presença de replicação viral, especialmente se o resultado final for expresso quantitativamente. Na maioria dos casos, o desaparecimento do ARN do HCV do soro sanguíneo ocorre mais tarde do que a normalização das enzimas hepáticas, portanto sua normalização não pode servir como base para a interrupção do tratamento antiviral.

É praticamente importante para a detecção de ARN de HCV investigar o método de PCR não apenas com soro, mas também com linfócitos e hepatobiobaptam. Os vírus podem ser detectados 2-3 vezes mais frequentemente no tecido do fígado do que no soro. Ao avaliar os resultados do estudo do soro sanguíneo para o ARN do HCV, deve-se lembrar que a viremia pode ser de natureza flutuante( como a mudança na atividade enzimática).Portanto, após resultados positivos do estudo de PCR, um resultado negativo pode ser obtido e vice-versa. Nesses casos, para resolver as dúvidas que surgem, é melhor investigar os hepatobiobaths.

A detecção de ARN de HCV em um material que usa PCR é usada para os seguintes propósitos:

■ resolução de resultados questionáveis ​​de estudos sorológicos;

■ diferenciação do VHC de outras formas de hepatite;

■ detecção do estágio agudo da doença em comparação com a infecção ou contato transferido;o estágio de infecção de recém-nascidos de mães sorotipos de HCV;

■ monitorando a eficácia do tratamento antiviral.

Todas as características acima da avaliação de resultados e abordagens para o diagnóstico de HCV usando PCR são relevantes para outras infecções.

O método de PCR permite não só detectar ARN de HCV no material de teste, mas também estabelecer seu genótipo. A determinação do genótipo do vírus é de grande importância para a seleção de pacientes com VHC crônico no tratamento de interferão alfa e ribavirina. As indicações laboratoriais para o tratamento do interferão alfa crônico do HCV são as seguintes:

■ aumento da atividade das transaminases;

■ presença de ARN de HCV no sangue;

■ genótipo 1 HCV;

■ alta viremia no sangue( mais de 8x105 cópias / ml).

Agora é possível determinar quantitativamente o teor de ARN do HCV no soro sanguíneo por PCR, o que é de grande importância para o tratamento do tratamento com interferão alfa. O nível de viremia é avaliado da seguinte forma: para o ARN do HCV de 102 a 104 cópias / ml - fraco;de 105 a 107 cópias / ml - médio, acima de 108 cópias / ml - alto. Com um tratamento eficaz, o nível de viremia diminui.