Doenças associadas ao metabolismo de hema e porfirina prejudicada
A talassemia é um grupo heterogêneo de distúrbios genéticos associados à síntese prejudicada de cadeias de polipéptidos Hb normais. Essas anomalias levam ao desenvolvimento de anemias microcíticas hipocrômicas de severidade variável. A diminuição da síntese das cadeias de uma globina causa a-talassemia, cadeias P - p-talassemia. Nos seres humanos, duas idênticas a-globina humana em cada cromossoma 16 e um gene de P-globina no cromossoma 11.
maioria dos casos é causada por uma deleção-talassemia de genes que controlam a síntese de cadeias de a-globina. A gravidade da a-talassemia está relacionada ao número de deleções desses genes. A exclusão de um gene não é clinicamente aparente. Com a deleção de dois genes, é possível uma anemia leve com uma diminuição da MCV.Os resultados da eletroforese de Hb são normais. Os métodos de diagnóstico de DNA são usados para estabelecer o diagnóstico. Com a perda de 3 genes, desenvolve-se anemia de intensidade variável com um teor de Hb de 70-90 g / l. Quando a eletroforese é detectada, HbH Deletion de todos os 4 genes leva a um feto incompatível com a vida.
P-talassemia( * 141.900, 11p15.5, mais de 90% de talassemia) é causada pela expressão do gene anormal da cadeia de p-globina. Pequena R-talassemia ocorre em indivíduos heterocigotos para um gene patológico. A maioria deles não tem manifestações clínicas, mas revelam hipocromia dos glóbulos vermelhos e uma diminuição da MCV.O diagnóstico é confirmado por eletroforese Hb( aumento do conteúdo de HbA2 e / ou HbF).A p-talassemia grande( anemia de Cooley) se desenvolve em indivíduos homozigotos para um gene patológico. Já no primeiro ano de vida desenvolve anemia microcítica hipocrômica grave. O tratamento inclui transfusões de sangue regulares em combinação com a administração de drogas de ligação de ferro ou um transplante de medula óssea vermelha.
Porfírio - grupo de doenças heterogêneas, principalmente hereditárias, que são baseados em distúrbios da biossíntese do heme e acúmulo de porfirinas no organismo e / ou seus precursores.
A síntese de heme ocorre em 8 etapas, cada uma das quais exige uma enzima específica. Um papel fundamental é desempenhado pela enzima do primeiro estágio - sintetase do ácido aminolevulinico, a regulação de sua atividade limita a taxa de síntese de heme. Sob a influência de fatores indutores, a atividade desta enzima pode ser aumentada 5-6 vezes, e quando o produto final( heme) é acumulado, ele diminui.
A forma de porfiria é determinada pela inadequação de uma das 8 enzimas específicas na cadeia de síntese de Heme. O bloco enzimático em qualquer nível desta cadeia leva a uma diminuição da quantidade de heme e provoca um aumento na atividade da sintetase do ácido aminolevulinico. Como resultado, os produtos de síntese se acumulam antes da seção bloqueada da corrente.
Dependendo de onde o aumento da formação e acumulação de porfirinas e seus precursores ocorre, a porfiria é dividida em hepática e eritropoiética. Na maioria dos casos, o defeito enzimático é expresso em todos os tecidos, por isso é mais correto falar apenas sobre o envolvimento primário no processo do fígado ou medula óssea. Valores de referência de porfirina concentrações são mostrados na Tabela. .
Tabela Referência valores de concentração de porfirina no sangue [Henry JD, 1996]
Tabela Referência valores de concentração de porfirina no sangue [Henry JD, 1996]
O curso clínico é dividido em porfíria aguda( NAK, coproporfíria hereditáriae outros) e crônica( porfitecimento congênito, porfiria hepática da pele, etc.).O mais comum
variante - CPE( frequência - cerca de 1:30 000) associado com insuficiência sintase hidroximetilbilano, porfobilinogéniodesaminase ou sintetase uroporfirogen( * 176.000, 11q23.3, defeitos do gene de PBGD, HMBS, UPS).
Em 70-90% dos portadores de um gene patológico, não ocorrem manifestações clínicas na vida. Em outros casos, a doença é ataques manifestados de dor abdominal aguda, as lesões de periférica( polineuropatia) e centrais( convulsões, as convulsões epilépticas, delírios, alucinações) do sistema nervoso provocadas por tomar um número de drogas e medicamentos hormonais, mas também várias tensões, que pode ser fatal( CFRaproximadamente 60%).OPP refere-se ao grupo de porfiria hepática aguda.
Um diagnóstico presuntivo de porfiria aguda pode ser feito com base na aparência de urina colorida durante um ataque( de um pouco rosa a marrom avermelhado).cor-de-rosa é urina, devido a um elevado teor de porfirinas nele, e a castanho-avermelhada - uma presença pró-toporfirina de degradação do produto porfobilinogénio. Para confirmar o diagnóstico, é realizado um complexo de estudos bioquímicos e genéticos.
Na primeira fase, a urina é examinada quanto à presença de excesso de porfino bilinogênio nela - um teste de triagem qualitativa com o reagente de Ehrlich, ou
58-aminolevulinic acid( 5-ALA).Porphobilinogen, reagindo com o reagente de Ehrlich, forma um produto de cor rosa-vermelho colorido em uma solução ácida. Este teste é quase sempre positivo para ataques agudos de porfiria e apenas em casos raros é falso positivo. O resultado do teste negativo não permite excluir o diagnóstico de porfiria aguda. Isto é devido a uma série de razões: a urina pode conter substâncias inibitórias que causam um resultado falso negativo;um aumento na concentração de porfobilinogénio pode ser insignificante( abaixo do limite de sensibilidade do método);a excreção de porfobilinogênio pode diminuir rapidamente e se normalizar dentro de poucos dias após um ataque agudo. A este respeito, todos os dados positivos e alguns negativos( na presença de um quadro clínico apropriado da doença) devem ser confirmados por determinação quantitativa de porfobilinogênio na urina. Dado que, em alguns casos, na OPP, o conteúdo do 5-ALA primeiro aumenta acentuadamente, é necessário realizar um estudo sobre 5-ALA na presença de sintomas clínicos e um teste negativo para o porfilia-nógeno.
Normalmente, a concentração de porfobilinogênio na urina é inferior a 2 mg / L.Ao obter resultados normais de determinação quantitativa de porfirinogênio na urina, a porfiria como causa de sintomas agudos pode na maioria dos casos ser rejeitada. Pacientes com maior concentração de PHB na urina são diagnosticados com "porfiria aguda" e ainda realizam pesquisas sobre o diagnóstico diferencial de OPP e outras formas de porfiria aguda. Para o efeito, é utilizada a definição de porfirinas totais em fezes.
Normalmente, a concentração de porfirinas totais nas fezes é inferior a 200 mmol / kg de fezes secas. A concentração normal de porfirinas totais nas fezes confirma o diagnóstico de OPP.Com porfiria varigada e protoporfiria congênita, esta concentração aumenta muitas vezes.
Assim, o diagnóstico de OPP durante o curso agudo da doença pode ser estabelecido com base em uma maior concentração de unhas porfóbicas na urina e no conteúdo normal de porfirinas totais nas fezes. Fora da exacerbação e em casos assintomáticos, o conteúdo elevado de porfocininogênio na urina é detectado apenas em 30% dos pacientes com OPP.Nesses casos, é necessário realizar um estudo da atividade de porphobilinogen deaminase em eritrócitos.
Porphobilinogen deaminase é uma enzima citoplasmática que catalisa a condensação de quatro moléculas de porfobilinogênio para formar tetrapirrole linear. A enzima existe em duas isoformas, uma das quais é específica para eritrócitos e a outra está contida nas células de praticamente todos os tecidos. Normalmente, a atividade de porphobilinogen deaminase em eritrócitos é de 5,8-11,7 nmol / s / l [Tiz N., 1997].Aproximadamente 90% dos pacientes com atividade enzimática de OPP em eritrócitos são reduzidos em 2 vezes. Em aproximadamente 5% dos pacientes, a atividade de porfobilinogênio desaminase pode estar dentro dos limites normais devido à sobreposição nos níveis de atividade enzimática no normal e na OPP.Nesses casos, um diagnóstico preciso pode ser feito apenas usando métodos genéticos moleculares. A informatividade dos vários métodos diagnósticos de
OPP dependendo do período da doença é apresentada nas Tabelas 10-7, e na Fig. O algoritmo para diagnosticar a doença é dado. O gene gene de porfobilina-desaminase é localizado no cromossomo 11( 11q23-11qter).Para a detecção de mutações, o DNA dos linfócitos dos pacientes é examinado por PCR, seqüenciamento ou análise RFLP.
Fig. Algoritmo de exame de pacientes com suspeita de porfiria
Fig. Algoritmo para a avaliação de pacientes com suspeita de métodos de diagnóstico porfiria
Tabela Informativnost diferente CPE depender da doença
Tabela alterações bioquímicas típicas associadas com perturbações do metabolismo dos porfirina [Henry J. D., 1996]
Notas: UE - uroporfirina;KP - coproporfirina;PP - protoporfirina;Ácido 5-ALA-58-aminolevulínico;PBG - porfobilinogénio;T - aumento;TT - um aumento significativo;H é a norma.
Notas: UE - uroporfirina;KP - coproporfirina;PP - protoporfirina;Ácido 5-ALA-58-aminolevulínico;PBG - porfobilinogénio;T - aumento;TT - um aumento significativo;H é a norma.