Analiza płynu mózgowo-rdzeniowego( płynu mózgowo-rdzeniowego) - przyczyny, objawy i leczenie. MF.

Alkohol( płyn mózgowo-rdzeniowy lub mózgowo-rdzeniowy, CSF) jest płynem biologicznym niezbędnym do funkcjonowania ośrodkowego układu nerwowego. Jego badania są jednym z najważniejszych rodzajów badań laboratoryjnych. Składa się on z fazy pre-analityczną( przygotowanie tematu, zbieranie materiału i jego dostawy do laboratorium), analityczny( właściwie robi badania) i postanalytical( zapis wyniku).Tylko poprawne wykonanie wszystkich manipulacji na każdym z tych etapów decyduje o jakości analizy.

Płyn mózgowo-rdzeniowy( płyn mózgowo-rdzeniowy) powstaje w splotach naczyniowych w komorach mózgu. U dorosłego człowieka 110-160 ml CSF krąży jednocześnie w przestrzeniach subarchnoidalnych iw komorach mózgu, 50-70 ml w kanale kręgowym. Likier powstaje w sposób ciągły z szybkością 0,2-0,8 ml / min, co zależy od ciśnienia wewnątrzczaszkowego. W dzień u zdrowej osoby powstaje 350-1150 ml płynu mózgowo-rdzeniowego.

Liquor uzyskuje się poprzez nakłucie kanału kręgowego, częściej - lędźwiowo - zgodnie z procedurą, dobrze znanymi neuropatologami i neurochirurgami. Pierwsze krople są usuwane( krew "podróżująca").Następnie płyn mózgowo-rdzeniowy zbiera się w co najmniej 2 probówkach: w standardowej probówce( chemicznej, odśrodkowej) do ogólnej analizy klinicznej i chemicznej oraz sterylnej do testów bakteriologicznych. W formularzu skierowania do badania CSF, lekarz powinien wskazać nie tylko nazwę pacjenta, ale także diagnozę kliniczną i cel badania.

Należy zauważyć, że dostarczane do próbek alkohol laboratorium powinno być zabezpieczone przed pergrevaniya lub chłodzony, a próbki do testów wykrywania polisacharydów bakteryjnych serogicheskih powinien być ogrzany na łaźni wodnej w ciągu 3 minut.

rzeczywistości badania laboratoryjne płynu mózgowo-rdzeniowego( faza analizy) odbywa się zgodnie z zasadami przyjętymi w laboratorium klinicznym w analizie wszelkich płynów ustrojowych, i zawiera następujące kroki:

- analizy makroskopowej - ocena właściwości fizykochemicznych( rozmiar, kolor znaków),
- zliczanie liczby komórek,
- mikroskopia natywnego preparatu i badanie cytologiczne barwnego preparatu;
- badanie biochemiczne,
- badanie mikrobiologiczne( według wskazań).

Uważamy to za stosowne i pouczające w niektórych przypadkach uzupełniać badanie płynu mózgowo-rdzeniowego immunologicznych i ewentualnie - innych badań, których znaczenie jest omawiany w literaturze. Objaśnienie wskaźniki

alkohol

normalny CSF bezbarwny porozrachna( w wodzie destylowanej, w porównaniu z których własności fizyczne ogólnie opisać CSF).

Barwa szaro-szaro-zielonego likieru wynika zwykle z domieszki drobnoustrojów i leukocytów. Czerwony CSF różnej intensywności( eritrohromiya) napędzany przez zmieszanie z erytrocytami zachodzi, gdy świeże krwotok lub uszkodzenia mózgu. Wizualnie obecność erytrocytów wykrywa się, gdy ich zawartość przekracza 500-600 μl.

W procesach patologicznych ciecz może być barwiona na kolor ksantochromowy w kolorze żółtym lub żółto-brązowym przez produkty rozkładu hemoglobiny. Konieczne jest zapamiętanie i fałszywa ksantochromia - barwa likieru spowodowana preparatami medycznymi. Rzadziej spotykamy zielonkawy kolor CSF( ropne zapalenie opon mózgowych, ropień mózgu).W literaturze opisano także kolor skórki płynu mózgowo-rdzeniowego - z przełomem torbieli czaszkowo-czaszkowej w płynie mózgowo-rdzeniowym.

Zmętnienie płynu mózgowo-rdzeniowego może być spowodowane zanieczyszczeniem komórek krwi lub drobnoustrojów. W tym ostatnim przypadku mętność można usunąć przez odwirowanie. Gdy CSF zawiera zwiększoną ilość grubo zdyspergowanych białek, staje się opalizujący.

Względna gęstość płynu mózgowo-rdzeniowego uzyskana przy nakłuciu lędźwiowym, 1,006-1,007.W przypadku zapalenia opon mózgowych, urazów mózgu, względna gęstość płynu mózgowo-rdzeniowego wzrasta do 1,015.Zmniejsza się wraz z nadprodukcją płynu mózgowo-rdzeniowego( wodogłowie).

Przy wysokiej zawartości fibrynogenu w CSF rozwija się włóknista folia lub zakrzep, co jest częstsze w gruźliczym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych. Czasami probówkę z płynem pozostawia się w temperaturze pokojowej na jeden dzień( jeśli konieczne jest dokładne określenie - czy powstał film?).W obecności fibrynowego filmu, jest on przenoszony przez igłę preparatywną na szkiełko i barwiony przez Tsil-Nielsen lub inną metodą wykrywania prątków. Normalny CSF to 98-99% wody.

Niemniej jednak badanie jego składu chemicznego jest ważnym zadaniem. Obejmuje on oznaczanie poziomów białka, glukozy i chlorków, aw niektórych przypadkach jest uzupełniany innymi wskaźnikami.

Białko w płynie

Ponad 80% białka CSF pochodzi z plazmy w wyniku ultrafiltracji. Białko wskaźnik zawartości różne części: część komory - 0,05-0,15 g / l, cisternal 0,15-0,25 g / l, lędźwiowego 0.15-0.35 g / l. Do określenia stężenia białka w ługu można zastosować dowolne znormalizowane metody( z kwasem sulfosalicylowym i siarczanem amonu itp.).Zwiększona zawartość białka w płynie mózgowo-rdzeniowym( hiperproteinarchia) może być spowodowana różnymi czynnikami patogenetycznymi( Tabela 1).

badania CSF umożliwia nie tylko w celu wyjaśnienia natury procesu chorobowego, ale także ocenić stan barierę krew-mózg. Wskaźnik do tych celów może służyć jako albumina pod warunkiem, że jej poziom w CSF jest określony metodami immunochemicznymi. Określenie albuminy przeprowadzone w związku z tym, że jako białko krwi nie jest syntetyzowany lokalnie a zatem może być „znacznik” immunoglobuliny infiltrowane od przepływu krwi spowodowane zaburzeniem bariery przepuszczalności. Jednoczesne określanie zawartości albuminy w surowicy krwi( osocze) krwi i płynu mózgowo-rdzeniowego albuminy pozwala obliczyć wskaźnik:

Gdy nienaruszona bariera krew-mózg, wskaźnik ten jest mniejszy niż 9, z umiarkowanym uszkodzeniem - 9-14, z widocznym - 14-30, z ciężkim uszkodzeniem - 30-100, a wzrost o ponad 100 oznacza całkowite uszkodzenie bariery.

W ostatnich latach wzrost zainteresowania określonym OUN białka cieczy - neuronów enolazy, białko S-100, zasadowego białka mieliny( MBP) i innych. Jednym z obiecujących dla nich celów klinicznych jest OBM.W normalnym napoju jest praktycznie nieobecny( jego stężenie nie przekracza 4 mg / l) i pojawia się tylko w warunkach patologii. Ta cecha laboratoryjna nie jest specyficzna dla pewnych postaci nozologicznych, ale odzwierciedla zasięg zmiany( związanej głównie ze zniszczeniem istoty białej).Niektórzy autorzy rozważają obiecanie definicji MBP w płynie mózgowo-rdzeniowym w celu monitorowania neurospidy. Niestety, dzisiaj nadal istnieją problemy związane z bezpośrednim określeniem stężenia tego białka.

Glukoza w płynie

Glukoza jest zawarta w normalnym ługu w stężeniu 2,00-4,18 mmol / l. Wartość ta podlega znacznym wahaniom, nawet u zdrowej osoby, w zależności od diety, ćwiczeń fizycznych i innych czynników. Aby uzyskać prawidłową ocenę poziomu glukozy w płynie mózgowo-rdzeniowym, zaleca się równoczesne określenie jego poziomu we krwi, gdzie zwykle jest 2-krotnie wyższa. Podwyższone poziomy cukru we krwi( giperglikoarhiya) występuje w cukrzycy, ostre zapalenie mózgu, zaburzenia krążenia, niedokrwienia i innych chorób. Gipoglikoarhiya widać z zapaleniem opon mózgowych o różnej etiologii, lub aseptycznego zapalenia, nowotworowych zmian w mózgu i błony, co najmniej - z infekcji opryszczki, krwotoku podpajęczynówkowego.

pewną przewagę nad glukozą jako marker diagnostyczny mleczan( kwas mlekowy), a jego stężenie w płynie mózgowo-rdzeniowym( 1,2-2,1 mmol / l) jest niezależne od tego, w krwi. Jej poziom znacznie wzrasta w różnych stanach związanych z zaburzeniami metabolizmu energetycznego - zapalenie opon mózgowych, zwłaszcza - spowodowane przez bakterie Gram-dodatnie, niedotlenienie mózgu flory i niektórych innych.

Chlorki w ługach

Chlorki - zawartość w normalnym ługu - 118-132 mmol / l. wzrost stężenia CSF zaobserwowano naruszenie ich usunięciu z organizmu( nerki, serca), w chorobach zwyrodnieniowych i nowotworów OUN.Obniżenie zawartości chlorków obserwuje się w przypadku zapalenia mózgu i zapalenia opon mózgowych.

Enzymy w trunkach

Alkohol charakteryzuje się niską aktywnością zawartych w nim enzymów. Modyfikacja aktywności enzymu w CSF w różnych chorób są zazwyczaj niespecyficzne i równoległe opisane zmiany we krwi u tych chorób( tabela 2).Inne podejście zasługuje interpretację zmian w aktywności fosfokinazy kreatyny( CPK).Ten enzym w tkankach trzech frakcji, które charakteryzują się nie tylko różnicami cząsteczkowej, ale również od charakteru dystrybucji w tkankach: CK-MB( mięśnia sercowego), CK-MM( mięśnie) CK-BB( mózg).Jeżeli całkowita aktywność CK w CSF ma podstawową wartość diagnostyczną( może być zwiększana, gdy nowotwór, udar mózgu, padaczka i inne choroby), frakcja CK-BB jest stosunkowo specyficznym markerem uszkodzonej tkanki mózgowej, a jej aktywność w CSF jest skorelowany ze skalą Glasgow. Numer

komórek i alkohol cytogram

w badaniu z płynów biologicznych i CSF tym zazwyczaj zliczyć liczbę komórek w cytogram i rozmazów barwionych azureozinom( Romanovsky-Giemsa Nocht, Pappenheima).Zliczanie elementów komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym( oznaczanie cytozy) wytworzoną za pomocą komory Fuchs-Rosenthala wstępnej hodowli to odczynnik Samson 10 razy. Użycie tego konkretnego barwnika, żadnego innego. Pozwala komórek do barwienia przez 15 minut, po czym komórki zachowują niezmieniony do 2 godzin. Numer

komórek przez komórki dzieli się przez 3 tak otrzymanego cytozy w 1 ul. Dla większej dokładności cytozy są rozważane w trzech komorach. Gdy Fuchs-Rosenthala brak komora Goryaeva aparat działa przez liczenie komórek w całej sieci, jak na trzy komory, to wynik jest mnożony przez 0,4.Do tej pory, nie ma rozbieżności w jednostkach liczby komórek - liczbę komórek w komorze na 1 mm lub 1 litra. Prawdopodobnie jest to jednak korzystne, aby wyrazić liczbę komórek w mikrolitrów cytoza. Aby obliczyć liczbę krwinek białych i czerwonych krwinek w płynie mózgowo-rdzeniowym może być zatrudniony i systemy zautomatyzowane. Zwiększona zawartość komórek

w CSF( pleocytoza) często pojawia się w leczeniu chorób zapalnych, w mniejszym stopniu - z podrażnieniem opon mózgowo-rdzeniowych. Najwybitniejszym pleocytoza widziana z zakażeniami bakteryjnymi, grzybiczymi uszkodzeń mózgu i gruźliczego zapalenia opon mózgowych. Epilepsji, pajęczynówki, wodogłowie, procesów zwyrodnieniowych, oraz innych chorób ośrodkowego układu liczby nerwowego komórek pozostaje normalnie.

wybarwionych komórek natywny PRZYGOTOWANIE REAGENTA Samson umożliwia wystarczająco niezawodnie zróżnicowanych komórek. Jednak bardziej dokładne jego cechy morfologiczne uzyskano po utrwaleniu i wybarwieniu preparatach cytologicznych wytworzone. Nowoczesne podejście do wytwarzania takich produktów wymaga użycia Cytospin. Jednak nawet w USA są wyposażone tylko w 55% laboratoriów. Dlatego w praktyce znacznie łatwiejszy sposób - osadzanie komórek na szkiełku. Narkotyki powinny być dobrze wysuszone w powietrzu, a następnie pomalowane.

W kolorowym preparacie liczenie komórek jest zliczane. Reprezentowane są głównie przez komórki krwi( zwykle - limfocytów i neutrofilów, co najmniej - monocyty, eozynofile, bazofile) może spełniać komórki plazmatyczne i maszt, makrofagi, ziarniste kulki( postać zwyrodnieniowe specjalny typ makrofagów - lipofagov w stanie otłuszczeniem), komórki arahnoendoteliya, epindimy, Morfologia tych elementów komórkowych są dobrze znane lekarzom i Badania laboratoryjne opisano szczegółowo w wielu podręcznikach. Poziom i rodzaj CSF cytogram pleocytoza pozwala określić charakter procesu chorobowego( tabela 3).

Neutrofilowa leukocytoza często towarzyszy ostrej infekcji( miejscowe i rozproszone zapalenie opon mózgowych).Eozynofilia CSF jest obserwowana dość rzadko - z bąblowicą mózgu, eozynofilowym zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych. Eozynofilia CSF nie koreluje, co do zasady, z liczbą eozynofilów we krwi. Limfocytowa pleocytoza płynu mózgowo-rdzeniowego występuje w wirusowym zapaleniu opon mózgowych, stwardnieniu rozsianym, w przewlekłej fazie gruźliczego zapalenia opon mózgowych, po operacjach na błonach mózgu. W procesach patologicznych od strony ośrodkowego układu nerwowego występuje polimorfizm limfocytów, wśród których są aktywowane. Charakteryzują się obecnością obfitej bladej cytoplazmy z pojedynczymi granulkami azurofilowymi, niektóre komórki mają ligaturę lub fragmentację cytoplazmy( clasmatosis).Komórki plazmatyczne pojawiają się w cytogramie w wirusowym lub bakteryjnym zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych, w powolnych procesach zapalnych, w okresie rekonwalescencji z kiły układu nerwowego. Monocyty wystawione na CSF w CSF są szybsze niż limfocyty, są obserwowane w stwardnieniu rozsianym, postępującym zapaleniu mózgu i rdzenia, przewlekłych procesach zapalnych o małej intensywności. Makrofagi - trunek "sanitari", pojawiają się z krwotokami, infekcjami, martwicą pourazową i niedokrwienną.

Czasami w CSF występują komórki atypowe - elementy, których w cechach morfologicznych nie można przypisać do pewnych form komórkowych. Nietypowe komórki znajdują się w przewlekłych procesach zapalnych( gruźlicze zapalenie opon mózgowych, stwardnienie rozsiane itp.) I często są to komórki nowotworowe. Prawdopodobieństwo znalezienia komórek nowotworowych w płynie mózgowo-rdzeniowym jest niewielkie( nie więcej niż 1,5%).Wykrywanie komórek blastycznych w CSF w hemoblastozie pozwala nam mówić o neurolemukemii.

Podczas analizy składu CSF ważne jest, aby ocenić stosunek białka i elementów komórkowych( dysocjacji).W dysocjacji komórkowej białek obserwuje się wyraźną pleocytozę z prawidłową lub nieznacznie zwiększoną zawartością białka. Jest to charakterystyczne dla zapalenia opon mózgowych. Dysocjacja Belkovokletochnaya charakteryzuje się hiperproteinarchią w prawidłowej cytozie. Ten stan jest typowy dla procesów stagnacyjnych w płynie mózgowo-rdzeniowym( nowotwór, zapalenie pajęczynówki, itp.).

Czasami sytuacje kliniczne wymagają zliczenia erytrocytów w krwawym płynie mózgowo-rdzeniowym( w celu zobiektywizowania objętości krwotoku).Liczenie czerwonych krwinek jest takie samo jak we krwi. Jak wskazano powyżej, kolor CSF jest zmienny, jeśli 1 μl zawiera więcej niż 500-600 czerwonych ciałek krwi, zauważalne zabarwienie pojawia się, gdy występuje około 2000, i staje się krwotoczne, gdy poziom erytrocytów jest wyższy niż 4000 / μl.

Badanie mikrobiologiczne CSF

Jedną z częstszych chorób OUN jest ropne zapalenie opon mózgowych. W takich przypadkach badania mikorykliczne stają się szczególnie istotne. Obejmuje test orientacji - bakterioskopię leków i techniki klasycznej kultury. Bakteriokopia płynu mózgowo-rdzeniowego ma ograniczoną wartość diagnostyczną, zwłaszcza w przypadku uzyskania wyraźnego CSF.Rozmaz przygotowany z osadu ługu otrzymanego przez odwirowanie sproszkowany jest błękitem metylenowym lub Gramem, chociaż niektórzy autorzy uważają, że ten ostatni wariant barwienia "urazi" jednorodne elementy i tworzy artefakty. W przypadku zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych i ropni stwierdza się zróżnicowaną florę, która odpowiada naturze choroby. Niezależnie od wyników mikroskopii, diagnoza bakteryjnego zapalenia opon mózgowych musi być koniecznie potwierdzona testem hodowlanym, który staje się wyznacznikiem diagnozy tej grupy chorób i wyboru odpowiedniej terapii. Jest prowadzone zgodnie z rozporządzeniem nr 375 Ministerstwa Zdrowia Federacji Rosyjskiej z 23.12.98 "w sprawie środków mających na celu wzmocnienie nadzoru epidemiologicznego i zapobieganie infekcji meningokokowej i ropne bakteryjne zapalenie opon mózgowych".Najczęstszą przyczyną bakteryjnego zapalenia opon mózgowych jest Gram-ujemny diplococcus Neisseria meningitidis, który w 80% przypadków można wykryć już za pomocą bakterioskopii.

Płyn CSF

Zwykle w CSF obecne są tylko limfocyty i monocyty. W przypadku różnych chorób i stanów patologicznych w płynie mózgowo-rdzeniowym mogą pojawiać się inne typy komórek.

Limfocyty są podobne do czerwonych krwinek. Limfocyty mają duże jądro i wąski, niemalowany brzeg cytoplazmy. Zwykle płyn zawiera 8-10 komórek limfocytów. Ich liczba rośnie wraz z guzami centralnego układu nerwowego. Limfocyty znajdują się w przewlekłych procesach zapalnych w błonach( gruźlicze zapalenie opon mózgowych, zapalenie opon mózgowych wągrzyca).

Komórki plazmatyczne w ługu. Komórki większe niż limfocyty dużych jądrach, usytuowany mimośrodowo, duża ilość cytoplazmy przy stosunkowo małej ilości( rozmiarów jąder komórkowych - 6,12 mm).Komórki plazmatyczne w CSF stwierdzono tylko w patologicznych przypadkach, czas obecnych procesów zapalnych w mózgu i błon z mózgu, gruźlicze zapalenie opon mózgowych, zapalenie pajęczynówki tsistitserkoznom i innych chorób, w okresie pooperacyjnym, kiedy powolnego gojenia ran.

Monocyty tkankowe w alkoholu. Wielkość komórek wynosi od 7 do 10 μm. W normalnym płynie, czasami mogą występować w postaci pojedynczych próbek. Monocyty znajdują się w płynie mózgowo-rdzeniowym po zabiegu na ośrodkowy układ nerwowy, z aktualnymi długich procesów zapalnych w muszli. Obecność monocytów tkankowych sugeruje aktywną reakcję tkanki i normalne gojenie się rany.

Makrofagi w alkoholu. Mogą mieć rdzenie o różnych kształtach, zazwyczaj znajduje się na peryferiach cytoplazmie komórek rdzeń zawiera wakuole i wtrącenia. W normalnym trunku nie znaleziono makrofagów. Obecność makrofagów z normalną liczbą komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym obserwuje się po krwawieniu lub w procesie zapalnym. Z reguły występują one w okresie pooperacyjnym, który ma wartość prognostyczną i mówi o aktywnym oczyszczaniu CSF.

Ziarniste kulki w alkoholu. Komórki z infiltracją tłuszczową - makrofagi z obecnością kropli tłuszczu w cytoplazmie. W preparatach z barwnymi alkoholami komórki mają małe obwodowo umiejscowione jądro i dużą cytoplazmę komórkową.Wielkość komórek jest różna i zależy od uwzględnionych kropel tłuszczu. Kulki ziarniste znajdują się w patologicznym płynie uzyskanym z torbieli mózgu w ogniskach zaniku tkanki mózgowej, z guzami.

Neutrofile w roztworze alkoholowym. W komorze neutrofile krwi obwodowej mają identyczny wygląd. Obecność neutrofili w płynie mózgowo-rdzeniowym, nawet w minimalnych ilościach, wskazuje na istniejącą lub istniejącą reakcję zapalną.Obecność zmienionych neutrofili wskazuje na osłabienie procesu zapalnego.

Eozynofile w alkoholach. Oznaczyć w płynie mózgowo-rdzeniowym jednolitą, błyszczącą ziarnistość.Eozynofile wystąpić krwotok podpajęczynówkowy, gruźlicę, zapalenie opon mózgowych i syfilitycznych guzów mózgu.

Komórki nabłonkowe w CSF.Komórki nabłonkowe, które ograniczają przestrzeń podpajęczynówkową, występują dość rzadko w płynie mózgowo-rdzeniowym. Są to duże okrągłe komórki z małymi okrągłymi lub owalnymi rdzeniami. Odkryty przez nowotwory, czasami z procesami zapalnymi.

Komórki guza i kompleksy w płynie mózgowo-rdzeniowym. Znajdują się w komórce i barwnym preparacie z alkoholem. Złośliwe komórki mogą odnosić się do następujących typów nowotworów:

• rdzeniakowłókniak;
• spongioblastoma;Gwiaździak
• ;Rak
• .

Kryształy w alkoholu. Występują w płynie mózgowo-rdzeniowym rzadko, w przypadku rozpadu guza.

elementy Echinococcus w likvore- haki scolexes, chitynę fragmentów powłoki - w płynie mózgowo-rdzeniowym, są rzadkie.

PCR diagnostyki

CSF W ostatnich latach pewną nadzieję w etiologicznych Neuroinfekcji diagnostyczne związane z rozwojem technik genetycznych, molekularnych do wykrywania kwasów nukleinowych z czynników zakaźnych, w płynie mózgowo-rdzeniowym( diagnostyka PCR).

Zatem płyn mózgowo-rdzeniowy jest środowiskiem, które reaguje wyraźnie na procesy patologiczne w ośrodkowym układzie nerwowym. Głębokość i charakter jego zmiany są spowodowane głębokości zaburzeń patofizjologicznych. Prawidłowe laboratorium ocena liquorologic objawów pomaga wyjaśnić diagnozy i oceny skuteczności leczenia.

V.V.Bazarski profesor UGMA, zastępca naczelnego lekarza OKB numer 1