Bakterioskopi av sputum
Tidlig identifisering av et smittsomt middel er svært viktig for det riktige valget av et antibakterielt middel for å forhindre utvikling av bakteriell resistens under empirisk administrering av et antibiotikum. Gramfarging er den vanligste metoden for farging av alle typer materiale oppnådd fra en pasient( sputum, bronkialveolær spyling, etc.) for rask og indikativ etablering av et smittsomt middel.
En sputumfarge farget med Gram stain er brukt til å foreta en foreløpig vurdering av et mulig etiologisk middel. Gramfarget smørsputum undersøkes før såing på næringsmedia også for å vurdere egnetheten for dyrking og identifikasjon av et sannsynlig patogen. Sputum anses hensiktsmessig dersom et smear farget av Gram med en liten økning i mikroskopet avslører mer enn 25 leukocytter og mindre enn 10 epitelceller i synsfeltet. Tegn på en kvalitet sputumprøve som kan brukes til dyrking er forekomsten av leukocytter over epitelceller i den, samt forekomsten av bakterier av en art som befinner seg inne eller rundt leukocytene. Gram-positive bakterier i preparatet har en mørkblå farge, gram-negativ - i rosa. De forårsakende midlene av atypisk lungebetennelse( mykoplasma, legionella, rickettsia og klamydia) er ikke farget av Gram, derfor brukes serologiske metoder for å påvise dem.
Sputumutslipp ifølge Tsiol-Nielsen brukes til å identifisere syrefaste baciller, hovedsakelig mycobacterium tuberculosis. Preparatet fremstilles fra purulente sputumpartikler, som er valgt fra 4-6 forskjellige steder. De valgte partiklene blir forsiktig triturated mellom 2 lysbilder til en homogen masse, tørket i luft, festet over brennens flamme. Mycobacterium tuberculosis er farget rødt, alle andre sputum og bakterier i blått. Mycobacterium tuberculosis har utseendet på tynne, svakt buede pinner av forskjellige lengder, med fortykkelse i enden eller i midten, arrangeres i grupper og enkeltvis. Påvisning av Mycobacterium tuberculosis er det mest pålitelige tegn på tuberkulose lesjoner i lungene. Metoden for å fargelegge smør ifølge Tsiol-Nielsen med aktive former for lungetuberkulose har en følsomhet på 50% og en spesifisitet på 80-85%.