Immunofenotypering van hemoblastoses

aanzienlijke vooruitgang in hematologische studies geassocieerd in de afgelopen jaren met het gebruik van moderne immunologische methoden en geautomatiseerde tools voor het analyseren en sorteren van cellen van het perifere bloed en beenmerg - flowcytometers. Traditionele morfologische en cytochemische studie van het substraat cel ziekte( bloed, rode beenmerg, lymfeklieren, milt, enz.), In veel gevallen, vooral in lymfoproliferatieve ziekten, niet onthullen de hele verscheidenheid aan opties onder morfologisch soortgelijke vormen en identificeren van de oorsprong van de pathologische kloon. Deze problemen kunnen alleen worden opgelost door de immunologische kenmerken van cellen te bestuderen. Elke fase van differentiatie hemo-poëtische cel heeft zijn eigen set van Ar, die een beroep op de internationale classificatie van differentiatie en differentiatie zijn onderverdeeld in clusters, aangeduid met CD.In blok differentiatie van neoplastische veranderingen optreden in elk stadium van de normale celontwikkeling, wat resulteert in een pathologische celkloon definiëren substraat ziekte en dezelfde immunologische( of fenotypische) kenmerk. Na studie van deze merkers in cellen kan bepaald worden met elke vorm of uitvoeringsvorm van de ziekte consistente, d.w.z. op basis van immunologische celfenotype differentiële diagnose, het moeilijkste lymfoproliferatieve aandoeningen, omdat de belangrijkste celsubstraat pathologische aandoeningen zijn bijna hetzelfde type cellen morfologisch. Fenotypering maakt gebruik van monoklonale antilichamen gekarakteriseerd blastische en rijpe myeloïde bloedcellen, mono-, lymfocytische serie in aanwezigheid van differentiatie gestorte Ar( receptoren) in de celwand. Op de membranen van bloedcellen en rood beenmerg kunnen de volgende Ar( markers) worden geïdentificeerd.

■ CD2 is een monomeer transmembraan glycoproteïne. Het is aanwezig op het oppervlak van alle circulerende T-lymfocyten en sommige NK-lymfocyten. CD2 neemt deel aan het proces van alternatieve activering van T-lymfocyten. Opsporing via CD2 monoklonale antilichamen gebruikt in de klinische praktijk Fenaughty feesten acute T-cel leukemie, lymfoom, chronische inflammatoire en immunodeficiëntie aandoeningen.

■ CD3 - een eiwitcomplex geassocieerd met de Ar-specifieke T-celreceptor, dit is de belangrijkste functionele marker van T-lymfocyten. Het vergemakkelijkt de overdracht van het activeringssignaal van het

-membraan naar het cytoplasma van de cel. Bepaling van CD3 geïndiceerd voor de diagnose van acute T-cel leukemie, lymfomen( CD3 niet tot expressie gebracht in niet-T-cel lymfoïde neoplasmata) en immuundeficiëntie-tie.

■ CD4 - transmembraan glycoproteïne met een subset van T-helper( spoelen) die 45% van perifere bloedlymfocyten uitgedrukt. In de vroege stadia van ontwikkeling van lymfocyten in de thymus, wordt Ar CD4, evenals CD8, tot expressie gebracht door alle corticale lymfocyten. Medullaire thymocyten, die vergelijkbaar is met het fenotype van rijpe CD4 + perifere T-cellen( T helper cellen), expressie-ruyut ofwel CD4 of CD8-receptoren. In perifeer bloed worden tot 5% van de cellen tegelijkertijd gemerkt als CD4 en CD8.Lichte expressie van CD4 is mogelijk op sommige monocytcellen. CD4 tot expressie in de meeste gevallen, T-cellymfoom, zoals mycosis fungoides, en HTLV-geassocieerde T-cel leukemie( HTLV - human T-lymphotropic virus - T lim-fotropny humaan virus).

■ CD5 - enkele keten glycoproteïne dat aanwezig is op alle rijpe T-lymfocyten en de meeste thymocyten wordt zwak tot expressie gebracht door B- lymfocyten. CD5 wordt gedetecteerd op neoplastische cellen van B-cel chronische lymfocytische leukemie en centrocytische lymfoom. Bij andere vormen van kwaadaardige lymfoïde ziekten - folliculair lymfoom, haarcelleukemie, grootcellig lymfoom - wordt CD5 niet tot expressie gebracht.

■ CD7 is een enkelstrengs eiwit, de vroegste marker van T-celdifferentiatie. Het wordt tot expressie gebracht door pro-T-lymfocyten zelfs voordat ze migreren naar de thymus. CD7 wordt gedetecteerd op de meeste NK-cellen, zwakke expressie wordt genoteerd op monocyten. B-lymfocyten en granulocyten bevatten deze Ag niet. De definitie van CD7 wordt gebruikt voor de diagnose van lymfomen, T-cel lymfoblastische leukemie bij kinderen.

■ CD8 is een eiwit dat bestaat uit twee polypeptideketens verbonden door disulfidebruggen. Het wordt uitgedrukt door een subpopulatie van cytotoxische en suppressor-T-lymfocyten, die 20-35% van perifere bloedlymfocyten omvatten. Deze Ar heeft ook NK-lymfocyten, corticale thymocyten, 30% medullaire thymocyten en een subpopulatie van rode beenmergcellen. CD8 werd getest om het gehalte aan

T-suppressors te kwantificeren

■ CD 10 - geassocieerd met het celmembraan van endopeptidase. CD10 brengt jonge vormen van B-lymfocyten tot expressie en een subpopulatie van corticale lymfocyten. CD10 brengt alle cellen van ALL tot expressie.

■ uiten CD11c op het celmembraan van macrofagen, monocyten, granulocyten, NK-cellen en haarcelleukemie.

■ CD13 - glycoproteïne tot expressie gebracht door cellen mielomonotsitar poot series( progenitorcellen, neutrofielen, basofielen, eosine-phylum, monocyten en cellen van myeloïde leukemie).Het is afwezig in T. B-lymfocyten, erytrocyten en bloedplaatjes.

■ CD14 - glycoproteïne aan het oppervlakmembraan. Het wordt voornamelijk tot expressie gebracht door monocyten en macrofagen. CD14 wordt bepaald door meer dan 95% van de perifere bloed- en beenmergmonocyten op

.Sterke expressie van CD14 wordt waargenomen bij acute myeloblastische leukemie. Bij acute en chronische lymfoblastische leukemie komt deze Ar niet tot expressie.

■ CD15 is een oligosaccharide. Hij neemt deel aan de processen van fagocytose en chemotaxis. Deze Ar is aanwezig op het oppervlak van rijpe granulocyten en Berezovsky-Sternberg-cellen. Expressie van Ar CD15 wordt gedetecteerd in de ziekte van Hodgkin. In lim-fomas van non-Hodgkin wordt CD15 in de meeste gevallen niet gedetecteerd.

■ CD16 komt tot expressie op het oppervlak van granulocyten, monocyten, macrofagen en NK-cellen. Alle lymfocyten die deze Ar tot expressie brengen, hebben het vermogen tot antilichaamafhankelijke celcytotoxiciteit. CD16 wordt bepaald bij het typen van chronische myelocytische leukemiesoorten om NK-cellen te karakteriseren.

■ CD 19 is een glycoproteïne dat aanwezig is op alle perifere B-lymfocyten, evenals op alle voorlopercellen van B-cellen. Het is afwezig op plasmacellen. Dit is de vroegste marker van B-cellen, speelt een belangrijke rol bij het reguleren van de activatie en proliferatie van B-lymfocyten. CD19 wordt tot expressie gebracht op alle neoplastische cellen van acute leukemie van B-celoorsprong en is ook aanwezig in sommige vormen van acute monoblastleukemie.

■ CD20 is een niet-geglycosyleerd eiwit. De B-lymfocyten ontogenie Ar CD20 CD19 wordt na de stap van pre-B-cellen differentiële tsirovki lymfocyten. Het is afwezig op het plasmamembraan van plasmacellen. Uitgedrukt in ALL, chronische lymfatische leukemie, haarcelleukemie, Burkitt Lim fomah en zeldzame - acute leukemie monoblastny.

■ CD21 - glycoproteïne, in een groot aantal aanwezig is op B-lymfocyten in de lymfoïde organen en in kleine hoeveelheden - op B-cellen van perifeer bloed. CD21 is een receptor voor het Epna-Stein-Barr-virus.

■ CD22 is een eiwit dat bestaat uit twee polypeptideketens. Het wordt tot expressie gebracht op het membraan van de meeste B-lymfocyten, waaronder progenitorcellen( prolymfocyten).Ar wordt niet tot expressie gebracht op B-lymfocyten( plasmacellen) na activering. De meest uitgesproken expressie van CD22 wordt gedetecteerd op cellen met haarfollikel-accurate leukemie, zwak - in myeloïde leukemieën en niet-T-cel ALL.

■ CD23 is een glycoproteïne dat in veel grotere mate tot expressie wordt gebracht door geactiveerde B-limfocyten van perifeer bloed. CD23 medieert IgE-afhankelijke cytotoxiciteit en fagocytose door macrofagen en eosinofielen.

■ CD25 is een glycoproteïne met een enkele keten, geïdentificeerd als een receptor met lage affiniteit voor IL-2.Deze receptor wordt tot expressie gebracht op geactiveerde T-lymfocyten en, bij een lagere dichtheid, op geactiveerde B-cellen. In het perifere bloed van gezonde mensen is Ar aanwezig in meer dan 5% van de lymfoïde cellen.

■ CD29 - Fibronectinereceptor. Het wordt wijd verspreid in weefsels, het wordt tot expressie gebracht door leukocyten. Bepaling van CD29-cellen in peri-

fericheskoy bloed voor het typen van een subgroep van T-hechtmiddel stroom met het fenotype van CD4 + CD29 +, heten helper type 2( Th2).Deze cellen nemen, door de productie van lymfokinen, deel aan de realisatie van de humorale immuunrespons.

■ CD33 - transmembraan glycoproteïne. Het is aanwezig op het oppervlak van cellen van de myeloïde en monocytenreeks. Het wordt gevonden op het oppervlak van monocyten en, in mindere mate, granulocyten van perifeer bloed. Ongeveer 30% van de rode beenmergcellen brengen CD33 tot expressie, waaronder myeloblasten, promyelocyten en myelocyten. Ar is afwezig op membranen van polypotente stamcellen. CD33 wordt gebruikt om cellen in myeloïde leukemieën te karakteriseren. Leukemiecellen van lymfoïde en erytroïde oorsprong brengen CD33 niet tot expressie.

■ CD34 - fosfoglycoproteïne, uitgedrukt in hematopoietische stamcellen, met inbegrip van stamcellen monopotentnye. De meest uitgesproken expressie van Ar wordt waargenomen in vroege voorlopers;wanneer de cellen volwassen worden, valt de uitdrukking van de marker terug. CD34 wordt ook gevonden op endotheelcellen. CD34 wordt gebruikt om cellen te karakteriseren in acute myelogene en lymfatische leukemie. Met chronische lymfatische leukemie en lim-phoma-expressie wordt Ar CD34 niet gedetecteerd.

■ CD41a wordt uitgedrukt door bloedplaatjes en megakaryocyten. Monoklonale antilichamen voor de detectie van CD41a worden gebruikt voor het diagnosticeren van megakaryoblastische leukemie. Bij Glązmann-trombasthenie is de expressie van deze Ar afwezig of significant onderdrukt.

■ CD42b is een membraanglycoproteïne bestaande uit twee polypeptideketens. De marker bevindt zich op het oppervlak van bloedplaatjes en megakaryocyten. In de klinische praktijk CD42b detectie voor diagnostisch gebruik trombocytopathie - syndroom, Bernard-Soulier.

■ CD45RA behoort tot de klasse van transmembraan glycoproteïnen. Dit is een gewone leukocyt Ag. Tot expressie gebracht op het celmembraan van B-lymfocyten in mindere mate T-lymfocyten en rijpe medullaire thymocyten. De marker wordt niet tot expressie gebracht door granulocyten.

■ CD45RO - laagmoleculaire isovorm van CD45RA moleculaire - totale leukocyte Ag. Identificeren van de T-cel( memory T-cellen) subpopulaties van B-lymfocyten, monocyten en macrofagen. Monoklonale antilichamen tegen interactie met de meeste thymocyten CD45RO subpopulatie van rustende CD4 + en CD8 + T-lymfocyten en rijpe geactiveerde T-cellen. Cellen van myelomonocytische oorsprong, granulocyten en monocyten dragen ook deze Ag. Het wordt gedetecteerd met prenatale en immunoblastische lymfomen.

■ CD46 - O-geglycosileerde dimeer. Het is wijd verspreid in weefsels en expressie T- en B-lymfocyten, monocyten, gra-nulotsitami NK-cellen, bloedplaatjes, endotheelcellen, fibroblasten, maar afwezig op het oppervlak van erythrocyten. CD46 biedt weefselbescherming tegen complementactie.

■ CD61 - bloedplaatjes Ag. Het wordt tot expressie gebracht op bloedplaatjes, perifeer bloed en beenmerg, en op de megakaryocyten minuten en megakaryoblasten. De definitie wordt gebruikt als een kenmerk van

ra voor acute megakaryoblastische leukemie. Expressie van Ar is afwezig of onderdrukt bij patiënten met Glanzmann-trombastenie.

■ CD95, ook bekend als Fas of APO-1, - Gly-transmembraan koprotein, familielid van tumornecrosefactor receptoren. Het wordt uitgedrukt in significante hoeveelheden in de T-lymfocyten( CD4 + en CD8 +) perifeer bloed en, in mindere mate, B-lymfocyten en NK-cellen. Deze Ar wordt ook tot expressie gebracht op granulocyten, monocyten, weefselcellen en neoplastische cellen. Binding van CD95 aan het Fas-ligand( CD95L) induceert apoptose in de cellen.

■ CD95L of Fas-ligand, een membraaneiwit behoort tot de familie van tumornecrosefactor receptoren. Dit uit Ar cytotoxische T-lymfocyten, NK-cellen en tumorcellen vaak;de belangrijkste inductor van apoptose in cellen.

■ HLA-DR - monomorfe klasse II determinant moleculen MHC man( HLA).Etsya marker wordt uitgedrukt op Langerhans-cellen, dendritische cellen van lymfoïde organen, en bepaalde vormen van macrofagen, B-lymfocyten, geactiveerde T-cellen en thymus epitheelcellen. Bestudeer actief marker gebruikt om de geactiveerde T-lymfocyten te kwantificeren met een fenotype CD3 + HLA-DR +.

met verschillende monoklonale antilichamen voor de selectie marker kan portret cellen fenotypisch kenmerk van deze vorm van leukemie( tabel A-7-30) te creëren.

Naast het gebruik immunofenotypering technieken voor diagnose en differentiële diagnose van hematologische maligniteiten, vooral van belang keerde hun toepassing bij het behandelingsproces om de toestand van remissie en restantpopulatie leukemische cellen te beoordelen. Het kennen van de fenotypische "portret" van blast cellen in de periode van de diagnose, deze markeringen kan cel leukemische kloon in remissie te vinden, en door de toename van het aantal - voor de ontwikkeling van terugval lang( voor 1-4 maanden) te voorspellen totdat de klinische en morfologische kenmerken.

Tabel immuunfenotypische karakterisering van leukemie [Myers A. R., 1996]

Table immuunfenotypische karakterisering van leukemie [Myers A. R., 1996]

Table immunofenotype ALL [Rich R. R. 2001]

Table immunofenotype ALL [Rich R. R. 2001]

End Table.

Einde van de tabel.

Opmerking: cig q - cytoplasmatische Ig c-keten;sig q is een oppervlakte-Ig en een keten.