Imūnanzīmu analīze( IVN) - Cēloņi, simptomi un ārstēšana. MF.

imunosorbences testa( ELISA) - modernas laboratorijas izmeklēšanas, kuras laikā meklēšanas tiek specifiskas antivielas vai antigēnus asinīs uz konkrētām slimībām, lai noteiktu ne tikai etioloģiju, bet arī posmā slimību. ELISA rezultātus var iegūt kvalitatīvi un kvantitatīvi.

Šobrīd IVN tiek piemērota šādos gadījumos:

1) Meklēt īpašas antivielas pret jebkuru infekcijas slimību,
2) search antigēni jebkuru slimības( infekcijas slimības, venērisko);
3) pacienta hormonālā stāvokļa pārbaude;
4) pārbaude onkomarķeriem;
5) autoimūno slimību klātbūtnes pārbaude. Priekšrocības

ELISA metode:

1) augsts specifika un jutība ELISA( virs 90%).
2) Spēja noteikt un kontrolēt slimības procesu dinamiku, t.i., salīdzinot daudzumu antivielu dažādiem laika intervāliem.
3) ELISA diagnostikas pieejamība jebkurā medicīnas iestādē.Relatīvais trūkums

:

1) Detection imūnās atbildes reakcijas( antivielas), bet ne patogēna.

jēdzieni

Pirms noskaidrot būtību ELISA metodes, īsumā ir saprast dažus jēdzienus.

Antivielas( vai imūnglobulīnus - Ig) - īpašas olbaltumvielas, ko ražo ar B -
limfocīti( imūnās šūnas), atbildot uz ievedot ķermeņa infekcijas izraisītāja( vīrusa, baktērijas, sēnītes uc).Izdalīt imūnglobulīna( IgA), imūnglobulīna E( IgE), imūnglobulīna M( IgM), imūnglobulīnu G( IgG), imūnglobulīna D( IgD).Tie atšķiras viens no otra un veido molekulārā masa pusi mūža līdzdalība / nonparticipation in infekcijas procesu, noteikt laiku no brīža, kad infekciju. Ja mēs uzskatām, molekulmasa, pats viņš ir IgM - ir pentamer( 950000 Da), atšķirībā no pārējās Ig( no 150 līdz 200 000 Da), lai IgM vienkārši nevar iziet caur placentāro barjeru. Tāpēc atklāšana IgM pēc bērna 1 gada dzīves vienmēr ir pazīme infekcijas auglim. No imunoglobulīnu daudzumu serumā lielākā daļa tiek pārstāvēta IgG( 75-85%), bet zemākais - IgE( 0,003%).Infekciozo procesā tieši iesaistīts ņemot vērā tikai IgA, M, G. IgE ir pazīme alerģiskas reakcijas un nosacījumiem un IgD - var noteikt tikai limfmezglu un mandeļu audiem, spēlē lomu veidošanās vietējo imunitāti.

klases imūnglobulīnu

Antiaens - lielu molekulmasu, organisko vielu, īpaši infekcijas patogēniem un citām slimībām, kā arī dažādas vielas modificētas šūnas, kas ražoti doto slimību( autoimūno slimību, vēža).

imūnkompleksu - antigēnu antiviela iesaistīts imūnās procesā.Kāda ir IFA metode?

vairāki konkrēti ELISA varietātes( tiešā, bloķējot metode Konkurenti), bet praksē visbiežāk izmanto neviendabīgu enzīmu imunoloģisko vai ELISA( enzīmu imūnosorbcijas tests)

pamats no imunoloģisko imūnās reakcijas antigēna un antivielas, lai veidotu imūnkompleksu: antigēnubispecifiskas antivielas, kuras rezultātā mainās no fermentatīvo aktivitāti specifisku atzīmēm uz antivielu virsmas. Metode

ELISA

Vienkāršiem vārdiem sakot, šis process var iedalīt vairākos posmos:

1) uz virsmas ārsta bedrīšu plates, pārbaudītājs ir attīrīts antigēns specifisku patogēnu. Kad pievienojot bioloģisko materiālu( asins serums) no pacienta īpašo reakciju notiek starp antigēnu un vēlamo antivielu( imūnglobulīna).Nākamajā posmā šis savienojums darbosies kā "īpašs antigēns".

2) Šajā posmā veidošanās ir IR( imūnkompleksu) - reakcija starp "specifiskā antigēna" un konjugāta( šis imūnglobulīns apzīmēts ar fermenta peroksidāzes).Pievienots īpašs hromogēns.Šīs fermentatīvā reakcijā rezultāts ir veidošanās krāsainām vielām akās uz plates, krāsas intensitāte, kas ir atkarīga no tā, cik pacientu imūnglobulīnu( antivielas) ietverto materiālu.

3) Turklāt jāņem interpretācija: fotometrija izmantojot daudzkanālu spektrofotometru salīdzinot optisko blīvumu testa materiāla ar optisko blīvumu kontroles paraugu, matemātiskās apstrādes rezultātus. Antivielas daudzums pacientam ir atkarīgs no augstuma optiskajam blīvumam padziļinājumiem.

ierasta prakse, lai izmantotu 96 labi plāksnes.

summa( vai koncentrācija) antivielu konkrētā tilpuma vienībā, mērot optisko blīvumu( OB) parauga šķidruma tiek aprēķināta. Tad rezultātu salīdzina ar kontroles paraugu.

ir jāatceras: katrai testa sistēma, kas izstrādāta, lai ņemtu vērā individuālās darbības rezultātus, izpildes standartiem un patoloģija( piemēram, "atsauces vērtības").Tas būtu jāņem vērā, novērtējot katra gadījuma pētījuma rezultāti. Pareizi interpretēt kādas "atsauces vērtības" citā laboratorijā laboratorijas rezultāti. Tas ir arī pareizi salīdzināt rezultātus dažādās laboratorijās kopā.Nosakot

ELISA reakciju, un ir tādas vērtības, jēdzienu kā antivielu aktivitātes salīdzināmā standarta preparātu. Aviditātes
antiviela - šī antiviela antigēnu saistošais spēks un apmērs antigēna, kas atrodas mijiedarbībā ar immnoglobulinami( antivielas).Kāre ir liela nozīme, novērtējot iespējamo infekciju uz termiņu, kas ir ļoti svarīga diagnostikā primārās infekcijas grūtniecēm.

Basis antiviela aviditātes tests sastāv no ārstēšanas imūnkompleksu( antigēnu-antivielu) urīnvielas šķīduma, lai iznīcinātu proteīnu. Vysokoavidnye saites paliek neskarts, un zemu alkatība iznīcina. Rezultāts ir dots kā alkatība indekss, izteikts procentos( %).

Kādas slimības diagnosticē ar IFA diagnostiku?

1. Infekcijas slimības
1.1 Vīrusu hepatīta A( IgM, G), B antigēni -HBsAg HBeAg, antivielu - IgM HBcorAg, Ig kopējo HBcorAg, IgG HBeAg), C( antivielas Ig M, G HCV), D( IgM,G), E( IgM, G) un citi.
1.2 HIV infekcija( IgG)
1.3 citomegalovīrusu infekcijas( antivielas IgM, G)
1.4 Epšteina-Barra infekcija vai mononkleoz( antiviela IgM, G EA, VCA, NA proteīniem vīrusa)
1.5 herpes infekcijas( antiviela IgM, G)
1.6 Toksiplazmoze( antiviela IgM, G)
1.7 Masaliņas( IgM, G)
1.8 Masalas( IgM, G), bruceloze( IgM, G), pseudotuberculosis( IgM, G), salmonelozes( IgM, G), Šigelozes vai dizentērija(IgM, G), aspergilloze( IgM, G), ērču encefalīts, boreliozi, un daudzi citi.
1.9 parasitosis( giardiasis, toxocariasis, trihinoze, opistorhoz, ehinokokozi, alveococcosis un citi), kurā konstatēta IgG
1.10 STD( seksuāli transmisīvajām slimībām caur) - mikoplazmozes( IgM, G), Ureaplasmosis( IgM, G), Chlamydia( IgA, M, G), sifilisa( IgG)
1.11 Helicobacter infekcija( IgG)

2. Markers autoimūnas slimības un cilvēka imunitāti indeksu ( kopējais IgE, kopējais IgG, kopējais IgA, kopējais IgM, kopējais IgD, Sekretorais IgA, IgG 2, IgG4, CRC cirkulējošo imūno kompleksu, IgA un IgG antivielas pret gliadin un citi)

3. Onkologichsekie marķieri ( FNPar - audzēja nekrozes faktora, CEA - karcinoembriotiskais antigēni, PSA - prostatas specifiskā antigēna, hCG - cilvēka horiongonadotropīna, CA 125, alveomutsin un daudzi citi)

4. Reproduktīvo spēju traucējumi I( estradiols, progesterons, prolaktīna, testosterons, AFP AFP-FSH - folikulus stimulējošais hormons un citi)

5. slimības vairogdziedzera( free un uzlikto T3, T4 tireoglobulīna, vairogdziedzera peroksidāzi - TPO, vairogdziedzera stimulējošais hormons - TTG).

Šis saraksts ir ne visas slimības ir diagnosticētas ar ELISA.

materiāla ELISA analīzes un noteikumu žogs

visbiežāk materiālu ELISA reakcijas - pacienta serumā, tukšā dūšā.Materiāls var arī kalpot kā cerebrospinālajā šķidrumā, amnija šķidrumu, stiklķermeņa saturu, gļotas no dzemdes kakla kanāla un urīnizvadkanāla tamponi.

sagatavošana pacienti par piegādi materiāla IFA

asinis tukšā dūšā.Pirms ziedot asinis, jums nav jālieto kādi medikamenti.Īpaša apstrāde( antibakteriāla, pretvīrusu, pretparazītu, un tā tālāk), ir jāpārtrauc vismaz 2 nedēļas pirms pētījuma.

ražošanas IFA Datumi

Enzīmu imunoloģiskais tests tiek veikts ātri, dienas laikā.Kavēšanās var būt dažādās laboratorijās sakarā ar noteiktu daudzumu seruma uzkrāšanos. Iespējamie rezultāti

ELISA diagnostikas

Izvērtējot rezultātus par konkrētu infekciju ir svarīgs klases antivielas konstatētas un to skaitu. Tas ietekmē ne tikai jautājumu par etioloģijā infekcijas( ti, vai ne), bet paredzamais slimības stadijā( akūtu un hronisku), kā arī piedaloties aktīvās infekcijas( akūta vai hronisku) laikā aptaujas.

Kādi ir aptuvenie antivielu( imūnglobulīnu-Ig) izskats?

. Agrīnākās antivielas ir IgM .To identificēšana var būt 1-3 nedēļas pēc iespējamas infekcijas, kas raksturo infekcijas procesa akūtu fāzi. Otra situācija ar IgM antivielu parādīšanos ir hroniskā procesa aktivācija( vai paasinājums).IgM antivielas cirkulē vidēji apmēram 3 mēnešus, tad to skaits pakāpeniski pazūd. Tomēr dažiem pacientiem IgM nelielos daudzumus var konstatēt 1-2 gadu laikā no infekcijas brīža.

Mūsdienu pārbaudes sistēmas ir ļoti jutīgas, kā rezultātā rodas nespecifiski viltus pozitīvi rezultāti( bieži grūtniecēm).Tādēļ šajā pacientu grupā pozitīvs IgM ir jāpārbauda vēlreiz!

IgA antivielas parādās 2-4 nedēļas pēc inficēšanās, bet pietiekamā daudzumā noteikšanai - mēnesī.Serum IgA sintezēts plazmas šūnu liesas, limfmezglu un gļotādu sekretoru IgA koncentrēta uz gļotādām, lai veiktu savu aizsargājošo funkciju - iesaistīts vietējā imunitāti.

No 4. nedēļas pēc inficēšanās sāk parādīties antivielas IgG .Lielākajā daļā infekciju to titrs pakāpeniski palielinās ar maksimumu dažādos laikos( vidēji pēc 1,5-2 mēnešiem), tad titrs paliek zemā līmenī un norāda uz imunitāti. Dažās slimībām( mikoplazmoze, hlamīdijas, trihomonoze) IgG līmenis nav augsts, ir ievērojami samazināts, jo nav imunitātes šo infekciju. Realizētā

atklāj antivielas dažādu klašu:

- isolated IgM antivielas, paredz
primāro infekciju.
- vienlaicīga noteikšana asins IgM un IgG raksturīgu
primārās infekcijas iepriekšējos 2-3 mēnešu laikā, kā arī par hronisku slimību. Tāpēc grūtniecības laikā IgM klātbūtne ne vienmēr ir primārās infekcijas pazīme.
- Izolēta IgG noteikšana var norādīt gan uz slimības imunitāti, gan par
un hronisku infekciju. Otrajā situācijā svarīgs ir arī antivielu skaits( titrs), un šī titra izmaiņas ir dinamikā.Parasti pētījumus veic 2-4-6 nedēļu intervālos.
- Izdalītās IgA vai IgM noteikšana norāda uz primāro infekciju. Ar
sagaidāma IgA un IgG izpausme, lai aktivētu hronisku infekciju( vidēji 2 nedēļas pēc saasināšanās).

Definīcija kāre IgG antivielu ir lielisks papildinājums diagnostikas posmu primārās infekcijas no ilgstošajai infekcijas, kas ir tā klīniskā nozīme, jo īpaši, izvērtējot risku intrauterīnā infekcijas auglim. Par zemu kāre IgG noteikšana norāda primāro infekciju un nosaka vidējo pēc 4-6 mēnešu laikā pēc inficēšanās, reti ilgāk. Mazās devas IgG ir nepieciešamas citas laboratoriskas primārās infekcijas( IgM).Augstas antivielas ir vai nu hroniskas slimības pazīmes, tā pasliktināšanās vai formas imunitāte.

īpaši zīdaiņiem: bērniem līdz viena gada, un dažreiz pat 1,5 gadus asinīs cirkulē mātes IgG antivielas pret dažādām infekcijām( ti, tur bija to izplatība caur placentu no mātes uz embriju in utero).Tas pats par sevi nav infekcijas pazīme mūsdienās. Ja vecumā takjm konstatēts IgM( atgādinām, ka mātes IgM šķērso placentu nevar), tā ir pazīme infekcijas vai kas iegūta pēc piedzimšanas dzemdē inficēšanās.

kvantitatīvā ELISA metode

ELISA diagnostikas rezultāti( izmantojot enzīmu imunoloģisko analizatoru) tiek izdots īpašos vienībām:
- optiskais blīvums( OD) parauga - koncentrācijas specifisku antivielu vienā tilpuma vienībā.Jo augstāks ir OP paraugs, jo lielāka antivielu koncentrācija. Daži rezultāti attiecas uz pozitīvitātes koeficientu( KP) - tas ir arī parauga optiskais blīvums.
- Antivielu koncentrācijas vienības( nanograms / mililitrs vai ng / ml).
- ar titru serumā: 01:20, 01:40, 1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1200 un tā tālāk. Diagnostiskie titri( kad slimība ir diagnosticēta, nevis infekcijas fakts) dažādām slimībām ir atšķirīgas.
- formā simbolu - "+", "-"( +, ++, +++, ++++) "?".
- kvalitatīva novērtējuma formā, kas pamatojas uz konkrētu kritēriju( pozitīvs vai negatīvs).

pareizi aplēstu antivielu variantu imūnglobulīnu klases identifikāciju, un līdz ar to radītu slimības stadijā, un nepieciešamību tikai ārsts var ārstēt.

nedrīkst aizmirst, ka viņu "atsauces vērtības"( iemiesojumi norma), un kuru pārsniedzot konkrētu slimības diagnozi( varianti patoloģiju) izstrādāts jebkuram testa sistēmai. Dažādām testa sistēmām "atsauces vērtības" ir atšķirīgas.

. ELISA rezultātu pareiza salīdzināšana dinamikā ir iespējama tikai tad, ja tie ir ražoti tajā pašā laboratorijā.

Ārsts infekcionists Bykova N.I.