Rilevazione del virus dell'epatite C.
HCV nel materiale è normalmente assente.
differenza HCV metodi diagnostici sierologici dove rilevano anticorpi anti-HCV, PCR può rilevare la presenza di HCV RNA e quantificare direttamente la sua concentrazione nel test materi
le. Il test ha specificità specifica e alta sensibilità: dieci molecole di HCV RNA nel materiale del test sono sufficienti per il suo rilevamento. Il rilevamento di anticorpi anti-HCV che confermare il fatto di infezione del paziente, ma non dà un'indicazione di infezione attiva( il virus per la replica) e la prognosi della malattia. Inoltre, gli anticorpi anti HCV rilevati nel sangue di pazienti con epatite acuta e cronica, così come in quei pazienti che sono malati e recuperato, e spesso l'AT nel sangue appaiono pochi mesi dopo l'insorgenza dei sintomi clinici, il che rende difficile la diagnosi. Il rilevamento dell'HCV nel sangue mediante PCR è un metodo diagnostico più informativo. Identificazione di HCV RNA mediante PCR evidenza di viremia, dà un'indicazione della replicazione del virus nel corpo ed è uno dei criteri per l'efficacia della terapia antivirale. Il rilevamento dell'RNA dell'HCV mediante PCR nelle prime fasi dello sviluppo di un'infezione virale sullo sfondo della completa assenza di marcatori sierologici può rappresentare la prima evidenza di infezione. Tuttavia, il rilevamento isolato dell'HCV RNA sullo sfondo della completa assenza di altri marcatori sierologici non può eliminare completamente il risultato falso positivo della PCR.In tali casi, è necessaria una valutazione completa degli studi clinici, biochimici e morfologici, con ripetuta ripetuta conferma della presenza di infezione da PCR.L'algoritmo per la diagnosi di HCV utilizzando il metodo PCR è mostrato in Fig.
grande importanza è l'applicazione di PCR in pazienti con HCV cronica, poiché la maggior parte dei quali non hanno correlazione tra la presenza di replicazione virale e l'attività degli enzimi epatici. In questi casi, solo la PCR consente di giudicare la presenza della replicazione virale, specialmente se il risultato finale è espresso quantitativamente. Nella maggior parte dei casi, la scomparsa dell'HCV RNA dal siero del sangue avviene più tardi rispetto alla normalizzazione degli enzimi epatici, pertanto la loro normalizzazione non può servire come base per interrompere il trattamento antivirale.
importanza pratica per rilevare RNA HCV mediante PCR per esaminare non solo il siero del sangue, ma anche dei linfociti, gepatobioptaty. I virus possono essere rilevati 2-3 volte più spesso nel tessuto epatico rispetto al siero. Quando si valutano i risultati dello studio del siero del sangue per HCV RNA, si deve ricordare che la viremia può essere di natura fluttuante( come il cambiamento nell'attività enzimatica).Pertanto, dopo i risultati positivi dello studio PCR, è possibile ottenere un risultato negativo e viceversa. In questi casi, per risolvere i dubbi che si presentano, è meglio indagare sull'epatobiobath. Il rilevamento
dell'HCV RNA in un materiale che utilizza la PCR viene utilizzato per i seguenti scopi:
■ risoluzione di risultati discutibili di studi sierologici;
■ differenziazione dell'HCV da altre forme di epatite;
■ rilevamento dello stadio acuto della malattia rispetto all'infezione o contatto trasmessi;lo stadio dell'infezione dei neonati da madri sieropositive sieropositive;
■ monitoraggio dell'efficacia del trattamento antivirale.
Tutte le suddette caratteristiche della valutazione dei risultati e degli approcci alla diagnosi di HCV mediante PCR sono rilevanti per altre infezioni.
Il metodo PCR consente non solo di rilevare l'RNA dell'HCV nel materiale del test, ma anche di stabilirne il genotipo. La determinazione del genotipo del virus è di grande importanza per la selezione di pazienti con HCV cronica nel trattamento dell'interferone alfa e della ribavirina. Le indicazioni di laboratorio per il trattamento dell'interferone alfa HCV cronico sono le seguenti:
■ aumento dell'attività delle transaminasi;
■ presenza di HCV RNA nel sangue;
■ genotipo 1 HCV;
■ alta viremia nel sangue( più di 8x105 copie / ml).
È ora possibile determinare quantitativamente il contenuto di HCV RNA nel siero del sangue mediante PCR, che è di grande importanza per la gestione del trattamento con interferone alfa. Il livello di viremia è valutato come segue: per HCV RNA da 102 a 104 copie / ml - debole;da 105 a 107 copie / ml - medio, sopra 108 copie / ml - alto. Con un trattamento efficace, il livello di viremia diminuisce.