Variasi biologis
Hasil penelitian laboratorium tunduk pada pengaruh variasi biologis dan analitis. Jika variasi analitis tergantung pada kondisi pengujian, besarnya variasi biologis berasal dari keseluruhan faktor. Variasi biologis umum dari indikator yang dipelajari adalah karena variasi intra-individu yang diamati pada orang yang sama sebagai hasil pengaruh ritme biologis( perbedaan waktu dalam setahun, tahun) dan variasi antarindividuasi yang disebabkan oleh faktor endogen dan eksogen, yang utamanya disajikan pada Gambar.
Faktor biologis( faktor fisiologis, faktor lingkungan, kondisi pengambilan sampel, faktor toksik dan terapeutik) dapat mempengaruhi hasil penelitian laboratorium. Beberapa di antaranya dapat menyebabkan penyimpangan nyata hasil laboratorium dari nilai referensi di luar hubungan dengan proses patologis [Menshikov VV, 1995].Faktor-faktor ini termasuk yang berikut.
■ Pola fisiologis( pengaruh ras, jenis kelamin, umur, jenis konstitusi, sifat dan jumlah aktivitas kebiasaan, nutrisi).
■ Pengaruh lingkungan( iklim, faktor geomagnetik, waktu tahun dan hari, komposisi air dan tanah di lingkungan habitat, sosial dan rumah tangga).
Gambar. Urutan evaluasi hasil studi laboratorium
Gambar. Urutan evaluasi hasil laboratorium
■ Dampak agen toksik kerja dan rumah tangga [alkohol, nikotin, obat-obatan terlarang] dan efek iatrogenik( prosedur diagnostik dan perawatan, obat-obatan( AS)]
■ Kondisi pengumpulan sampel( asupan makanan, olahraga, posisi tubuh, stres selama pengambilan sampel, dll.)
Teknik pengambilan sampel darah( metode pengambilan, peralatan dan peralatan, pengawet, dll.)
■ Asupan bahan dalam waktu yang tidak tepat
■ Kondisi( suhu, gemetar,pengaruh cahaya) dan waktu pengangkutan biomaterial untuk penelitian ke laboratorium
Faktor-faktor yang mempengaruhi variasi biologis [Garanina EN, 1997]
Angka-angka yang mempengaruhi variasi biologis [Garanina EN, 1997].
Pertimbangkanlah efek dari faktor yang paling penting dalam hasil tes laboratorium: Asupan makanan
: Diet, komposisi makanan yang dikonsumsi, dan jeda dalam administrasi memiliki pengaruh yang signifikan terhadap sejumlah indikator laboratorium. Setelah 48 jam puasa, konsentrasi bilirubin dalam darah bisa meningkat. Puasa selama 72 jam mengurangi konsentrasi glukosa darah pada orang sehat menjadi 2,5 mmol / L( 45 mg%), meningkatkan konsentrasi trigliserida
( TG), asam lemak bebas tanpa perubahan konsentrasi kolesterol yang signifikan( CS) [Statland BE et al., 1973].
Penggunaan makanan berlemak dapat meningkatkan konsentrasi potassium, TG dan alkaline phosphatase. Aktivitas alkalin fosfatase dalam kasus seperti itu dapat meningkat secara khusus pada orang dengan kelompok darah O atau B [Remes K. et al., 1994].Perubahan fisiologis setelah makan makanan berlemak dalam bentuk hyperchylomicronemia dapat meningkatkan kekeruhan serum darah( plasma) sehingga mempengaruhi hasil pengukuran densitas optik. Kenaikan konsentrasi lipid serum bisa terjadi setelah pasien mengkonsumsi mentega, krim atau keju, yang akan menyebabkan hasil yang salah dan akan memerlukan re-analisis.
Mengkonsumsi sejumlah besar daging, yaitu makanan yang mengandung protein tinggi, dapat meningkatkan konsentrasi urea dan amonia dalam serum, urat dalam urin. Makanan dengan rasio tinggi asam lemak tak jenuh sampai jenuh dapat menyebabkan penurunan konsentrasi kolesterol serum, dan makanan yang kaya akan purin menyebabkan peningkatan konsentrasi urat. Pisang, nanas, tomat, alpukat kaya akan serotonin. Bila digunakan 3 hari sebelum urine diuji untuk asam 5-hydroxyindoleacetic, bahkan pada orang sehat, konsentrasinya dapat meningkat. Minuman kaya akan kafein, meningkatkan konsentrasi asam lemak bebas dan menyebabkan pelepasan katekolamin dari adrenal. Asupan alkohol meningkatkan konsentrasi laktat, asam urat dan TG dalam darah.
Aturan umum untuk mengecualikan pengaruh asupan makanan pada hasil tes laboratorium adalah pengumpulan darah setelah 12 jam puasa.
Latihan.Beban fisik dapat memiliki efek transien dan jangka panjang pada berbagai parameter homeostasis. Perubahan transien termasuk penurunan pertama dan kemudian peningkatan konsentrasi asam lemak bebas dalam darah, meningkat 180% pada konsentrasi amonia dan 300% pada laktat, peningkatan aktivitas kreatin kinase( CC), aminotransferase aspartat( AST), laktat dehidrogenase( LDH).) [Garza D., Becan-McBride K., 1989].Latihan fisik mengaktifkan pembekuan darah, fibrinolisis dan aktivitas fungsional trombosit. Perubahan pada indikator ini dikaitkan dengan aktivasi metabolisme, mereka biasanya kembali ke nilai asli( sebelum beban fisik) segera setelah aktivitas fisik berhenti. Meskipun demikian, aktivitas enzim tertentu( aldolase, CC, AST, LDH) dapat tetap meningkat dalam waktu 24 jam setelah 1 jam aktivitas fisik yang intens. Aktivitas fisik yang berkepanjangan meningkatkan konsentrasi hormon seks dalam darah, termasuk testosteron, andros-tendon dan hormon luteinizing( LH) [Henry J. B, 1996].
Stres emosional dapat menyebabkan leukositosis transien, penurunan konsentrasi zat besi dan perubahan kadar katekolamin dalam darah. Kecemasan berat, disertai dengan hiperventilasi, menyebabkan ketidakseimbangan dalam keadaan asam basa( CBS) dengan peningkatan konsentrasi asam laktat dan asam lemak dalam darah.
Faktor lainnya. Di antara faktor-faktor lain yang mempengaruhi hasil penelitian, ritme homeostasis harian, usia, jenis kelamin, kehamilan, lokasi geografis medan, ketinggian di atas permukaan laut, suhu lingkungan, merokok penting. Pada perokok,
dapat meningkatkan konsentrasi karboksihemoglobin( HbCO), katekolamin dalam plasma darah dan kortisol dalam serum. Perubahan konsentrasi hormon ini sering menyebabkan penurunan jumlah eosinofil, sedangkan kandungan neutrofil, monosit dan asam lemak bebas meningkat. Merokok menyebabkan peningkatan konsentrasi hemoglobin( Hb), jumlah eritrosit, volume rata-rata erythrocyte( MCV) dan penurunan jumlah leukosit. Sehubungan dengan ini, direkomendasikan agar laboratorium menetapkan nilai referensi lokal mereka sendiri untuk populasi mereka.
Untuk mengurangi efek faktor pada hasil tes, sebelum mengambil darah untuk penelitian ini, pantang berolahraga dan asupan alkohol, perubahan diet selama 24 jam harus dihindari. Pasien tidak boleh makan setelah makan malam, ia harus tidur sehari sebelumnyawaktunya dan bangun paling lambat 1 jam sebelum minum darah [Alstorm T. et al., 1993].Dianjurkan untuk mengumpulkan darah dari pasien pada pagi hari setelah 12 jam malam dengan cepat( baseline), yang memungkinkan standarisasi maksimum kondisi studi.
Produk obat. Beberapa obat dapat memiliki dampak signifikan pada hasil penelitian. Misalnya, penerimaan asam asetilsalisilat dalam menentukan waktu pendarahan Duke harus dibatalkan 7-10 hari sebelum penelitian, jika tidak, anda bisa mendapatkan hasil yang patologis. Jika obat yang diambil oleh pasien dapat mempengaruhi hasil analisis, dan jika tidak memungkinkan untuk membatalkannya, Anda harus menginformasikan laboratorium tentang hal itu.
Efek obat hasil studi laboratorium bisa jadi dua jenis.
■ Efek fisiologis in vivo( pada tubuh pasien) obat-obatan dan metabolitnya.
■ Mempengaruhi secara in vitro( pada reaksi kimia yang digunakan untuk menentukan indeks) karena sifat kimia dan fisik obat( gangguan).
Efek fisiologis obat dan metabolitnya sebagian besar diketahui oleh praktisi. Pertimbangkan nilai interferensi, yaitu gangguan faktor asing dalam hasil analisis. Interferensi
dapat disebabkan oleh adanya sampel biomaterial zat endogen dan eksogen. Faktor gangguan endogen utama meliputi hal berikut.
■ Hemolisis, yaitu pemecahan eritrosit dalam hasil bagian cair dari darah sejumlah komponen intraseluler( Hb, LDH, kalium, magnesium, dll), yang mengubah hasil aktual dari penentuan konsentrasi / aktivitas komponen darah seperti bilirubin, lipase CC, LDH, kalium, magnesium dan lain-lain.
■ lipemia mendistorsi hasil beberapa teknik kolorimetri dan Nephele-metrik( terutama untuk studi fosfor, bilirubin total, asam urat, total protein, elektrolit).
■ paraproteinemia menyebabkan perubahan dalam hasil determinasi dengan beberapa metode fosfat, urea, kk, LDH, amilase.
Faktor pengganggu eksogen yang paling sering terjadi adalah obat-obatan atau metabolitnya. Jadi, dalam penentuan katekolamin dengan metode fluorimetrik dalam urin, tetrasiklin yang diterima pasien dapat menyebabkan fluoresensi intens;propranolol metabolit 4-gidroksipropranolol mengganggu metode bilirubin tekad Yendrassika Grau F dan Evelyn-Mellow.
Untuk mengidentifikasi gangguan obat - salah satu tugas dokter diagnostik laboratorium klinis. Langkah penting dalam memecahkan masalah ini adalah menghubungi dokter untuk mengetahui sifat obat yang diambil oleh pasien.
Posisi tubuh dengan pengambilan sampel darah juga mempengaruhi berbagai catatan. Dengan demikian, mengubah posisi pasien berbaring pada posisi duduk atau berdiri menghasilkan penetrasi hidrostatik air dan zat penyaringan dari ruang intravaskular ke ruang interstisial. Zat yang memiliki berat molekul tinggi( protein), dan sel-sel darah merah dengan zat terkait tidak terjadi pada jaringan, sehingga konsentrasinya dalam darah meningkat( enzim, protein total, albumin, besi, bilirubin, kolesterol, trigliserida, protein PM terkait, kalsium).Konsentrasi Hb, Ht, dan jumlah leukosit dapat meningkat. Tempat
dan teknik pengambilan sampel darah juga dapat memiliki efek yang signifikan pada hasil tes laboratorium( misalnya, overlay harness untuk jangka waktu lebih dari 2 menit ketika mengambil darah dari pembuluh darah dapat menyebabkan hemokonsentrasi dan peningkatan konsentrasi darah dari protein, faktor koagulasi, pemeliharaan elemen seluler).Tempat pengambilan sampel darah terbaik untuk tes adalah vena ulnaris. Juga harus dicatat bahwa darah vena adalah bahan terbaik tidak hanya untuk menentukan parameter biokimia, hormonal, serologis, imunologis, tetapi juga untuk penelitian klinis umum. Hal ini disebabkan fakta bahwa saat ini di analisis digunakan hematologi dengan yang menjalani tes darah klinis( penghitungan sel, menentukan Hb, Ht, dll), Dirancang untuk digunakan dengan darah vena, dan kebanyakan dari mereka di negara-negara di mana mereka diproduksi,mereka bersertifikat dan standar untuk bekerja hanya dengan darah vena. Bahan kalibrasi dan kontrol yang diproduksi oleh perusahaan juga dirancang untuk kalibrasi alat analisa darah untuk darah vena. Selain itu, ketika darah menggambar dari sejumlah jari mungkin fitur metodis yang membakukan sangat sulit( dingin, siano-cal, jari edematous, kebutuhan untuk pengenceran darah yang diperiksa dan al.), Yang menghasilkan variasi dalam hasil yang diperoleh dan sebagai konsekuensinya - diKebutuhan akan penelitian berulang untuk memperjelas hasilnya. Untuk pemeriksaan klinis secara umum, sebaiknya dilakukan pemeriksaan darah jari dalam kasus berikut.
■ Untuk luka bakar yang menempati area tubuh pasien yang luas.
■ Jika pasien memiliki pembuluh darah yang sangat kecil atau sedikit akses ke mereka.
■ Dengan obesitas berat pada pasien.
■ Dengan kerentanan terhadap trombosis vena.
■ Pada bayi yang baru lahir.
Tusuk arteri untuk pengambilan sampel darah jarang digunakan( terutama untuk mempelajari komposisi gas darah arterial).
Waktu dan kondisi pengangkutan sampel bahan biologis juga berperan penting dalam memastikan kualitas hasil uji laboratorium. Saat mengirimkan bahan ke laboratorium, selalu perlu mengingat beberapa contoh. Misalnya, ketika mengumpulkan darah arteri untuk menyelidiki kontainer komposisi gas dengan darah harus disegel dengan baik, direndam dalam air es, dan sesegera mungkin dibawa ke laboratorium, karena glikolisis dalam sel darah merah dan leukosit menyebabkan penurunan pH ketika sampel akan menjadi sekitar 20 menit pada suhu kamar. Persyaratan ini juga harus diperhatikan dalam mempelajari darah kapiler, yang dibawa ke kapiler heparinisasi. Darah untuk hormon adrenokortikotropik( ACTH), angiotensin I, II, renin juga harus segera ditempatkan setelah pagar di es dan dikirim ke laboratorium sesegera mungkin.
Secara umum, untuk menghindari pengaruh faktor waktu terhadap hasil analisis, pengiriman bahan ke laboratorium harus dilakukan secepat mungkin. Semakin dini serum dipisahkan dari sel darah merah, semakin sedikit pengaruh glikolisis( oleh karena itu, efek pada konsentrasi glukosa, fosfor dan aktivitas enzim tertentu akan kurang).Konsentrasi bilirubin dalam darah menurun di bawah pengaruh cahaya( terutama sinar matahari yang cerah).Efek cahaya juga meningkatkan aktivitas alkaline phosphatase. Faktor waktu juga sangat penting untuk studi bakteriologis( beberapa bakteri mati pada suhu kamar).
Waktu penyampaian biomaterial ke laboratorium harus sesuai dengan interval yang disajikan dalam tabel. Jika diamati, kemungkinan untuk meminimalkan efek negatif faktor waktu pada hasil uji laboratorium.
Tabel 1-1.Waktu pengiriman ke laboratorium [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
Tabel 1-1.Waktu pengiriman ke laboratorium [Garza D., Becan-McBride K., 1989]
Batas waktu pengiriman yang ditentukan harus diketahui oleh setiap klinisi. Jika dilanggar, diperlukan sampling berulang, karena tidak mungkin untuk mengecualikan pengaruh faktor waktu terhadap penyimpangan hasil penelitian.
Selain semua hal di atas, jumlah variasi biologis bergantung pada fungsi fisiologis yang dilakukan di tubuh oleh analit. Variasi biologis terkecil adalah karakteristik zat yang paling penting untuk stabilitas komposisi dan volume cairan ekstraselular dan darah( natrium, klorida, kalsium, magnesium, albumin, protein total, karbon dioksida).Variasi derajat rata-rata adalah karakteristik zat yang terlibat dalam proses anabolisme( glukosa, kolesterol, fosfor).Komponen serum, yang merupakan produk akhir katabolisme( asam urat, urea, kreatinin), serta zat dan enzim [LDH, AST, alanine aminotransferase( ALT), dll.), Memiliki variasi biologis terbesar.