Polymerase berantai reaksi dalam diagnosis penyakit menular

PCR - salah satu metode untuk diagnosa DNA memungkinkan untuk meningkatkan jumlah salinan dari sebagian terdeteksi genom( DNA) dari bakteri atau virus adalah satu juta kali menggunakan enzim DNA polimerase. Segmen asam nukleat yang diuji untuk genom tertentu dikalikan( diperkuat) berkali-kali, yang memungkinkannya diidentifikasi. Pertama, molekul DNA bakteri atau virus dengan pemanasan dibagi menjadi dua rantai, lalu di hadapan primer DNA disintesis( urutan nukleotida spesifik untuk genom ditentukan) mengikat mereka dengan membentang komplementer DNA, disintesis untai kedua dari asam nukleat setelah setiap primer di hadapan DNA polimerase termostabil. Dua molekul DNA diperoleh. Prosesnya berulang berkali-kali. Untuk diagnosis, satu molekul DNA, yaitu satu bakteri atau partikel virus, cukup memadai. Bereaksi langkah tambahan - sintesis DNA pada molekul RNA menggunakan enzim reverse transcriptase - telah memungkinkan untuk menguji virus RNA seperti virus HCV.PCR adalah proses tiga langkah, diulang secara siklis: denaturasi, anil primer, sintesis DNA( polimerisasi).Jumlah DNA yang disintesis diidentifikasi oleh ELISA atau elektroforesis.

PCR dapat digunakan berbagai bahan biologis - serum atau plasma darah, menggores dari uretra, biopsi, cairan pleura, cairan serebrospinal, dllPCR pertama digunakan untuk diagnosis penyakit infeksi, seperti HBV, HCV, HBV, infeksi CMV, seksual menular infeksi menular( gonore, sampah diynaya, Myco plasma, infeksi ureaplasmal), TBC, HIV dan sebagainya.e.

Keuntungan PCR dalam diagnosis penyakit menular sebelum metode penelitian lainnya adalah sebagai berikut:

■ Agen penyebab infeksi dapat ditemukan di lingkungan biologis tubuh manapun, termasuk bahan yang diperoleh dengan biopsi;

■ Diagnosis penyakit menular pada tahap awal penyakit;

■ evaluasi kuantitatif hasil studi( berapa banyak virus atau bakteri yang terkandung dalam materi yang sedang diselidiki);

■ sensitivitas metode yang tinggi;misalnya, sensitivitas PCR untuk mendeteksi DNA virus HBV dalam darah 0,001 pg / ml( sekitar 4h102 kopi / ml), sedangkan sensitivitas metode DNA hibridisasi menggunakan probe bercabang - 2,1 pg / ml( sekitar 7h105 kopi / ml).