Otkrivanje virusa hepatitisa C

HCV u materijalu obično nema.

razliku HCV serološka dijagnostičke metode, gdje detekciju antitijela za HCV, PCR može otkriti prisutnost HCV RNA i izravno kvantificirati njegova koncentracija u ispitivanju materijalnog

le. Test ima specifičnu specifičnost i visoku osjetljivost: deset HCV RNA molekula u ispitnom materijalu dovoljno je za njegovo otkrivanje. Detekcija antitijela na HCV samo potvrđuje činjenicu infekcije pacijenta, ali ne daju indikaciju aktivne infekcije( na virus replikacija) i prognozu bolesti. Osim toga, antitijela na HCV otkriti u krvi bolesnika s akutnim i kroničnim hepatitisom, kao i na one pacijente koji su bolesni i oporavio, a često AT u krvi pojavljuju se samo nekoliko mjeseci nakon početka kliničke bolesti, što je teško dijagnosticirati. Detekcija HCV u krvi pomoću PCR je više informativna dijagnostička metoda. Identifikacija HCV RNA s PCR dokaz viremije, daje naznaku replikacije virusa u tijelu, te je jedan od kriterija za učinkovitosti antivirusnu terapiju. Detekcija HCV RNA pomoću PCR u ranoj fazi razvoja virusne infekcije u pozadini potpune odsutnosti bilo kojeg seroloških markera može poslužiti kao najstariji dokaz infekcije. Međutim, izolirana detekcija HCV RNA u pozadini potpune odsutnosti drugih seroloških markera ne može u potpunosti eliminirati lažno pozitivan rezultat PCR-a. U takvim slučajevima potrebna je sveobuhvatna procjena kliničkih, biokemijskih i morfoloških studija s ponavljanim ponovljenim potvrđivanjem prisutnosti PCR infekcije. Algoritam za dijagnosticiranje HCV korištenjem PCR metode prikazan je na slici.

velike važnosti je primjena PCR u bolesnika s kroničnom HCV, kao i većina njih nema korelacije između prisutnosti viralne replikacije i aktivnost jetrenih enzima. U takvim slučajevima, samo PCR omogućuje procjenu prisutnosti virusne replikacije, pogotovo ako se krajnji rezultat izražava kvantitativno. U većini slučajeva, nestanak HCV RNA iz krvnog seruma pojavljuje se kasnije nego normalizacija jetrenih enzima pa njihova normalizacija ne može poslužiti kao osnova za zaustavljanje antivirusnog liječenja.

praktični značaj za otkrivanje HCV RNA PCR-om ispitati ne samo u krvnom serumu, ali i limfocita, gepatobioptaty. Virusi se mogu otkriti 2-3 puta češće u tkivu jetre nego u serumu. Prilikom procjene rezultata ispitivanja krvnog seruma za HCV RNA treba imati na umu da viremija može varirati u prirodi( kao što je promjena enzimske aktivnosti).Stoga, nakon pozitivnih rezultata PCR studije, može se dobiti negativan rezultat i obrnuto. U takvim slučajevima, kako bi se riješile sumnje koje se javljaju, bolje je istražiti hepatobibaze.

Detekcija HCV RNA u materijalu koji koristi PCR koristi se za sljedeće svrhe:

■ rješavanje upitnih rezultata seroloških studija;

■ diferencijacija HCV iz drugih oblika hepatitisa;

■ otkrivanje akutne faze bolesti u usporedbi s prenesenom infekcijom ili kontaktom;stupanj infekcije novorođenčadi iz seropozitivnih HCV majki;

■ praćenje učinkovitosti antivirusnog liječenja.

Sve gore navedene značajke procjene rezultata i pristupa dijagnostici HCV pomoću PCR su relevantne za druge infekcije.

PCR metoda omogućuje ne samo otkrivanje HCV RNA u ispitivanom materijalu, već i uspostavljanje njegovog genotipa. Određivanje genotipa virusa od velike je važnosti za odabir bolesnika s kroničnim HCV u liječenju interferona-alfa i ribavirina. Laboratorijske indikacije za liječenje kroničnog HCV interferona alfa su sljedeće:

■ povećana aktivnost transaminaza;

■ prisutnost HCV RNA u krvi;

■ genotip 1 HCV;

■ visoka viremija u krvi( više od 8x105 kopija / ml).

Sada je moguće kvantitativno odrediti sadržaj HCV RNA u krvnom serumu pomoću PCR, što je od velike važnosti za liječenje interferon alfa tretmana. Razina viremije procjenjuje se na sljedeći način: za HCV RNA od 102 do 104 kopija / ml - slaba;od 105 do 107 primjeraka / ml - medij, iznad 108 kopija / ml - visok. S učinkovitim liječenjem razina viremije smanjuje.