karyotyyppauksella

Kromosomeja tutkittaessa käytetään useimmin lyhytaikaisia ​​veriviljelmävalmisteita, luuydinsoluja ja fibroblastiviljelmia. Toimitetaan laboratorioon veren antikoagulanttia sentrifugoitiin saostamiseksi erytrosyyttien, leukosyyttien ja inkuboitiin viljelyväliaineessa 2-3 päivää.Fytohemag-glutiniini lisätään verinäytteeseen, koska se nopeuttaa erytrosyyttien agglutinaatiota ja stimuloi lymfosyyttien jakautumista. Kromosomien tutkimukseen sopivin vaihe on mitoosin metafaasi, joten kolkisiinia käytetään lopettamaan lymfosyyttien jakautuminen tässä vaiheessa. Tämän lääkkeen lisääminen viljelmään johtaa siihen, että solujen osuus, jotka ovat metafaasissa, eli solusyklin tässä vaiheessa, kun kromosomeja nähdään parhaiten. Jokainen kromosomi replikoi( tuottaa oman kopionsa) ja sopivan värin jälkeen on näkyvissä kahden kromatidin muodossa, jotka on kiinnitetty sentromereihin tai keskushermostoon. Soluja käsitellään sitten hypotonisella natriumkloridiliuoksella, joka on kiinteä ja värjätty. Väritys

kromosomeja käytetään usein Romanowsky-Giemsa väriaine, 2% tai 2% atsetkarmin atsetarsein. Ne tahraavat kromosomeja kokonaan, tasaisesti( rutiinimenetelmä) ja niitä voidaan käyttää tunnistamaan ihmisen kromosomien numeeriset poikkeavuudet.

Yksityiskohtaisen kuvan saamiseksi kromosomien rakenteesta, yksittäisten kromosomien tai niiden segmenttien tunnistamisesta( määrityksestä) käytetään erilaisia ​​erottuvärjäyksen menetelmiä.Yleisimmin käytetyt menetelmät ovat Giemsa sekä G- ja Q-taivutus. Kun mikroskoopilla preparatiivisella

rata pituudelta kromosomin paljastaa määrä värillisiä( heterokromatiinivaikutuksesta) ja maalaamaton( eukromatiinilla) kaistoilla. Tällä tavoin saadun poikittaisen striataation luonne mahdollistaa kunkin solun kromosomin tunnistamisen, koska raidat vuorottelevat ja niiden koot ovat ehdottomasti yksilöllisiä ja vakioita jokaiselle parille.

-rata kromosomin pituudella pitkin paljastaa sarjan värjättyjä( heterochromatiini) ja maalaamattomia( eukromatiini) kaistoja. Tällä tavoin saadun poikittaisen striataation luonne mahdollistaa kunkin solun kromosomin tunnistamisen, koska raidat vuorottelevat ja niiden koot ovat ehdottomasti yksilöllisiä ja vakioita jokaiselle parille.

Kuv. Ihmisen kromosomien kaavamaiset kartat

: n differentiaalisella värjäytymisellä Kuv. Kaavamaiset kartat ihmisen kromosomeista, joilla on erilainen väritys

: llä. Yksittäisten solujen metafaasilevyt valokuvataan. Yksittäiset kromosomit leikataan valokuvista ja liimataan paperilevyyn järjestyksessä;tällaista kuvaa kromosomeista kutsutaan karyotyypiksi. Hakemus

lisää värjäytymistä, sekä uusia menetelmiä valmistamiseksi Kromosomivalmisteiden, jolloin venytys kromosomin pituus, lisäävät merkittävästi tarkkuutta sytogeneettisten diagnoosin.

Erityinen nimikkeistö on kehitetty kuvaamaan ihmisen kariotyyppiä.Miehen ja naisen normaali karyotyyppi on nimetty 46, XY ja 46, vastaavasti XX.Kun Downin oireyhtymä, jolle on tunnusomaista ylimääräisen kromosomin 21( 21-trisomia), nainen kuvataan karyotyyppi 47, XX + 21 ja miehet - 47, XY, 21+.Kun läsnä on kromosomin rakenteellisia poikkeavuuksia on määritettävä muuttunut pitkä tai lyhyt lapa kirjaimella p ovat lyhyt varsi, q - pitkät varret, t - translokaatio. Siten, kun kromosomin 5 lyhyt varsi( "kissa-huuto" -oireyhtymä) poistetaan, naaras kariotyyppi kuvataan 46, XX, 5p-.Lapsen äiti, jolla on translokaatio Down-oireyhtymä - 14/21: n tasapainotetun translokaation kantajalla on karyotyyppi 45, XX, t( 14q, 21q).Translocation-kromosomi muodostuu, kun kromosomin 14 ja 21 pitkät kädet yhdistyvät, lyhyet haravat menevät.

Jokainen olkapää on jaettu piireihin, ja ne vuorostaan ​​- osaksi segmenttejä, ja ne ja muut on merkitty arabialaisin numeroin. Kromosomin centromere on lähtökohde alueiden ja segmenttien laskemiselle.

Kromosomipohjallisuuteen käytetään siis neljää markkeria: kromosomiluku, olkapään symboli, alueen numero ja segmentin numero tietyllä alueella. Esimerkiksi tallenne 6p21.3 tarkoittaa sitä, että se on 6. parin kromosomi, sen lyhyt olkapää, alue 21, segmentti 3. On lisämerkkejä, erityisesti pter - lyhyt varren pää, qter - pitkä käden pää.

Sytogeneettinen tutkimusmenetelmä mahdollistaa deleetioiden ja muiden muutosten havaitsemisen kromosomeissa vain noin miljoonalla emäksellä( nukleotidit).