Polümeraasi ahelreaktsioon

PCR - Viimased edusammud molekulaargeneetika, mida kasutatakse võimendamiseks DNA ja võimaldab teil kiiresti levida vitro

kindla osa DNA( st mis tahes huvipakkuva geeni) on rohkem kui 200 000 korda. Reaktsiooni läbiviimiseks piisab, kui saadakse üks rakkude DNA-materjal;arvu amplifitseeritakse DNA on nii suur, et DNA saab lihtsalt värvitud( kasutatakse radioaktiivseid sondide pärast elektroforeesi ei nõuta).Vajalik tingimus PCR - teadmised nukleotiidne järjestus amplifitseeritakse DNA piirkonnale nõuetekohase valiku kunstlikult sünteesida praimerid-meeride.

Praegu PCR on protsess, mis toimub ühe toru ja koosneb korduvatest võimendustsüklil( paljunemist, koopia) spetsiifiliste DNA järjestuste saamiseks piisavalt suur hulk koopiaid, mida võib eristab elektroforees.Üks olulisemaid komponente reaktsioon - "praimereid" - sünteetilised oligonukleoti-dy kuhu kuuluvad 20-30 alustega komplementaarsete "Saidid"( pindalad) lõõmutus( ühendus) tuvastatava matriitsi osaga DNA.

PCR käivitub automaatselt programmeeritavas termostaadis - termotsükleris( termotsükleris).Kolmeetapilise tsükli, milles kopeerivad Saadakse määratletav osa DNA matriits, korrati 30-50 korda vastavalt etteantud termotsükleid programmi-ra. Esimese tsükli oligoprimer ristuma orginaalmatriitsi DNA ja seejärel( järgmistes tsüklites) ja värskelt sünteesitud DNA molekule nende kogunemise reaktsioonisegus. Viimasel juhul, DNA sünteesi ei lõpe temperatuurimuutuste tõttu ning jõudes DNA polümeraasi poolt võimendatud vannogo piiri külge selliselt, et määrab suuruse värskelt sünteesitud DNA piirkonna ühe nukleotiidi.

Nagu tuvastamise meetodit DNA molekule kasutades saadud elektroforeesi mille raames lahutamine viiakse amplifi-materjali kvalifikatsiooniga suurusega Amplikonide( amplifikatsiooniproduktidega).

Kasutades PCR saab uurida vahetult lokaliseerimine arvatava mutatsiooni või polümorfses saidis, samuti uurida sisaldab mõnda teist DNA eripära.