Polümeraasi ahelreaktsioon nakkushaiguste diagnoosimisel

PCR - üks meetodid DNA diagnostika võimaldab suurendada koopiate arvu tuvastatava genoomi osa( DNA) bakterite või viiruste on miljon korda, kasutades DNA polümeraasi ensüümi. Antud genoomi jaoks testitud nukleiinhapete segment korratakse( amplifitseeritakse) mitu korda, mis võimaldab seda tuvastada. Esiteks DNA molekuli bakterite või viiruste kuumutamisega jaguneb kaheks ketid, seejärel juuresolekul sünteesitud DNA praimerid( nukleotiidide järjestus spetsiifilised määratletud genoomse) on siduv nende komplementaarsete lõikude DNA, sünteesiti teise ahela nukleiinhappe pärast iga praimerit kohalolekul termostabiilsele DNA polümeraasi. Saadud on kaks DNA molekuli. Seda protsessi korratakse mitu korda. Diagnoosimiseks piisab ühest DNA molekulist, st ühest bakterist või viirusosakestest. Lastes lisasamm - DNA sünteesi RNA molekuli kasutades ensüümi pöördtranskriptaasi - on võimaldanud testida RNA viirused nagu HCV viirusega. PCR - kolmes etapis, kordustsüklid anniilimis- praimerite DNA sünteesi( polümerisatsiooni).DNA sünteesitud kogus identifitseeritakse ELISA või elektroforeesiga.

PCR võib kasutada erinevaid bioloogilise materjali - seerum või vereplasma, kraapides kusiti, biopsia, pleuravedelik, tserebrospinaalvedelik, jneEsimene PCR diagnoosimiseks kasutatakse nakkushaiguste, nagu HBV, HCV, HBV, CMV infektsiooni, nakkuslik sugulisel teel levivate haiguste( gonorröa, prügikasti diynaya, MYCO plasma ureaplasmal infektsioon), tuberkuloos, HIV ja nii edasi.e.

PCR eeliseks diagnoosimisel nakkushaigused võrreldes teiste meetoditega uuringud on järgmine:

■ nakkustekitajaga võib tuvastada mis tahes bioloogilise keskkonna organismi, sealhulgas materjalide biopsiast saadud;

■ Nakkushaiguste diagnoosimine haiguse varases staadiumis;

■ uuringute tulemuste kvantitatiivne hindamine( kui palju uuritavas materjalis on viirusi või baktereid);

■ meetodi kõrge tundlikkus;nt tundlikkus PCR avastamiseks HBV viiruse DNA veres on 0001 pg / ml( ligikaudu 4h102 koopiat / ml), samal ajal kui tundlikkust DNA hübridisatsiooni meetodil hargnenud sondide - 2,1 pg / ml( ligikaudu 7h105 koopiat / ml).