Immunophänotypisierung von Hämoblastosen
Deutliche Fortschritte bei hämatologischen Untersuchungen im Zusammenhang in den letzten Jahren mit dem Einsatz moderner immunologischer Methoden und automatisierte Tools für die Analyse und Zellen von peripherem Blut und Knochenmark Sortierung - Durchflusszytometer. Traditionelle morphologische und cytochemischer Studie des Substrats Zellkrankheit( Blut, rotes Knochenmark, Lymphknoten, Milz, etc.), in vielen Fällen, insbesondere bei lymphoproliferativen Erkrankungen, zeigen nicht die ganze Vielzahl von Optionen unter morphologisch ähnliche Formen und identifizieren den Ursprung des pathologischen Klon. Diese Probleme können nur durch Untersuchung der immunologischen Eigenschaften von Zellen gelöst werden. Jede Stufe der Differenzierung Hemo-dichterisch Zelle hat seinen eigenen Satz von Ar, die auf der internationalen Klassifikation der Differenzierung und Differenzierung genannt werden in Cluster eingeteilt, bezeichnet als CD.Bei Block Differenzierung von neoplastischen Veränderungen können in jedem Stadium der normalen Zellentwicklung auftreten, was zu einer pathologischen Zellklon definierte Substrat Krankheit ist und die gleiche immunologisch( oder phänotypische) charakteristisch. Nach einem Studium dieses Markers in Zellen kann durch eine beliebige Form oder Ausführungsform der Krankheit bestimmt wird, sind konsistent, das heißt auf der Basis von immunologischer Zellphänotyp Differentialdiagnose, die am schwierigsten in lymphoproliferative Erkrankungen sind, weil die Hauptzellsubstrat pathologischen Erkrankungen morphologisch fast die gleiche Art von Zellen sind. Phänotypisierung kann monoklonale Antikörper typisierten blastische und reife myeloide Blutzellen unter Verwendung von Mono-, lymphatischer Serie in Gegenwart von Differentiation-Paid-Ar( Rezeptoren) in der Zellwand. Auf den Membranen von Blutzellen und rotem Knochenmark können die folgenden Ar( Marker) identifiziert werden.
■ CD2 ist ein monomeres Transmembran-Glykoprotein. Es ist auf der Oberfläche aller zirkulierenden T-Lymphozyten und einiger NK-Lymphozyten vorhanden. CD2 beteiligt sich an dem Prozess der alternativen Aktivierung von T-Lymphozyten. Der Nachweis über CD2 monoklonalen in der klinischen Praxis verwendet, um Antikörper für Fenaughty Schlemmen Akut T-Zell-Leukämie, Lymphom, chronisch entzündliche und Immunschwäche.
■ CD3 - ein Proteinkomplex, der mit dem Ar-spezifischen T-Zell-Rezeptor assoziiert ist, dies ist der Hauptfunktionsmarker von T-Lymphozyten. Es erleichtert die Übertragung des Aktivierungssignals von der
-Membran zum Zytoplasma der Zelle. Bestimmung von CD3 angegeben für die Diagnose einer akuten T-Zellen-Leukämie, Lymphome( CD3 nicht in Nicht-T-Zellen lymphoiden Neoplasmen exprimiert) und Immundefizienz-tion.
■ CD4 - Transmembran-Glycoprotein mit einer Untergruppe von T-Helfer ausgedrückt( Induktoren), die 45% der peripheren Blutlymphozyten. In den frühen Stadien der Lymphozytenentwicklung im Thymus wird Ar CD4 sowie CD8 von allen kortikalen Lymphozyten exprimiert. Medulläre Thymozyten, die den Phänotyp von reifen CD4 ähnlich + peripheren Blut-T-Zellen( Helfer-T-Zellen), die Expression-ruyut entweder CD4 oder CD8-Rezeptoren. Im peripheren Blut werden bis zu 5% der Zellen gleichzeitig mit CD4 und CD8 markiert. Eine leichte Expression von CD4 ist bei einigen Monozyten möglich. CD4 wird in den meisten Fällen, T-Zell-Lymphom exprimiert, einschließlich Mycosis fungoides und in HTLV-assoziierte T-Zell-Leukämie( HTLV - human T-lymphotrop Virus - T lim-fotropny menschlicher Virus).
■ CD5 - einkettiges Glykoprotein, das auf alle reifen T-Lymphozyten und die Mehrheit der Thymozyten vorhanden ist, wird schwach durch B-Lymphozyten exprimiert. CD5 wird auf neoplastischen Zellen von B-Zell chronischer lymphatischer Leukämie und zentrozytischem Lymphom nachgewiesen. Bei anderen Formen maligner lymphatischer Erkrankungen - follikuläres Lymphom, Haarzellenleukämie, großzelliges Lymphom - wird CD5 nicht exprimiert.
■ CD7 ist ein einzelsträngiges Protein, der früheste Marker der T-Zell-Differenzierung. Es wird von Pro-T-Lymphozyten exprimiert, noch bevor sie zum Thymus wandern. CD7 wird auf den meisten NK-Zellen nachgewiesen, schwache Expression wird auf Monozyten festgestellt. B-Lymphozyten und Granulozyten enthalten dieses Ag nicht. Die Definition von CD7 wird für die Diagnose von Lymphomen, kindlicher T-Zell lymphoblastischer Leukämie verwendet.
■ CD8 ist ein Protein, das aus zwei durch Disulfidbrücken verknüpften Polypeptidketten besteht. Es wird durch eine Subpopulation von zytotoxischen und Suppressor-T-Lymphozyten exprimiert, die 20 bis 35% periphere Blutlymphozyten umfassen. Dieses Ar hat auch NK-Lymphozyten, kortikale Thymozyten, 30% der medullären Thymozyten und eine Subpopulation von roten Knochenmarkszellen. CD8 wurde getestet, um den Gehalt an
T-Suppressoren zu quantifizieren■ CD 10 - assoziiert mit der Zellmembran der Endopeptidase. CD10 exprimiert junge Formen von B-Lymphozyten und eine Subpopulation von kortikalen Lymphozyten. CD10 exprimiert alle Zellen von ALLEN.
■ CD11c exprimieren Makrophagen, Monozyten, Granulozyten, NK-Zellen und Zellen der Haarzellenleukämie auf der Zellmembran.
■ CD13 ist ein Glykoprotein, das von myelomonozytischen Zellen( Progenitorzellen, Neutrophilen, Basophilen, Eosinophilen, Monozyten und myeloischen Leukämiezellen) exprimiert wird. Es fehlt in T. B-Lymphozyten, Erythrozyten und Thrombozyten.
■ CD14 - Oberflächenmembran-Glycoprotein. Es wird hauptsächlich von Monozyten und Makrophagen exprimiert. CD14 wird von mehr als 95% der peripheren Blut- und Knochenmarkmonozyten auf
bestimmt. Eine starke Expression von CD14 wird bei akuter myeloblastischer Leukämie beobachtet. Bei akuter und chronischer lymphatischer Leukämie wird dieses Ar nicht exprimiert.
■ CD15 ist ein Oligosaccharid. Er beteiligt sich an den Prozessen der Phagozytose und Chemotaxis. Dieses Ar ist auf der Oberfläche von reifen Granulozyten und Beresovsky-Sternberg-Zellen vorhanden. Die Expression von Ar CD15 wird bei Morbus Hodgkin nachgewiesen. In Non-Hodgkin-Lim-Fomas wird CD15 in den meisten Fällen nicht nachgewiesen.
■ CD16 wird auf der Oberfläche von Granulozyten, Monozyten, Makrophagen und NK-Zellen exprimiert. Alle dieses Ar exprimierenden Lymphozyten besitzen die Fähigkeit zur antikörperabhängigen Zell-Zytotoxizität. CD16 wird bestimmt, wenn chronische myelozytische Leukämien typisiert werden, um NK-Zellen zu charakterisieren.
■ CD 19 ist ein Glykoprotein, das auf allen peripheren B-Lymphozyten sowie auf allen B-Zell-Vorläufern vorhanden ist. Es ist auf Plasmazellen nicht vorhanden. Dies ist der früheste Marker für B-Zellen und spielt eine wichtige Rolle bei der Regulierung der Aktivierung und Proliferation von B-Lymphozyten. CD19 wird auf allen neoplastischen Zellen von akuter Leukämie mit B-Zell-Ursprung exprimiert und ist auch in einigen Formen von akuter Monoblasten-Leukämie vorhanden.
■ CD20 ist ein nicht-glykosyliertes Protein. Bei der Ontogenese von B-Lymphozyten erscheint Ar CD20 nach CD19 im Stadium der Prä-B-Zell-Differenzierung von Lymphozyten. Es fehlt auf der Plasmamembran von Plasmazellen. Es ist in ALL, B-Zell-chronische lymphatische Leukämie, Haarzellenleukämie, Burkitt-Lymphom und sehr selten in akuter monoblastischer Leukämie exprimiert.
■ CD21 ist ein Glykoprotein, das in signifikanter Menge auf B-Lymphozyten in lymphoiden Organen und in einer geringen Menge auf B-Zellen von peripherem Blut vorhanden ist. CD21 ist ein Rezeptor für das Epna-Stein-Barr-Virus.
■ CD22 ist ein Protein, das aus zwei Polypeptidketten besteht. Es wird auf der Membran der meisten B-Lymphozyten einschließlich Vorläuferzellen( Prolymphozyten) exprimiert. Ar wird nach ihrer Aktivierung nicht auf B-Lymphozyten( Plasmazellen) exprimiert. Die ausgeprägteste Expression von CD22 wird bei Zellen mit haarfollikelgenauer Leukämie, bei schwach myeloischen Leukämien und bei Nicht-T-Zell-ALL festgestellt.
■ CD23 ist ein Glycoprotein, das von aktivierten B-Limfocyten des peripheren Blutes in einem viel größeren Ausmaß exprimiert wird. CD23 vermittelt IgE-abhängige Zytotoxizität und Phagozytose durch Makrophagen und Eosinophile.
■ CD25 ist ein einzelkettiges Glycoprotein, das als Rezeptor mit niedriger Affinität für IL-2 identifiziert wurde. Dieser Rezeptor wird auf aktivierten T-Lymphozyten und in geringerer Dichte auf aktivierten B-Zellen exprimiert. Im peripheren Blut gesunder Menschen ist Ar in mehr als 5% der Lymphoidzellen vorhanden.
■ CD29 - Fibronektin-Rezeptor. Es ist in den Texturen weit verbreitet, es wird von den Leukozyten geäußert. Die Bestimmung von CD29 auf Perida
-Zellen von Eisen( III) -Blut wird verwendet, um eine T-Zell-Subpopulation mit einem CD4 + CD29 + -Phänotyp, genannt Helfertyp 2( Th2), zu typisieren. Diese Zellen nehmen durch die Produktion von Lymphokinen an der Realisierung der humoralen Immunantwort teil.
■ CD33 - Transmembran-Glykoprotein. Es ist auf der Oberfläche von Zellen der myeloiden und monozytischen Reihe vorhanden. Es findet sich auf der Oberfläche von Monozyten und in geringerem Maße von Granulozyten aus peripherem Blut. Etwa 30% der roten Knochenmarkzellen exprimieren CD33, einschließlich Myeloblasten, Promyelozyten und Myelozyten. Ar fehlt auf Membranen von polypotenten Stammzellen. CD33 wird verwendet, um Zellen in myeloischen Leukämien zu charakterisieren. Leukämiezellen lymphoiden und erythroiden Ursprungs exprimieren CD33 nicht.
■ CD34 - phosphoglycoprotein, ausgedrückt in hämatopoetischen Vorläuferzellen, einschließlich Stammzellen monopotentnye. Die ausgeprägteste Expression von Ar wird in frühen Vorläufern beobachtet;wenn die Zellen reifen, fällt die Expression des Markers. CD34 wird auch auf Endothelzellen gefunden. CD34 wird zur Charakterisierung von Zellen bei akuter myeloischer und lymphozytärer Leukämie verwendet. Bei chronischer lymphatischer Leukämie und Lim-Phoma-Expression wird Ar CD34 nicht nachgewiesen.
■ CD41a wird von Thrombozyten und Megakaryozyten exprimiert. Einglas-funktionelle-CD41a-Antikörper für den Nachweis für die diagnostische Verwendung Me-gakarioblastnogo Leukämie. Bei Glązmann-Thrombasthenie ist die Expression dieses Ar nicht vorhanden oder signifikant unterdrückt.
■ CD42b ist ein Membranglykoprotein, das aus zwei Polypeptidketten besteht. Der Marker befindet sich auf der Oberfläche von Thrombozyten und Megakaryozyten. In der klinischen Praxis CD42b Erkennung für die diagnostische Verwendung Thrombozytopathie - Syndrom, Bernard-Soulier.
■ CD45RA gehört zur Klasse der Transmembran-Glykoproteine. Dies ist ein übliches Leukozyten-Ag. Ausgedrückt auf der Zellmembran von B-Lymphozyten in einem geringeren Ausmaß reifen T-Lymphozyten und medullären Thymozyten. Der Marker wird nicht von Granulozyten exprimiert.
■ CD45RO - niedermolekulare Isoform CD45RA - gewöhnliches Leukozyten-Ag. Identifiziert die T-Zelle( Gedächtnis-T-Zellen) B Subpopulationen von Lymphozyten, Monozyten und Makrophagen. Monoklonale Antikörper mit den meisten CD45RO thymocyte Subpopulation von ruhenden CD4 + und CD8 + T-Lymphozyten zur Interaktion und aktivierten T-Zellen fällig werden. Myelomonozytische Zellen, Granulozyten und Monozyten tragen ebenfalls dieses Ag. Es wird mit pränatalen und immunoblastischen Lymphomen nachgewiesen.
■ CD46 - O-glykosyliertes Dimer. Es ist weit verbreitet in Gewebe verteilt und ausgedrückt T- und B-Lymphozyten, Monozyten, gra-nulotsitami NK-Zellen, Blutplättchen, Endothelzellen, Fibroblasten, sondern auf der Oberfläche der Erythrozyten fehlt. CD46 bietet Gewebeschutz vor Komplementwirkung.
■ CD61 - Plättchen Ag. Es wird auf den Thrombozyten, peripheres Blut und Knochenmark exprimiert wird, sowie auf dem Megakaryozyten-Minuten- und Megakaryoblasten. Seine Definition wird als Markierung von
für akute megakaryoblastische Leukämie verwendet. Die Expression von Ar ist bei Patienten mit Glanzmann-Thrombastenie nicht vorhanden oder unterdrückt.
■ CD95, das auch als Fas oder APO-1 bekannt ist, - Gly-Trans koprotein, ein Familienmitglied von Rezeptoren Tumornekrosefaktor. Es wird in großen Mengen in den T-Lymphozyten( CD4 + und CD8 +) peripheres Blut und, in geringerem Maße, B-Lymphozyten und NK-Zellen exprimiert wird. Dieses Ar wird auch auf Granulozyten, Monozyten, Gewebezellen und neoplastischen Zellen exprimiert. Die Bindung von CD95 an den Fas-Liganden( CD95L) induziert Apoptose in den Zellen.
■ CD95L oder Fas-Liganden, ein Proteinmembran zu der Familie von Tumornekrosefaktor-Rezeptoren gehört. Dieses Ag wird von zytotoxischen T-Lymphozyten, NK-Zellen und sehr oft Tumorzellen exprimiert;der Hauptinduzierer der Apoptose in Zellen.
■ HLA-DR - monomorphic Klasse II Determinante Moleküle MHC Mann( HLA).Etsya Marker wird auf Langerhans'schen Zellen, dendritischen Zellen von lymphoiden Organen, und bestimmten Arten von Makrophagen, B-Lymphozyten, aktivierten T-Zellen und Thymus-Epithelzellen. Studieren aktiven Marker verwendet, um die aktivierten T-Lymphozyten mit einem Phänotyp CD3 + HLA-DR + zu quantifizieren.
Verwendung verschiedener monoklonaler Antikörper gegen das Selektionsmarker können Zell Portrait phänotypische Eigenschaft dieser Form von Leukämie( Tabelle A-7-30) anlegen.
Neben Immunophänotypisierung Techniken für die Diagnose und Differentialdiagnose von hämatologischen Malignitäten verwendet wird, besonders wichtig geworden, ihre Verwendung bei der Behandlung Prozess den Zustand der Vergebung und Restpopulation von leukämischen Zellen zu beurteilen. Die Kenntnis der phänotypischen „Portrait“ von Blasten in der Zeit der Diagnose, zu diesen Markern es Zelle leukämischen Klon in Remission finden, und von der Zunahme ihrer Zahl - die Entwicklung eines Rezidivs lang( für 1-4 Monate), bis seine klinische und morphologische Merkmale vorherzusagen.
Tabelle immunphänotypische Charakterisierung von Leukämie [Myers A. R., 1996]
Tabelle immunphänotypische Charakterisierung von Leukämie [Myers A. R., 1996]
Tabelle Immunophänotyp ALL [Reiche R. R., 2001]
Tabelle Immunophänotyp ALL [Reiche R. R., 2001]
End Table.
Ende der Tabelle.
Anmerkung: cig q - cytoplasmatische Ig c-Kette;sig q ist eine Oberflächen-Ig und eine Kette.