Bakterioskopi af sputum
Tidlig identifikation af et infektiøst middel er meget vigtigt for det korrekte valg af et antibakterielt lægemiddel for at forhindre udviklingen af bakteriel resistens under den empiriske administration af et antibiotikum. Gramfarvning er den mest almindelige metode til farvning af alle typer materiale, der er opnået fra en patient( sputum, bronco-holoveolær skylning osv.) Til hurtig og vejledende etablering af et infektiøst middel.
En sputumudsmud farvet med Gram stain er brugt til at udføre en foreløbig vurdering af et eventuelt etiologisk middel. Gramfarvet smudssputum undersøges, før det sås på næringsmedier også med det formål at vurdere egnetheden til dyrkning og identifikation af et sandsynligt patogen. Sputum anses for at være egnet, hvis en smet farvet af Gram med en lille stigning i mikroskopet afslører mere end 25 leukocytter og mindre end 10 epithelceller i synsfeltet. Tegn på en kvalitetssputumprøve, som kan anvendes til dyrkning, er forekomsten af leukocytter over epithelceller i den, såvel som tilstedeværelsen af bakterier af en art, der er placeret indeni eller omkring leukocytterne. Gram-positive bakterier i præparatet har en mørkblå farve, gram-negativ - i pink. De forårsagende midler til atypisk lungebetændelse( mycoplasma, legionella, rickettsia og chlamydia) er ikke farvet af Gram, derfor anvendes serologiske metoder til deres påvisning.
Sputumudslæt ifølge Tsiol-Nielsen bruges til at identificere syrefaste baciller, primært mycobacterium tuberculosis. Præparatet fremstilles ud fra purulente sputumpartikler, som er valgt fra 4-6 forskellige steder. De udvalgte partikler omhygges forsigtigt mellem 2 glider til en homogen masse, tørret i luft, fastgjort over brænderens flamme. Mycobacterium tuberculosis er farvet rødt, alle andre sputum og bakterier i blåt. Mycobacterium tuberculosis har udseende af tynde, svagt buede stifter af forskellig længde, med fortykkelse i enderne eller i midten, arrangeret i grupper og enkeltvis. Påvisning af Mycobacterium tuberculosis er det mest pålidelige tegn på lunger i tuberkulose. Fremgangsmåden til farvning udtværinger ifølge Tsiol-Nielsen med aktive former for lungtubberkulose har en følsomhed på 50% og en specificitet på 80-85%.