Vyšetrovanie enzýmov a izoenzýmov

Enzýmy sú špecifické proteíny, ktoré plnia úlohu biologických katalyzátorov v tele. Enzýmy sú obsiahnuté vo všetkých bunkách tela, kde ich koncentrácia je oveľa vyššia ako v krvnej plazme. Sérum

krvi, ktorého zloženie enzýmu je relatívne konštantné, sa najčastejšie používa ako objekt na výskum. Normálne aktivita enzýmu v sére odráža pomer medzi biosyntézu a uvoľňovanie enzýmov( v normálnej aktualizácii bunky), a ich odstraňovanie z krvného obehu. Zvýšenie rýchlosti obnovy enzýmov, poškodenie buniek zvyčajne vedie k zvýšeniu aktivity enzýmov v sére. V sére krvi sa rozlišujú tri skupiny enzýmov: bunkové, sekrečné a vylučujúce.

bunkovej enzýmy, v závislosti na umiestnení v tkanive rozdelené do dvoch skupín:

■ nešpecifická enzýmy, ktoré katalyzujú spoločné pre všetky tkanivá výmene reakcie a vo väčšine orgánov a tkanív;

■ špecifické pre orgán alebo enzýmy špecifické pre špecifický typ tkaniva.

Sérová aktivita bunkových enzýmov je nízka alebo neexistuje. V patologických procesoch aktivita enzýmov tejto skupiny v sére závisí od rýchlosti uvoľňovania z buniek, ktorá je zase určená rýchlosťou a stupňom ich poškodenia.

sekrečnú enzýmy( ceruloplazmín, pseudocholínesterázy, lipopro-lipázy proteínové polyméry) vstupovať priamo do krvnej plazmy a plniť špecifické funkcie v nej. Tieto enzýmy sa syntetizujú v pečeni a sú neustále uvoľňované do plazmy. Ich aktivita v sére je vyššia ako v bunkách alebo tkanivách. V klinickej praxi sú zaujímavé, keď ich aktivita v krvnom sére je nižšia ako normálne v dôsledku zhoršenej funkcie pečene. Exkrečnou vytvorené

enzýmov tráviaceho ústrojenstva( pankreas, črevnej sliznice, pečene, žlčových ciest endothelu).Tieto zahŕňajú a-amylázu, lipázu, alkalickú fosfatázu atď. Normálne je ich sérová aktivita nízka a konštantná.Avšak v patológii, keď je zablokovaná ktorákoľvek z bežných ciest vylučovania, aktivita týchto enzýmov v sére sa významne zvyšuje.

Meraná aktivita enzýmov môže byť dôsledkom prítomnosti veľmi podobných molekulárnych vlastností enzýmov, ktoré sú vo vlastnostiach veľmi podobné, ale navzájom sa líšia. Tieto rôzne formy sa nazývajú izoenzýmy.Študijné izoenzýmy v klinickej praxi je predmetom záujmu, vznikajú, keď jednotlivé izoenzýmy v rôznych tkanív( napr. Rôzne LDH izoenzýmy prevládajú v srdci a pečeň).

Na stanovenie enzýmovej aktivity Komisia pre enzýmy Medzinárodnej biochemickej únie odporučila štandardnú medzinárodnú jednotku( IU).Jedna jednotka aktivity ktoréhokoľvek enzýmu brať množstvo, že za optimálnych podmienok katalyzuje premenu 1 mikromolu substrátu za minútu( pmol / min).

Aktivita enzýmu sa posudzuje rýchlosťou katalyzovanej reakcie pri určitej teplote a pH prostredia, koncentrácii substrátu. Preto pri určovaní aktivity enzýmov musia byť prísne dodržané rovnaké podmienky.

Enzymatická reakcia je citlivá na zmeny teploty. Obvykle sa vykonáva pri teplote v rozsahu

25-40 ° C, ale pri rôznych teplotách je optimálny pH, pufor, substrát a iné parametre odlišné.Maximálna aktivita väčšiny enzýmov v ľudskom tele je pozorovaná pri teplote okolo 37 ° C.Preto sa na účely medzinárodnej štandardizácie vykonávajú merania enzýmovej aktivity pri danej teplote. Pod normálnymi hodnotami aktivity enzýmu sú uvedené teploty 37 ° C.Štúdia

enzýmy používané v klinickej praxi pre rôzne úlohy: diagnóza, diferenciálnu diagnostiku, hodnotenie dynamiky ochorenia, stanovenie účinnosti liečby, stupeň výťažnosti a prognózu. Existujú tri typy enzýmov zmien v patológii: giperfermente mia - zvýšenú aktivitu enzýmov, ako je obvyklé, hypo-enzým obsah - jej pokles disfermentemiya - vo vzhľade krvných enzýmov, ktoré nie sú bežne nájdené.