Reação em cadeia da polimerase no diagnóstico de doenças infecciosas

é um dos métodos de diagnóstico de DNA que permite aumentar o número de cópias da região detectada do genoma( DNA) de bactérias ou vírus por milhões de vezes usando a enzima DNA polymerase. O segmento do ácido nucleico testado para um determinado genoma é multiplicado( amplificado) muitas vezes, o que permite que ele seja identificado. Em primeiro lugar, uma molécula de ADN de bactérias ou vírus por aquecimento dividido em duas correntes, em seguida, na presença dos iniciadores de ADN sintetizados( sequência de nucleótidos específicos para o genómico definido) é ligá-los com trechos complementares de ADN, sintetizado a segunda cadeia do ácido nucleico após cada iniciador, na presença de uma polimerase de ADN termoestável. São obtidas duas moléculas de DNA.O processo é repetido muitas vezes. Para o diagnóstico, uma molécula de DNA, ou seja, uma bactéria ou uma partícula viral, é suficiente. A introdução de um passo adicional na reação - a síntese de DNA na molécula de ARN pela transcriptase reversa enzimática - possibilitou testar vírus RNA, por exemplo, o vírus HCV.O PCR é um processo de três passos, repetido cíclicamente: desnaturação, recozimento de iniciadores, síntese de DNA( polimerização).A quantidade sintetizada de DNA é identificada por ELISA ou por eletroforese.

PCR pode usar uma variedade de materiais biológicos - soro ou plasma sanguíneo, raspagem da uretra, biópsia, líquido pleural, líquido cefalorraquidiano, etc. A primeira PCR foi utilizado para o diagnóstico de doenças infecciosas, tais como HBV, HCV, HBV, infecção por CMV, infecção sexualmente infecciosa transmitida( gonorreia, diynaya lixo, plasma mico, infecção ureaplasmal), tuberculose, VIH e assim por diante.e.vantagem

PCR no diagnóstico de doenças infecciosas mais estudos outros métodos é a seguinte:

■ agente infeccioso pode ser detectada em qualquer ambiente biológico do organismo, incluindo aqueles materiais obtidos por biopsia;

■ Diagnóstico de doenças infecciosas nos primeiros estágios da doença;

■ avaliação quantitativa dos resultados dos estudos( quantos vírus ou bactérias estão contidos no material sob investigação);

■ alta sensibilidade do método;por exemplo, a sensibilidade de PCR para detectar o HBV DNA viral no sangue é de 0,001 pg / ml( aproximadamente 4h102 cópias / ml), enquanto que a sensibilidade de um método de hibridação de DNA usando sondas ramificados - 2,1 pg / ml( aproximadamente 7h105 cópias / ml).