Detektion av hepatit C-viruset

HCV i materialet är normalt frånvarande.

skillnad HCV serologiska diagnostiska metoder där detektera antikroppar mot HCV, kan PCR detektera närvaron av HCV RNA och direkt kvantifiera dess koncentration i test mate

le. Testet har specifik specificitet och hög känslighet: tio HCV RNA-molekyler i testmaterialet är tillräckliga för detektering. Detektion av antikroppar mot HCV bekräftar bara det faktum att patientens infektion, men ger inte en indikation på aktiv infektion( viruset för replikation) och prognosen av sjukdomen. Dessutom antikroppar mot HCV upptäcktes i blodet hos patienter med akut och kronisk hepatit, liksom hos de patienter som är sjuka och återhämtat sig, och ofta AT i blodet verkar bara några månader efter debuten av klinisk sjukdom, vilket gör det svårt att diagnostisera. Detektion av HCV i blodet med PCR är en mer informativ diagnostisk metod. Identifiering av HCV RNA genom PCR bevis på viremi, ger en indikation på virusreplikation i kroppen och är ett av kriterierna för effektivitet antiviral terapi. Detektion av HCV RNA genom PCR i de tidiga stadierna av utvecklingen av en virusinfektion mot bakgrund av den fullständiga frånvaron av serologiska markörer kan fungera som det tidigaste beviset på infektion. Den isolerade detektering av HCV RNA mot bakgrunden av den fullständiga frånvaron av andra serologiska markörer kan emellertid inte fullständigt eliminera det falska positiva resultatet av PCR.I sådana fall behövs en omfattande utvärdering av kliniska, biokemiska och morfologiska studier med upprepad upprepad bekräftelse av förekomst av PCR-infektion. Algoritmen för diagnostisering av HCV med användning av PCR-metoden visas i Fig.

stor betydelse är tillämpningen av PCR hos patienter med kronisk HCV, eftersom de flesta av dem har inget samband mellan förekomsten av virusreplikation och aktiviteten av leverenzymer. I sådana fall tillåter endast PCR att bedöma förekomsten av viral replikation, speciellt om slutresultatet uttrycks kvantitativt. I de flesta fall sker försvinnandet av HCV RNA från blodserum senare än normaliseringen av leverenzymer, så deras normalisering kan inte användas som grund för att stoppa antiviral behandling.

Det är praktiskt viktigt för detektering av HCV RNA att undersöka PCR-metoden inte bara med serum utan också med lymfocyter och hepatobiobaptam. Virus kan detekteras 2-3 gånger oftare i levervävnad än i serum. Vid utvärdering av resultaten av studien av blodserum för HCV RNA bör det komma ihåg att viremi kan vara fluktuerande i naturen( som förändringen av enzymaktivitet).Därför, efter positiva resultat av PCR-studien, kan ett negativt resultat erhållas och vice versa. I sådana fall, för att lösa de tvivel som uppstår, är det bättre att undersöka hepatobiobater.

Detektion av HCV RNA i ett material som använder PCR används för följande ändamål:

■ Upplösning av tvivelaktiga resultat av serologiska studier;

■ differentiering av HCV från andra former av hepatit;

■ Detektering av sjukdoms akuta stadium i jämförelse med den överförda infektionen eller kontakten;Infektionsstadiet hos nyfödda från seropositiva HCV-mödrar;

■ Övervakning av effektiviteten av antiviral behandling.

Samtliga ovanstående egenskaper i utvärderingen av resultat och metoder för diagnos av HCV med PCR är relevanta för andra infektioner.

PCR-metoden tillåter inte bara att detektera HCV-RNA i testmaterialet utan också att fastställa genotypen. Bestämning av virusets genotyp är av stor betydelse för valet av patienter med kronisk HCV vid behandling av interferon-alfa och ribavirin. Laboratorieindikationer för behandling av kronisk HCV interferon alfa är följande:

■ ökad aktivitet av transaminaser;

■ Förekomst av HCV RNA i blodet;

■ genotyp 1 HCV;

■ hög viremi i blodet( mer än 8x105 kopior / ml).

Det är nu möjligt att kvantitativt bestämma HCV RNA-innehållet i blodserumet genom PCR, vilket är av stor betydelse för hanteringen av interferon alfa-behandling. Nivån på viremia bedöms enligt följande: för HCV RNA från 102 till 104 kopior / ml - svag;från 105 till 107 kopior / ml - medium, över 108 kopior / ml - hög. Med effektiv behandling minskar nivån på viremi.