Имуноензимска анализа( ЕИА) - Узроци, симптоми и третман.МФ.

имуносорбент есеј( ЕЛИСА) - модерна лабораторија истраге, током које се претраживање се специфична антитела или антигене у крви до одређених болести и идентификовати не само етиологију већ и стадијум болести.Резултати ЕЛИСА могу се дати квалитативно и квантитативно.

Тренутно ЕИА се примењује у следећим ситуацијама:

1) Слово специфичних антитела на поједине заразне болести;
2) потражите антигене било којих болести( заразних, венских);
3) преглед хормонског статуса пацијента;
4) преглед за онцомаркерс;
5) преглед за присуство аутоимуних болести.Предности

ЕЛИСА метход:

1) висока специфичност и осетљивост ЕЛИСА( преко 90%).
2) Способност да се утврде и прате динамику процеса болести, тј поређењем количине антитела у различитим временским интервалима.
3) Доступност ЕЛИСА дијагностике у било којој медицинској установи.Релативан недостатак

:

1) Детекција имуног одговора( антитела), али не и патогена.

Концепти

Пре разјасни суштину ЕЛИСА методом, кратко је разумети неке концепте.

Антитела( или имуноглобулине - Иг) - специфични протеини произведени од Б -
лимфоцити( имуно ћелије) као одговор на улазак у тело заразне патогена( вируса, бактерија, гљивица, итд).Луче имуноглобулин А( ИгА), имуноглобулин Е( ИгЕ), имуноглобулин М( ИгМ), имуноглобулин Г( ИгГ), имуноглобулин Д( ИГД).Они разликују један од другог и формирају молекуларни масовну полуживота учешћа / нонпартиципатион код инфективних процесима, открити тајминг од времена инфекције.Ако узмемо у обзир молекуларну тежину, највише је ИгГ - је пентамера( 950,000 ДА), за разлику од остатка Иг( од 150 до 200 000 Да), па ИгГ једноставно не може да прође кроз плаценту.Због тога је откривање ИгМ код 1-годишње бебе увијек знак инфекције у фетусу.Главнина серумског имуноглобулина представљена ИгГ( 75-85%), а најмањи - ИгЕ( 0,003%).Инфективни Процес директно укључени узимање само ИгА, М, Г. ИгЕ су знак алергијске реакције и услова, и ИгД - могу се детектовати само у лимфном чвору и крајника ткива, игра улогу у формирању локалне имунитета.

класе имуноглобулина

Антигени - високе молекулске масе органских супстанци, нарочито инфективним патогенима и других болести, као и различите супстанце модификоване ћелије произведена у датом болести( аутоимуне болести, рака).

Иммуне цомплек - антиген-антитело укључен у имуном процесу.На чему се базира ИФА метода?

неколико различитих ЕЛИСА сорти( директне, индиректне, блокирање метод участники), али у пракси најчешће коришћен хетерогену имуноесеја ензима или ЕЛИСА( ензим повезан имуносорбент есеј)

основа имунолошким тестовима имунског одговора антигена и антитела да формирају имуни комплекс: антиген-антибоди, што доводи до промене ензимске активности специфичних наљепница на површини антитела.Метод

ЕЛИСА

Једноставно речено, овај процес се може поделити у неколико фаза:

1) на површини лекар-рупа плоче, испитивач пречишћени антиген специфичног патогена.Приликом додавања биолошког материјала( крвном серуму) неког пацијента специфичног реакције јавља између антигена и жељеног антитела( имуноглобулина).Ово једињење ће деловати као "посебан антиген" у следећој фази.

2) У овој фази формирања је ИР( имуни комплекси) - реакција између "специфични антиген" и коњугата( ово имуноглобулин означено са пероксидаза ензима).Додаје се посебан хромоген.Резултат ове ензимске реакције је формирање обојених супстанци у лежишта плоче, чији интензитет боје зависи од броја имуноглобулина пацијента( антитела) садржане у материјалу.

3) даље има Тумачење: пхотометри користећи вишеканални спектрофотометра поредећи оптичку густину испитног материјала са оптичком густином од контролних узорака, математичке резултата обраде.Количина антитела код пацијента зависи од висине оптичке густине бунара.

уобичајено да користе 96 коморне плоче.

количина( или концентрација) антитела у одређеној јединици запремине када мерење оптичке густине( ОД) течног узорка израчунава.Резултат се затим пореди са контролним узорком.

мора имати на уму: за сваки тест систем развијен да узме у обзир резултате индивидуализма, стандарда учинка и патологију( нпр "референтна вредност").Ово треба узети у обзир приликом процене резултата сваке студије случаја.Правилно тумаче резултате лабораторијских "референтне вредности" другој лабораторији.Такође је нетачно да упореди резултате из различитих лабораторија заједно.При постављању

ЕЛИСА реакције и има такав концепт вредности као афинитетом антитела.Авидити
антитело - ово антитело везивање снагу антиген и количина антигена налази у међусобној са иммноглобулинами( антитела).Жудња је од великог значаја приликом процене наводно инфекцију термина, што је изузетно важно у дијагностици примарне инфекције код трудница.

Басис антитела авидити Тест се састоји од третмана имуног комплекса( антиген-антитело) карбамид раствор у циљу да уништи протеин.Високоавидние везе остати нетакнута, а ниска жудња уништена.Резултат је дата као индекс склоност, изражен у процентима( %).

Које болести се детектује ЕЛИСА-дијагностика?

1. Инфективне болести
1.1 Вирусни хепатитис А( ИгМ, Г), Б антигене -ХБсАг, ХБеАг, антитела - ИгМ ХБцорАг, Иг укупне ХБцорАг, ИгГ ХБеАг), Ц( антитела Иг М, Г ХЦВ), Д( ИгМ,Г), Е( Иг М, Г) и други.
1.2 ХИВ инфекције( ИгГ)
1.3 цитомегаловирус инфекција( антитела ИгМ, Г)
1.4 Епстеин-Барр инфекција или мононклеоз( антитело ИгМ, Г у ЕА, ВЦА, НА протеини вируса)
1.5 херпетична инфекције( антитела ИгМ, Г)
1.6 Токсоплазмоза( антитело ИгМ, Г)
1.7 Рубелла( ИгМ, Г)
1.8 Мале богиње( ИгМ, Г), бруцелоза( ИгМ, Г), псеудотуберцулосис( ИгМ, Г), Салмонеллосис( ИгМ, Г), шигелозу или дизентерија(ИгМ, Г), аспергилоза( ИгМ, Г), Тицк-борне енцефалитис, борелиозе и многе друге.
1.9 паразитозе( гиардијаза, токоцариасис, трихиноза, описторхоз, ехинококоза, алвеоцоццосис и други) у којима детектује ИгГ
1.10 СТД( сексуално преносивих болести путем) - Мицопласмосис( ИгМ, Г), Уреапласмосис( ИгМ, Г), Цхламидиа( ИгА, М, Г), сифилис( ИгГ)
1.11 Хелицобацтер инфекција( ИгГ)

2. Маркери аутоимуних болести и индекса људског имунитета ( тотал ИгЕ, тотал ИгГ, тотал ИгА, тотал ИгМ, тотал ИгД, секреција ИгА, ИгГ 2, ИгГ4, ЦРЦ циркулишућих имуних комплекса, ИгА и ИгГ антитела да глијадина и друге)

3. Онкологицхсекие маркери ( ФНО - фактор некрозе тумора, ЦЕА - царциноембриониц антиген, ПСА - простата специфичног антигена, хЦГ - хумани хорионски гонадотропин, ЦА 125, алвеомутсин и многи други)

4. Репродуктивни поремећаји И( естрадиол, прогестерон, пролактин, тестостерон, АФП АФП-ФСХ - хормон за стимулацију фоликула и друго)

5. Дисеасес ​​тироидне( слободног и везаног Т3, Т4, Тхироглобулин, штитне рена - ТПО, хормон за стимулацију тироиде - ТТГ).

Ова листа никако није све болести су дијагностикован са ЕЛИСА.

материјал за ЕЛИСА анализу и правила ограда

најчешћих материјала за ЕЛИСА реакције - пацијента серуму, узета на празан стомак.Материјал такође може да послужи као ликвора, амнионске течности, стакласте садржаја, слузи цервикалног канала и уретре брисеви.

Припрема пацијената за испоруку материјала за ИФА

Крв се узима на празан стомак.Пре испоруке крви не треба да предузима било какве лекове.Посебан третман( антибактеријски, антивирусно, антипаразитске, итд) мора бити заустављен најмање 2 недеље пре испитивања.

производњу МФА Датуми

Ензим имунолошки тест се изводи брзо током дана.Кашњења могу бити у различитим лабораторијама због акумулације одређеног броја серума.

Могући резултати ЕЛИСА дијагностике

Када се процењују резултати за специфичне инфекције, откривена класа антитела и њихов број су важни.То утиче не само питање етиологије инфекције( тј то или не), али процењена стадијум болести( акутне и хроничне), као и присуство активног инфекције( акутна или егзацербације хроничних) у време истраживања.

Који су приближни појмови за појаву антитела( имуноглобулина-Иг)?

Најраније антитела су ИгМ .Идентификовати их може бити 1-3 недеље након могуће инфекције, што карактерише акутну фазу заразног процеса.Друга ситуација са појавом ИгМ антитела је активација( или погоршање) хроничног процеса.ИгМ антитела циркулишу у просјеку око 3 мјесеца, онда њихов број постепено нестаје.Међутим, код неких пацијената, трагичне количине ИгМ могу бити откривене у року од 1-2 године од времена инфекције.

Модерни тестни системи су веома осетљиви, што резултира неспецифичним лажно позитивним резултатима( често код трудница).Због тога, у овој групи пацијената, треба поново провјерити позитиван ИгМ!

ИгА антитела појављују се 2-4 недеље након инфекције, али у количини која је довољна за откривање - за месец дана.Серум ИгА синтетисан плазма ћелија слезине, лимфни чворови и слузокоже секреција ИгА концентрисао на слузокоже да обавља своју заштитну функцију - укључене у локалној имунитет.

Од четврте недеље након инфекције, ИгГ почињу да се појављују антитела.Код већине инфекција, њихов титар се постепено повећава са максимом у различитим временима( у просеку после 1,5-2 месеца), онда титер остаје на ниском нивоу и указује на имунитет.Код неких болести( микоплазмоза, кламидија, трихомонијаза), ниво ИгГ није висок, значајно се смањује због недостатка имунитета код ових инфекција.Извођења

детекција антитела различитих класа:

- откривања антитело изоловано ИгМ претпоставља
примарну инфекцију.
- истовремену детекцију ИгМ крви и ИгГ карактеристичним
примарне инфекције у претходних 2-3 месеца, као и погоршања хроничног обољења.Стога, у трудноћи, присуство ИгМ није увек знак примарне инфекције.
- Детекција изолованог ИгГ може указивати и на имунитет на болест,
и хроничну инфекцију.У другој ситуацији, број антитела( титар) је такође важан, а промјена у овом титеру је у динамици.Обично се студије спроводе у интервалима од 2-4-6 недеља.
- Детекција ИгА изолованих или са ИгМ указује на примарну инфекцију.Код
, појављивање ИгА заједно са ИгГ очекује се да активира хроничну инфекцију( у просеку 2 недеље од тренутка погоршања).

Дефинитион авидитета ИгГ антитела је одлична допуна дијагностици стадијуму примарне инфекције из дугогодишњем инфекције, који има клинички значај, нарочито приликом процене ризика интраутерине инфекције плода.Детекција ИгГ ниског степена указује на примарну инфекцију и открива се у просеку 4-6 месеци након инфекције, што је мање често дуже.ИгГ са ниском дозом захтева друге лабораторијске доказе о примарној инфекцији( ИгМ).Висока антитела су или знак хроничне болести и њено погоршање, или формираног имунитета.

посебно код деце: код деце испод једне године, а понекад чак 1,5 година у крви циркулишу мајки ИгГ антитела на различите инфекције( тј, било је њихово продирање кроз плаценту са мајке на фетус у материци).То по себи није знак заразе у садашњости.Ако се у истој доби пронађе ИгМ( подсјетимо да матерински ИгМ не може продрети у плаценту), онда је то знак интраутерине инфекције или стечене инфекције након рођења.

Квантитативни ЕЛИСА метод

дијагностички ресултс

ЕЛИСА( коришћењем ензима имуноанализирајуће анализатора) издаје у специфичним јединицама:
- оптичка густина( ОД) узорка - концентрације специфичног антитела по јединици запремине.Што је већи ОП узорак, већа је концентрација антитела.Неки резултати се односе на коефицијент позитивности( КП) - ово је и оптичка густина узорка.
- Јединице концентрације антитела( нанограм / милилитер или нг / мл).
- у облику серумских титара: 1:20, 1:40, 1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1200 и тако даље.Дијагностички титри( у којима је дијагностикован болест, а не чињеница инфекције) различитих болести су различити.
- У облику симбола - "+", "-", "?"( +, ++, +++, ++++).
- У облику квалитативне процене засноване на датом критеријуму( позитивном или негативном).

правилно процените износ антитела варијанти имуноглобулина идентификације класе, а самим тим, излажу стадијум болести и потребу за само доктор може да третира.

не треба заборавити да је њихова "референтна вредност"( реализације норма), а изнад којег одређена дијагностикована болест( варијанте патологију) развијен за било тест систему.За различите тестне системе, "референтне вредности" су различите.

Правилно поређење ЕЛИСА резултата у динамици је могуће само ако се производе у истој лабораторији.

Лекар инфектсионист Бикова Н.И.