Preiskava encimov in izoencimov

Encimi so specifični proteini, ki izpolnjujejo vlogo bioloških katalizatorjev v telesu. Encimi so v vseh celicah telesa, kjer je njihova koncentracija veliko višja kot v krvni plazmi. Serum

krvi, katere encimska sestava je sorazmerno konstantna, se najpogosteje uporablja kot predmet raziskovanja. Običajno encimska aktivnost v serumu odraža razmerje med biosintezo in sproščanje encimov( pri normalnem dopolnitvi celic) in njihovo odstranitev iz krvnega obtoka. Povečanje stopnje obnovitve encimov, poškodbe celic običajno povzroči povečanje aktivnosti encimov v serumu. V serumu krvi se razlikujejo tri skupine encimov: celični, sekretorni in izločevalni.

celični encimi, odvisno od lokacije v tkivu razdeljen v dve skupini:

■ nespecifični encimi, ki katalizirajo skupna vsa tkiva izmenjavo reakcije in so v večini organov in tkiv;

■ organski specifični ali indikatorski encimi, specifični samo za določeno vrsto tkiva.

Serumska aktivnost celičnih encimov je nizka ali ni prisotna. V patoloških procesih je aktivnost encimov te skupine v serumu odvisna od stopnje sproščanja iz celic, kar pa je odvisno od stopnje in stopnje njihove poškodbe.

sekretornih encime( ceruloplazmin, pseudocholinesterase, lipopro-lipaze beljakovinski polimeri) vstopijo neposredno v krvni plazmi in opravljajo posebne funkcije v njej. Ti encimi se sintetizirajo v jetrih in se nenehno sproščajo v plazmo. Njihova aktivnost v serumu je višja kot v celicah ali tkivih. V klinični praksi so zanimivi, če njihova aktivnost v krvnem serumu postane nižja od normalne zaradi motenj delovanja jeter. Izločanja tvorjene

encimi prebavil( pankreasa, črevesni sluznici, jeter, žolčnega trakta endotelij).Te vključujejo a-amilazo, lipazo, alkalno fosfatazo itd. Običajno je njihova serumska aktivnost nizka in konstantna. Vendar pa je pri patologiji, kadar je katerakoli od običajnih poti izločanja blokirana, aktivnost teh encimov v serumu bistveno poveča.

Izmerjena aktivnost encimov je lahko posledica prisotnosti zelo blizu lastnosti, a nekoliko drugačnih molekulskih oblik encimov. Te različne oblike se imenujejo izoencimi.Študija izoencima v klinični praksi kraji, tvorjen pri posamezni izoencima v različnih tkivih( npr različni LDH izoencima prevladujejo v centru in jeter).

Za količinsko opredelitev dejavnosti encimov je Komisija za encime mednarodne biokemijske unije priporočila standardno mednarodno enoto( ie).Enota aktivnosti katerega koli encima je vzeta kot njena količina, ki v optimalnih pogojih katalizira pretvorbo 1 μmol substrata na minuto( μmol / min).

Aktivnost encima se ocenjuje s hitrostjo katalizirane reakcije pri določeni temperaturi in pH medija, koncentracijo substrata. Zato je pri določanju aktivnosti encimov strogo treba upoštevati iste pogoje.

Encimatska reakcija je občutljiva na spremembe temperature. Običajno se izvaja pri temperaturi v območju

od 25-40 ° C, vendar pri različnih temperaturah je optimalen pH, pufer, substrat in drugi parametri različni. Največjo aktivnost večine encimov v človeškem telesu opazujemo pri temperaturi približno 37 ° C.Zato se za namene mednarodne standardizacije izvajajo meritve aktivnosti encimov pri določeni temperaturi. Pod normalno vrednostjo encimske aktivnosti so podane pri temperaturi 37 ° C.Študija

encimi, ki se uporabljajo v klinični praksi za različne naloge: diagnostiko, diferencialno diagnozo, ugotavljanje dinamike bolezni, ugotoviti učinkovitost zdravljenja, rekuperacijo stopnjo in prognozo. V primeru patologije so znane tri vrste sprememb encimov: hiperferment-mia - povečana aktivnost encimov v primerjavi z normo, hipofrekcija - njeno zmanjšanje, disfermentacija - pojav encimov v krvi, ki se običajno ne zaznavajo.