Verižna reakcija v polimerazi pri diagnostiki nalezljivih bolezni

PCR - ena od metod za diagnostiko DNA, ki omogočajo povečanje števila kopij zaznavno odseka genoma( DNK) bakterij ali virusov uporablja encima DNA polimeraze milijonkrat. Segment nukleinske kisline, ki se preizkuša za dani genom, se večkrat pomnožuje( pomnoži), kar omogoča, da se identificira. Prvič, molekula DNK bakterij ali virusov s segrevanjem razdelimo v dve verigi, nato v prisotnosti sintetiziranih DNA primerjev( zaporedje nukleotidov, ki so značilna za opredeljeno genomske) se jih veže s komplementarnimi odsekov DNA, sintetizirane druga veriga nukleinske kisline po vsakem primerjem v prisotnosti termostabilne DNA polimeraze. Dve molekuli DNA dobimo. Postopek se ponovi večkrat. Za diagnozo zadostuje ena molekula DNA, to je ena bakterija ali virusni delec. Reagiranje dodaten korak - sintezo DNK molekule RNA z uporabo encima reverzne transkriptaze - je dovoljeno preizkusiti RNA virusov kot je virus HCV.PCR - tristopenjski postopek, ponavljajoče cikluse denaturaciji, prileganje začetnih oligonukleotidov, sinteza DNK( polimerizacija).Sintetizirano količino DNK identificira ELISA ali elektroforeza.

PCR se lahko uporablja različne biološkega materiala - seruma ali krvne plazme, strganje sečnice, biopsija, plevralni tekočini, cerebrospinalni tekočini, itdPrvi PCR smo uporabili za diagnosticiranje nalezljivih bolezni, kot so HBV, HCV, HBV infekcije CMV, infekcijska spolno prenosljivo okužbo( gonoreja, smeti diynaya, miko plazme, okužba ureaplasmal), tuberkuloza, HIV in tako naprej.e.

PCR prednost pri diagnostiki infekcijskih bolezni v primerjavi z drugimi metodami študije je, kot sledi:

■ infekcijsko sredstvo se lahko odkrije v vsakem biološkem okolju organizma, vključno s tistimi materialov, dobljenih z biopsijo;

■ Diagnoza nalezljivih bolezni v najzgodnejših stadijih bolezni;

■ kvantitativno vrednotenje rezultatov študij( koliko virusov ali bakterij vsebujejo v raziskavi);

■ visoka občutljivost metode;npr občutljivost PCR za odkrivanje HBV virusno DNA v krvi je 0.001 pg / ml( približno 4h102 kopij / ml), medtem ko je občutljivost metode DNK hibridizacije pomočjo razvejane sond - 2,1 pg / ml( približno 7h105 kopij / ml).