Detectarea virusului hepatitei C
HCV în material este în mod normal absent.
Spre deosebire de HCV metode serologice de diagnostic în care detectează anticorpii HCV, PCR poate detecta prezența ARN HCV și cuantifica direct concentrația sa în materi testul
le. Testul are specificitate specifică și sensibilitate ridicată: zece molecule ARN de HCV din materialul test sunt suficiente pentru detectarea acestuia. Detectarea anticorpilor HCV confirmă numai faptul de infectare a pacientului, dar nu oferă o indicație de infecție activă( virusul pentru replicare) și prognosticul bolii. In plus, anticorpii HCV detectate în sângele pacienților cu hepatită acută și cronică, precum și la acei pacienți care sunt bolnavi și recuperate, și de multe ori AT în sânge apar la doar câteva luni după debutul bolii clinice, ceea ce face dificil de diagnosticat. Detectarea VHC în sânge prin PCR este o metodă de diagnosticare mai informativă.Detectarea ARN-ului VHC în PCR mărturisește viremia, permite judecarea replicării virusului în organism și servește drept unul dintre criteriile pentru eficacitatea terapiei antivirale. Detectarea ARN-ului VHC prin PCR în stadiile incipiente ale dezvoltării unei infecții virale pe fundalul absenței totale a oricărui marker serologic poate servi drept cea mai veche dovadă a infecției. Cu toate acestea, detectarea izolată a ARN-ului VHC pe fundalul absenței totale a oricărui alt marker serologic nu poate elimina complet rezultatul fals pozitiv al PCR.În astfel de cazuri, este necesară o evaluare cuprinzătoare a studiilor clinice, biochimice și morfologice, cu confirmarea repetată repetată a prezenței infecției PCR.Algoritmul pentru diagnosticarea VHC utilizând metoda PCR este prezentat în Fig.
mare importanta este aplicarea PCR la pacientii cu VHC cronica, deoarece cele mai multe dintre ele nu au nici o corelație între prezența replicării virale și activitatea enzimelor hepatice.În astfel de cazuri, numai PCR permite judecarea prezenței replicării virale, mai ales dacă rezultatul final este exprimat cantitativ.În cele mai multe cazuri, dispariția ARN-ului HCV din serul de sânge are loc mai târziu decât normalizarea enzimelor hepatice, astfel încât normalizarea lor nu poate servi ca bază pentru oprirea tratamentului antiviral.
importanță practică pentru detectarea ARN HCV prin PCR pentru a examina nu numai serul sanguin, ci și limfocite, gepatobioptaty. Virusurile pot fi detectate de 2-3 ori mai des în țesutul hepatic decât în ser. Atunci când se evaluează rezultatele studiului serului de sânge pentru ARN VHC, trebuie amintit că viremia poate fi fluctuantă în natură( cum ar fi schimbarea activității enzimatice).Prin urmare, după rezultatele pozitive ale studiului PCR, se poate obține un rezultat negativ și viceversa.În astfel de cazuri, pentru a rezolva îndoielile care apar, este mai bine să se investigheze hepatobiobatii.
Detectarea ARN-ului HCV într-un material folosind PCR este utilizată în următoarele scopuri:
■ Rezolvarea rezultatelor discutabile ale studiilor serologice;
■ diferențierea VHC de alte forme de hepatită;
■ detectarea stadiului acut al bolii în comparație cu infecția sau contactul transferat;stadiul de infectare a nou-născuților de la mame seropozitive cu VHC;
■ monitorizarea eficacității tratamentului antiviral.
Toate caracteristicile de mai sus ale evaluării rezultatelor și abordărilor pentru diagnosticarea VHC folosind PCR sunt relevante pentru alte infecții.
Metoda PCR permite nu numai detectarea ARN-ului HCV în materialul testat, ci și stabilirea genotipului său. Determinarea genotipului virusului este de mare importanță pentru selectarea pacienților cu VHC cronic în tratamentul interferonului-alfa și ribavirinei. Indicațiile de laborator pentru tratamentul interferonului cronic al VHC cronice sunt următoarele:
■ activitate crescută a transaminazelor;
■ prezența ARN-ului VHC în sânge;
■ genotipul 1 HCV;
■ viremie crescută în sânge( mai mult de 8x105 copii / ml).
Acum este posibilă determinarea cantitativă a conținutului de ARN al HCV în serul de sânge prin PCR, care are o mare importanță pentru tratamentul tratamentului cu interferon alfa. Nivelul de viremie este evaluat după cum urmează: pentru ARN VHC de la 102 la 104 copii / ml - slab;de la 105 la 107 copii / ml - mediu, de peste 108 copii / ml - înaltă.Cu un tratament eficient, nivelul viremiei scade.