Investigarea enzimelor și izoenzimelor

Enzimele sunt proteine ​​specifice care îndeplinesc rolul de catalizatori biologici în organism. Enzimele sunt conținute în toate celulele corpului, unde concentrația acestora este mult mai mare decât în ​​plasma sanguină.Serul

al sângelui, a cărui compoziție a enzimelor este relativ constantă, este cel mai adesea folosit ca obiect de cercetare. Activitatea enzimatică normală în ser reflectă raportul dintre biosinteza și eliberarea enzimelor( în actualizarea celulelor normale) și clearance-ul lor din fluxul sanguin. O creștere a ratei de reînnoire a enzimelor, deteriorarea celulelor duce de obicei la o creștere a activității enzimelor din ser.În serul de sânge, se disting trei grupuri de enzime: celulare, secretoare și excretoare.enzimele celulare

în funcție de locație în țesutul împărțit în două grupe:

■ enzime care catalizează nespecifice comune tuturor țesuturilor și face schimb de reacții sunt în cele mai multe organe și țesuturi;

■ enzime specifică pentru organe sau indicatoare specifice numai pentru un tip de țesut specific.

Activitatea serică a enzimelor celulare este scăzută sau inexistentă.În procesele patologice, activitatea enzimelor din această grupă în ser depinde de viteza de eliberare din celule, care la rândul ei este determinată de viteza și gradul lezării lor.enzime secretorii

( ceruloplasmina, pseudocolinesterază, polimeri de proteine ​​lipopro-lipază) intră direct în plasma din sânge și de a efectua funcții specifice în acesta. Aceste enzime sunt sintetizate în ficat și sunt eliberate în mod constant în plasmă.Activitatea lor în ser este mai mare decât în ​​celule sau țesuturi.În practica clinică, acestea prezintă interes atunci când activitatea lor în serul de sânge este mai scăzută decât în ​​mod normal din cauza funcției hepatice afectate. Excretoare enzime

formate organelor digestive( pancreas, mucoasa intestinală, ficat, endoteliul tractului biliar).Acestea includ a-amilază, lipază, fosfatază alcalină etc. În mod normal activitatea lor serică este scăzută și constantă.Totuși, în patologie, atunci când oricare dintre căile obișnuite de excreție este blocată, activitatea acestor enzime în ser crește semnificativ.

Activitatea măsurată a enzimelor se poate datora prezenței proprietăților moleculare foarte similare ale enzimelor, care sunt foarte asemănătoare în proprietăți, dar diferă una de cealaltă.Aceste forme diferite se numesc izoenzime.izoenzime studiu in practica clinica este de interes, format atunci când izoenzimelor individuale în diferite țesuturi( de exemplu, diferite izoenzime LDH predomină în inimă și ficat).

Pentru cuantificarea activității enzimatice, Comisia pentru Enzime a Uniunii Internaționale pentru Biochemie a recomandat o unitate internațională standard( UI).O unitate de activitate a oricărei enzimă lua suma care în condiții optime catalizează conversia 1 micromol de substrat într-un minut( pmol / min).

Activitatea enzimei este evaluată prin rata de reacție catalizată la o anumită temperatură și pH a mediului, concentrația substratului. Prin urmare, atunci când se determină activitatea enzimelor, trebuie respectate cu strictețe aceleași condiții.

Reacția enzimatică este sensibilă la schimbările de temperatură.Se face de obicei la o temperatură în intervalul

de 25-40 ° C, dar la temperaturi diferite, pH-ul optim, tamponul, substratul și alți parametri sunt diferiți. Activitatea maximă a majorității enzimelor din corpul uman este observată la o temperatură de aproximativ 37 ° C.Prin urmare, în scopul standardizării internaționale, măsurătorile activității enzimatice se efectuează la o anumită temperatură.Sub valorile normale ale activității enzimatice sunt date pentru o temperatură de 37 ° Cenzime

studiu utilizate în practica clinică pentru diferite sarcini: diagnostic, diagnostic diferențial, evaluarea dinamicii bolii, a determina eficacitatea terapiei, gradul de recuperare și prognoză.Există trei tipuri de enzime schimbari in patologia: giperfermente MIA - activitatea enzimelor a crescut decât conținutul normal, hipo enzima - disfermentemiya declin - în apariția enzimelor din sânge, care nu sunt în mod normal găsit.