Variação analítica

A variação analítica do método de pesquisa utilizado tem uma grande influência nos resultados dos estudos laboratoriais. Os principais critérios para avaliar o método de investigação são precisão, reprodutibilidade, especificidade, sensibilidade.

■ Precisão caracteriza a validade do método na determinação do valor exato( concentração) de uma substância. Por exemplo, a diferença sistemática entre os resultados da determinação de sódio em uma amostra de mais de 3 mmol / l é considerada inaceitável. Por outro lado, a diferença mais significativa entre as concentrações de certos hormônios determinados por ELISA com AT diferente é considerada aceitável, uma vez que o uso de diferentes medicamentos AT dá diferentes efeitos matriciais. Por este motivo, vários intervalos de valores de referência são estabelecidos para métodos imuno-enzimáticos individuais para determinar hormônios.

■ A reprodutibilidade do método é avaliada medindo a concentração de uma substância na mesma amostra várias vezes em um único dia e em uma série de amostras. No dia seguinte, eles fazem as mesmas medidas com a mesma amostra. Normalmente, os desvios nas medidas estão sujeitos à lei gaussiana, o que indica a estabilidade do método. Para cada série de medidas, calcule o valor médio( Xcp).Em seguida, encontre a diferença entre o valor de cada medição e esta média e calcule o desvio padrão( S) eo coeficiente de variação( V).Determine o coeficiente de variação em outros dias e, se não exceder 5%, o método de investigação é considerado adequado. Para as enzimas, V pode atingir 10%.É responsabilidade de cada laboratório verificar a reprodutibilidade dos métodos, que são estimados a partir do desvio padrão( SD).Por exemplo, a reprodutibilidade na determinação da concentração de colesterol total no soro sanguíneo em um bom laboratório geralmente é na média de +0,13 mmol / l. Sabe-se que o intervalo de confiança de 95% é + 2SD, que neste caso corresponde a 0,26 mmol / l. Assim, cada resultado é considerado verdadeiro se estiver dentro desses limites( +0,52 mmol / l).Assim, a concentração de colesterol total no soro sanguíneo é de 5,18 mmol / l, o que significa que o valor verdadeiro está entre 4,92 e 5,44 mmol / l.

■ Especificidade - a capacidade de um método para medir apenas o componente para o qual se destina. Para avaliar a especificidade analítica, utilizam-se impurezas que, com base na estrutura química, são representantes representativos desses grupos de substâncias que, fisiologicamente, têm significância prática

.Em maior medida, isso se aplica a medicamentos que podem causar interferência química durante a análise. A baixa especificidade ea influência da interferência conduzem a um resultado incorreto( não deve ser confundido com a especificidade do método de patologia).

■ A sensibilidade analítica do método é a menor quantidade de substância( a menor concentração) que pode ser detectada por este método. Este conceito deve ser distinguido da sensibilidade do método em relação à detecção de uma patologia particular. Ao escolher o método de pesquisa, é necessário prestar muita atenção à sensibilidade analítica do método, uma vez que a qualidade dos resultados da pesquisa depende disso. Por exemplo, a Ordem nº 282 do Ministério da Saúde da Federação Russa de 28.09.98 "Sobre o uso de sistemas de enzimas imunológicas para detecção de vírus da hepatite B superficial( HBsAg) e vírus anti-hepatite C( anti-HCV) em soros humanos"sistemas para a detecção de HBsAg, cuja sensibilidade é superior a 0,5 ng / ml, bem como sistemas de teste para a detecção de anti-HCV que não contenham proteínas codificadas pelo RNA do vírus da hepatite C NS3. O uso de sistemas de teste para a detecção de HBsAg com sensibilidadeacima de 0,5 ng / ml e não contendo proteína na sua composiçãoem, codificado pela zona NS3 do RNA do vírus da hepatite C, leva ao fato de que a hepatite B e C viral em vários pacientes não são diagnosticadas.

A variação analítica, dependendo dos métodos utilizados e das condições de sua implementação, amplia os limites dos indicadores laboratoriais normais, o que limita a possibilidade de testes laboratoriais para distinguir entre saúde e doença. Portanto, os especialistas em laboratório devem se esforçar para reduzir a variação analítica. Na tabela.os limites máximos permitidos da variação analítica( espalhamento) dos componentes analisados ​​são fornecidos.

Os valores da variação analítica permitida( V) são considerados valores indicativos médios. Essas variações, dadas para leucócitos e eritrócitos, referem-se ao cálculo de elementos celulares por métodos manuais, com o uso de analisadores hematológicos, o coeficiente de variação analítica para leucócitos é 1-3%, para eritrócitos 1-2%, plaquetas 2-4% [Elevitch FR etal., 1987;Koepke, J. A., 1993].

A confirmação de que a variação analítica do método pode ter um efeito significativo nos resultados do estudo é fornecida na Tabela.dados de intervalo de confiança de 95% ao calcular a fórmula de sangue de leucócitos, obtidos com base na análise estatística.

Assim, ao avaliar os resultados dos estudos de laboratório, o médico deve levar em conta a variedade de fatores que afetam os resultados, conhecer a confiabilidade analítica dos métodos laboratoriais de pesquisa, ou seja, ter certeza da precisão da informação obtida com sua ajuda sobre os componentes relevantes do biomaterial. O conhecimento do grau de variabilidade dos resultados dos estudos é importante para comparação com a variabilidade biológica, bem como para comparação com mudanças clinicamente significativas nos indicadores laboratoriais. Esses critérios são determinados ao desenvolver métodos, indicam em sua descrição e, se necessário, o médico do laboratório deve informar o clínico sobre isso. Tabela

Limites máximos permitidos para variação analítica( variação) para vários componentes( Compendium of Laboratory Diagnostic Methods, 1984 6.1. CMLD)

O clínico precisa considerar os seguintes fatos nos níveis técnico e biológico da avaliação dos resultados laboratoriais.

■ A comparação do resultado da análise com o intervalo de referência dos valores correspondentes indica apenas a probabilidade de conformidade ou não conformidade deste resultado com a norma.

■ Existem diferenças fisiológicas em valores normais e variações fisiológicas do dia a dia( variação biológica).

■ Existem pequenas diferenças técnicas nos resultados das análises obtidas em diferentes dias( variação analítica do método).

■ Os intervalos de referência podem variar de acordo com diferentes métodos laboratoriais.

■ A alteração no conteúdo do componente de teste pode ser inespecífica e não associada a um transtorno metabólico primário deste componente( interferência, hemólise, lipemia, uso de drogas, etc.).

■ Existem variações aleatórias, cujas causas não estão atualmente claras, mas devem ser levadas em consideração ao interpretar os resultados de análises repetidas;por exemplo, as variações diárias na concentração de ferro no sangue são muito grandes e podem dificultar a identificação dos padrões de mudanças nesse componente.

■ Ao examinar plasma ou soro sanguíneo, é obtida informação sobre as concentrações extracelulares dos componentes do teste. Estas concentrações dependem da quantidade de água no espaço extracelular em relação à quantidade do componente que está sendo medido e pode nem sempre refletir o nível intracelular das substâncias de teste.