Påvisning av hepatitt C-viruset
HCV i materialet er normalt fraværende.
motsetning til HCV serologiske diagnostiske metoder hvor påvise antistoffer mot HCV, kan PCR påvise tilstedeværelse av HCV RNA og direkte kvantifisere dets konsentrasjon i testen mater
le. Testen har spesifikk spesifisitet og høy følsomhet: ti HCV RNA-molekyler i testmaterialet er tilstrekkelig for dets deteksjon. Påvisning av antistoffer til HCV bare bekrefter det faktum av pasientens infeksjon, men gir ikke en indikasjon på aktiv infeksjon( virus for replikasjon) og utviklingen av sykdommen. I tillegg er antistoffer mot HCV påvist i blodet hos pasienter med akutt og kronisk hepatitt, så vel som i de pasienter som er syke og gjenvinnes, og ofte AT i blodet vises bare noen få måneder etter begynnelsen av klinisk sykdom, noe som gjør det vanskelig å diagnostisere. Detektering av HCV i blodet ved hjelp av PCR er en mer informativ diagnostisk metode. Identifisering av HCV-RNA ved PCR bevis på viremi, gir en indikasjon på virusreplikasjon i kroppen, og er ett av kriteriene for effektiviteten av antiviral terapi. Deteksjon av HCV RNA ved PCR i de tidlige stadiene av utviklingen av en virusinfeksjon mot bakgrunnen av det totale fraværet av serologiske markører, kan tjene som tidligste tegn på infeksjon. Den isolerte deteksjon av HCV RNA mot bakgrunnen av det totale fravær av andre serologiske markører kan imidlertid ikke helt eliminere det falske positive resultatet av PCR.I slike tilfeller er en omfattende evaluering av kliniske, biokjemiske og morfologiske studier nødvendig, med gjentatt gjentatt bekreftelse av forekomsten av PCR-infeksjon. Algoritmen for diagnostisering av HCV ved hjelp av PCR-metoden er vist i fig.
stor betydning er anvendelsen av PCR hos pasienter med kronisk HCV, siden de fleste av dem har ingen sammenheng mellom forekomsten av viral replikasjon og aktiviteten av leverenzymer. I slike tilfeller tillater kun PCR å dømme tilstedeværelsen av viral replikasjon, spesielt hvis sluttresultatet uttrykkes kvantitativt. I de fleste tilfeller forekommer forsvinden av HCV RNA fra blodserum senere enn normaliseringen av leverenzymer, slik at deres normalisering ikke kan tjene som grunnlag for å stoppe antiviral behandling.
praktisk betydning for å påvise HCV-RNA ved PCR for å undersøke ikke bare blodserum, men også lymfocytter, gepatobioptaty. Virus kan oppdages 2-3 ganger oftere i levervev enn i serum. Ved evaluering av resultatene av studien av blodserum for HCV RNA, bør det huskes at viremia kan variere i naturen( som forandringen i enzymaktivitet).Derfor, etter positive resultater fra PCR-studien, kan et negativt resultat oppnås og omvendt. I slike tilfeller, for å løse tvilene som oppstår, er det bedre å undersøke hepatobiobater.
Detektering av HCV RNA i et materiale som bruker PCR, brukes til følgende formål:
■ Oppløsning av tvilsomme resultater av serologiske studier;
■ Differensiering av HCV fra andre former for hepatitt;
■ Deteksjon av akutt stadium av sykdommen i forhold til overført infeksjon eller kontakt;Infeksjonsstadiet av nyfødte fra seropositive HCV-mødre;
■ overvåke effekten av antiviral behandling.
Alle de ovennevnte funksjonene i evalueringen av resultater og tilnærminger til diagnosen HCV ved bruk av PCR er relevante for andre infeksjoner.
PCR-metoden tillater ikke bare å detektere HCV RNA i testmaterialet, men også å etablere sin genotype. Bestemmelse av virusets genotype er av stor betydning for valget av pasienter med kronisk HCV ved behandling av interferon-alfa og ribavirin. Laboratorie indikasjoner for behandling av kronisk HCV interferon alfa er som følger:
■ økt aktivitet av transaminaser;
■ Tilstedeværelse av HCV RNA i blodet;
■ genotype 1 HCV;
■ høy viremi i blodet( mer enn 8x105 kopier / ml).
Det er nå mulig å kvantifisere HCV RNA-innholdet i blodserumet ved hjelp av PCR, noe som er av stor betydning for behandling av interferon alfa-behandling. Nivået på viremia vurderes som følger: for HCV RNA fra 102 til 104 kopier / ml - svak;fra 105 til 107 kopier / ml - medium, over 108 kopier / ml - høy. Med effektiv behandling reduseres nivået av viremia.