Immunofenotyping av hemoblastoser

Betydelig fremgang i hematologiske studier forbundet i de senere år med bruk av moderne immunologiske metoder og verktøy for automatisert analyse og sortering celler i perifert blod og benmarg - væskestrømsfotometere. Tradisjonelle morfologiske og cytokjemisk studium av substratet cellesykdom( blod, rød benmarg, lymfeknuter, milt, etc.), i mange tilfeller, særlig i lymfoproliferative sykdommer, avslører ikke hele utvalg av muligheter blant morfologisk like former og identifisere opprinnelsen til patologiske klon. Disse problemene kan kun løses ved å studere de immunologiske egenskapene til cellene. Hvert trinn av differensiering hemo-poetiske celle har sitt eget sett av Ar, som påkaller den internasjonale klassifisering av differensiering og differensiering er delt inn i grupper, betegnet CD.Ved blokk differensiering av neoplastiske forandringer kan forekomme på hvilket som helst stadium av normal celleutvikling, noe som resulterer i en patologisk celleklone som danner underlaget sykdom, og som har den samme immunologiske( eller fenotypisk) karakteristikk. Etter en undersøkelse av disse markørene i celler kan bestemmes ved en hvilken som helst form eller utførelse av sykdommen er konsistente, dvs. på basis av immunologisk cellefenotype differensialdiagnose, som er den vanskeligste i lymfoproliferative sykdommer, fordi de viktigste cellesubstrat patologiske sykdommer som er nesten den samme type celler morfologisk. Fenotyping tillater anvendelse av monoklonale antistoffer typisk eksempel på blastiske og modne myeloid blodceller, mono-, lymfatisk serie, i nærvær av differensiering-paid-Ar( reseptorer) i celleveggen. På membranene av blodceller og rødt benmarg kan følgende Ar( markører) identifiseres.

■ CD2 er et monomert transmembran glykoprotein. Det er til stede på overflaten av sirkulerende T-lymfocytter og noen NK-lymfocytter. CD2 deltar i prosessen med alternativ aktivering av T-lymfocytter. Påvisning via CD2 monoklonale antistoffer anvendt i klinisk praksis for Fenaughty fest-akutt T-celle leukemi, lymfom, kroniske inflammatoriske og immunsvikttilstander.

■ CD3 - protein-komplekset i forbindelse med Ag-spesifikke T-celle-reseptor, er den viktigste funksjonell markør for T-lymfocytter. Det letter overføringen av aktiveringssignalet fra

-membranen til cytoplasmaet til cellen. Bestemmelse av CD3 indikert for diagnostisering av akutt T-celle leukemi, lymfomer( CD3 ikke uttrykt i ikke-T-celle-lymfoid neoplasma) og immunsviktsykdoms-sjon.

■ CD4 - transmembran glykoprotein uttrykt av en undergruppe av T-hjelper( induktorer) utgjør 45% av de perifere blod lymfocytter., Så vel som CD8, uttrykt i de tidlige stadiene av lymfocytt utvikling i thymus Az av CD4, alle kortikale lymfocytter. Marg thymocytter, noe som er lik den fenotypen av modent CD4 + perifere blod T-celler( T-hjelpeceller), ekspresjon-ruyut har enten CD4 eller CD8-reseptorer. I perifert blod merkes opptil 5% av cellene samtidig CD4 og CD8.Svakt uttrykk for CD4 er mulig på enkelte monocytceller. CD4 er uttrykt i de fleste tilfeller, T-celle lymfom, inkludert mycosis fungoides, og i HTLV-assosierte T-celle leukemi( HTLV - human T-lymfotropisk virus - T lim-fotropny humant virus).

■ CD5 - enkeltkjedet glykoprotein som er til stede på alle modne T-lymfocytter og flertallet av thymocyttene er svakt uttrykt ved B-lymfocytter. CD5 detektert på neoplastiske B-celler klebemiddel-raffinere kronisk lymfatisk leukemi og lymfom tsentrotsitarnoy. I andre typer av maligne lymfoide sykdommer - follikulære lymfom, hårcelle leukemi, stor cellelymfom - CD5 ikke uttrykt.

■ CD7 er et enkeltstrenget protein, den tidligste markøren for T-celledifferensiering. Det uttrykkes av pro-T-lymfocytter selv før de migrerer til tymus. CD7 detekteres på de fleste NK-celler, svakt uttrykk er notert på monocytter. B-lymfocytter og granulocytter inneholder ikke denne Ag. CD7 definisjon anvendt for å diagnostisere lymfom, barndom T-celle-lymfoblastisk leukemi.

■ CD8 er et protein bestående av to polypeptidkjeder koblet med disulfidbroer. Det uttrykkes subpopulasjon Qi totoksicheskih og suppressor T-lymfocytter, som utgjør 20-35% av lymfocytter fra perifert blod. Dette Ar har også NK-celler, thymocytter, cortical 30% medullær thymocytt-ing og subpopulasjon av benmargceller. CD8 undersøkt for å kvantifisere innholdet av T-suppressor

■ CD 10 - assosiert med cellemembranen til endopeptidase. CD10 uttrykker unge former for B-lymfocytter og en subpopulasjon av kortikale lymfocytter. CD10 uttrykker alle celler av ALL.

■ CD11c ekspress makrofager, monocytter, granulocytter, NK celler og celler av hårete celle leukemi på cellemembranen.

■ CD13 er et glykoprotein uttrykt av myelomonocytiske celler( stamceller, nøytrofiler, basofiler, eosinofiler, monocytter og myeloid leukemiceller).Det er fraværende i T. B-lymfocytter, erytrocytter og blodplater.

■ CD14 - overflate membran glykoprotein. Det uttrykkes hovedsakelig av monocytter og makrofager. CD14 bestemmes av mer enn 95% av perifert blod og benmargmonocytter på

.Sterk ekspresjon av CD14 er observert i akutt myeloblastisk leukemi. Ved akutt og kronisk lymfoblastisk leukemi er dette Ar ikke uttrykt.

■ CD15 er et oligosakkarid. Han deltar i prosesser av fagocytose og kjemotaksier. Denne Ar er tilstede på overflaten av modne granulocytter og Berezovsky-Sternberg-celler. Ekspresjon av Ar CD15 er påvist i Hodgkins sykdom. I ikke-Hodgkins limfomas er CD15 ikke detektert i de fleste tilfeller.

■ CD16 uttrykkes på overflaten av granulocytter, monocytter, makrofager og NK-celler. Alle lymfocytter som uttrykker denne Ar har evnen til antistoff-avhengig celle-cytotoksisitet. CD16 bestemmes når man skriver kronisk myelocytisk leukemi, for å karakterisere NK-celler.

■ CD 19 er et glykoprotein til stede på alle perifer B-lymfocytter, samt på alle B-celleforløpere. Det er fraværende på plasmaceller. Dette er den tidligste markøren for B-celler, spiller en viktig rolle i regulering av aktivering og spredning av B-lymfocytter. CD19 uttrykkes på alle neoplastiske celler av akutt leukemi av B-celle opprinnelse, og er også tilstede i noen former for akutt monoblast leukemi.

■ CD20 er et ikke-glykosylert protein. I ontogenesen av B-lymfocytter, vises Ar CD20 etter CD19 i scenen av pre-B-celledifferensiering av lymfocytter. Det er fraværende på plasmamembranen til plasmaceller. Det uttrykkes i ALL, B-celle kronisk lymfocytisk leukemi, hårete celle leukemi, Burkitt lymfom og svært sjelden i akutt monoblastisk leukemi.

■ CD21 er et glykoprotein, i en betydelig mengde er tilstede på B-lymfocytter i lymfoide organer og i liten mengde på B-celler i perifert blod. CD21 er en reseptor for Epna-Stein-Barr-virus.

■ CD22 er et protein bestående av to polypeptidkjeder. Det uttrykkes på membranen til de fleste B-lymfocytter, inkludert progenitorceller( prolymphocytter).Ar er ikke uttrykt på B-lymfocytter( plasmaceller) etter deres aktivering. Det mest uttalt uttrykk for CD22 detekteres på celler med hårfollikkel-nøyaktig leukemi, svak - i myeloid leukemier og ikke-T-celle ALL.

■ CD23 er et glykoprotein uttrykt av aktiverte B-limfocytter av perifert blod i mye større grad. CD23 medierer IgE-avhengig cytotoksisitet og fagocytose av makrofager og eosinofiler.

■ CD25 er et enkeltkjede glykoprotein identifisert som en lavaffinitetsreseptor for IL-2.Denne reseptoren uttrykkes på aktiverte T-lymfocytter og, med lavere tetthet, på aktiverte B-celler. I perifert blod av friske mennesker er Ar tilstede i mer enn 5% av lymfoide celler.

■ CD29 - Fibronektinreseptor. Det er utbredt i vev, det uttrykkes av leukocytter. Bestemmelsen av CD29 på Perida

-celler av ferrisblod brukes til å typifisere en T-celle-subpopulasjon som har en CD4 + CD29 + fenotype, kalt helper type 2( Th2).Disse cellene, gjennom produksjon av lymfokiner, deltar i realiseringen av den humoral immunresponsen.

■ CD33 - transmembran glykoprotein. Det er tilstede på overflaten av celler av myeloid og monocytisk serien. Det er funnet på overflaten av monocytter og, i mindre grad, granulocytter av perifert blod. Omtrent 30% av røde benmargceller uttrykker CD33, inkludert myeloblaster, promyelocytter og myelocytter. Ar er fraværende på membraner av polypotente stamceller. CD33 brukes til å karakterisere celler i myeloid leukemier. Leukemi celler av lymfoid og erythroid opprinnelse uttrykker ikke CD33.

■ CD34 - phosphoglycoprotein, uttrykt i hematopoetiske progenitorceller, inkludert stamceller monopotentnye. Det mest uttalte uttrykket for Ar er observert i tidlige progenitorer;Når cellene er modne, faller markørets uttrykk. CD34 finnes også på endotelceller. CD34 brukes til å karakterisere celler i akutt myelogen og lymfocytisk leukemi. I kronisk lymfatisk leukemi og Lim-fomah Ag CD34 ekspresjon blir ikke detektert.

■ CD41a uttrykkes av blodplater og megakaryocytter. Monocle-funksjonell-CD41a antistoffer for påvisning for diagnostisk bruk Me-gakarioblastnogo leukemi. Med Glązmann trombastheni er uttrykket av denne Ar fraværende eller signifikant undertrykt.

■ CD42b er et membran glykoprotein bestående av to polypeptidkjeder. Markøren er funnet på overflaten av blodplater og megakaryocytter. I klinisk praksis CD42b deteksjon for diagnostisk bruk thrombocytopathy - syndrom, Bernard-Soulier.

■ CD45RA tilhører en klasse av transmembrane glykoproteiner. Dette er en vanlig leukocytt Ag. Uttrykt på cellemembranen av B-lymfocytter i en mindre grad T-lymfocytter og modne medullære thymocytter. Markøren er ikke uttrykt av granulocytter.

■ CD45RO - lav molekylvekt isoform av CD45RA - total leukocytt-Ag. Identifisere T-celle( minne-T-celler) subpopulasjoner av B-lymfocytter, monocytter og makrofager. Monoklonale antistoffer til å interagere med de fleste CD45RO thymocytt subpopulasjon av hvilende CD4 + og CD8 + T-lymfocytter og modne aktiverte T-celler. Celler av myelomonocytisk opprinnelse, granulocytter og monocytter bærer også denne Ag. Det påvises med prenatale og immunoblastiske lymfomer.

■ CD46-O-glykosylert dimer. Det er vidt fordelt i vev og uttrykkes T- og B-lymfocytter, monocytter, gra-nulotsitami, NK-celler, blodplater, endotelceller, fibroblaster, men er fraværende på overflaten av erytrocytter. CD46 gir vevbeskyttelse mot komplementhandling.

■ CD61 - blodplate Ag. Det uttrykkes på blodplater, perifert blod og benmarg, samt på megakaryocytt- minutter og megakaryoblasts. Definisjonen er brukt som et merke av

ra for akutt megakaryoblastisk leukemi. Ekspresjon av Ar er fraværende eller undertrykt hos pasienter med Glanzmann trombasteni.

■ CD95, også kjent som Fas eller APO-1, - Gly-transmembran koprotein, familiemedlem av tumornekrosefaktor-reseptorer. Den uttrykkes i signifikante mengder i T-lymfocytter( CD4 + og CD8 +) perifert blod og, i mindre grad, B-lymfocytter og NK-celler. Denne Ar uttrykkes også på granulocytter, monocytter, vevceller og neoplastiske celler. Binding av CD95 til Fas-liganden( CD95L) inducerer apoptose i cellene.

■ CD95L, eller Fas-liganden, en membranprotein som tilhører familien av tumornekrosefaktor-reseptorer. Denne Ag uttrykkes av cytotoksiske T-lymfocytter, NK-celler og svært ofte tumorceller;den viktigste indusatoren for apoptose i celler.

■ HLA-DR - monomorfe klasse II-MHC-molekyler determinant menneske( HLA).Etsya markør blir uttrykt på Langerhans-celler, dendrittiske celler av lymfoide organer, og visse typer av makrofager, B-lymfocytter, aktiverte T-celler og tymus-epitelceller. Studier aktiv markør som brukes til å kvantifisere de aktiverte T-lymfocytter med en fenotype CD3 + HLA-DR +.

ved hjelp av forskjellige monoklonale antistoffer til seleksjonsmarkøren kan skape stående celle fenotypisk egenskap ved denne form for leukemi( tabell A-7-30).

Dessuten bruker immunfenotyping teknikker for diagnose og differensialdiagnose av hematologiske kreftformer, spesielt viktig slått deres anvendelse i behandlingen for å vurdere tilstanden til remisjon og gjenværende populasjon av leukemiceller.Å vite den fenotypiske "portrett" av blastceller i perioden diagnose, disse markørene den finner celle leukemi klone i remisjon, og fra økning i antall - å forutsi utviklingen av tilbakefall lang( for 1-4 måneder) før dens kliniske og morfologiske trekk.

Tabell immunophenotypic karakterisering av leukemi [Myers A. R., 1996]

Tabell immunophenotypic karakterisering av leukemi [Myers A. R., 1996]

Tabell immunfenotypen ALL [Rich R. R., 2001]

Tabell immunfenotypen ALL [Rich R. R., 2001]

End Table.

Slutten av tabellen.

Merk: cig q - cytoplasmatisk Ig c-kjede;sig q er en overflate Ig og en kjede.