Detectie van het hepatitis C-virus

HCV in het materiaal is normaal gesproken afwezig.

tegenstelling HCV serologische diagnostische werkwijzen waarbij antilichamen tegen HCV, PCR kan de aanwezigheid van HCV RNA te detecteren en zijn concentratie in de test materialen

le direct kwantificeren. De test heeft een specifieke specificiteit en hoge gevoeligheid: tien HCV-RNA-moleculen in het testmateriaal zijn voldoende voor detectie. Detectie van antilichamen tegen HCV bevestigt slechts het feit van infectie van de patiënt, maar geeft geen indicatie van actieve infectie( het virus replicatie) en de prognose van de ziekte te geven. Daarnaast antilichamen tegen HCV gedetecteerd in het bloed van patiënten met acute en chronische hepatitis, evenals bij patiënten die ziek zijn en teruggewonnen, en vaak is de AT in het bloed verschijnen slechts een paar maanden na het begin van de klinische ziekte, waardoor het moeilijk te diagnosticeren. De detectie van HCV in het bloed met behulp van PCR is een meer informatieve diagnostische methode. Identificatie van HCV RNA door PCR bewijs van viremie, geeft een indicatie van virusreplicatie in het lichaam en is één van de criteria voor de effectiviteit van de antivirale therapie. Detectie van HCV-RNA door PCR in de vroege stadia van de ontwikkeling van een virale infectie tegen de achtergrond van de volledige afwezigheid van serologische markers kan dienen als het vroegste bewijs van infectie. De geïsoleerde detectie van HCV-RNA tegen de achtergrond van de volledige afwezigheid van enige andere serologische markers kan het vals-positieve resultaat van PCR echter niet volledig elimineren. In dergelijke gevallen is een uitgebreide evaluatie van klinische, biochemische en morfologische onderzoeken nodig, met herhaalde herhaalde bevestiging van de aanwezigheid van PCR-infectie. Het algoritme voor het diagnosticeren van HCV met behulp van de PCR-methode wordt getoond in Fig.

groot belang is de toepassing van PCR bij patiënten met chronische HCV, aangezien de meeste van hen hebben geen correlatie tussen de aanwezigheid van virale replicatie en de activiteit van leverenzymen. In dergelijke gevallen maakt alleen PCR het mogelijk om de aanwezigheid van virale replicatie te beoordelen, vooral als het eindresultaat kwantitatief wordt uitgedrukt. In de meeste gevallen komt het verdwijnen van HCV-RNA uit bloedserum later dan de normalisatie van leverenzymen, dus hun normalisatie kan niet dienen als basis voor het stoppen van antivirale behandeling.

praktisch belang HCV RNA te detecteren door PCR om niet alleen het bloedserum onderzocht maar ook lymfocyten, gepatobioptaty. Virussen kunnen 2-3 keer vaker in het leverweefsel worden gedetecteerd dan in serum. Bij het evalueren van de resultaten van de studie van bloedserum voor HCV-RNA, moet eraan worden herinnerd dat viremie fluctuerend van aard kan zijn( zoals de verandering in enzymactiviteit).Daarom kan na positieve resultaten van de PCR-studie een negatief resultaat worden verkregen en omgekeerd. In dergelijke gevallen is het beter om hepatobiobaths te onderzoeken om de twijfels op te lossen die zich voordoen.

Detectie van HCV-RNA in een materiaal met behulp van PCR wordt gebruikt voor de volgende doeleinden:

■ oplossing van twijfelachtige resultaten van serologische onderzoeken;

■ differentiatie van HCV van andere vormen van hepatitis;

■ detectie van de acute fase van de ziekte in vergelijking met de overgedragen infectie of contact;het stadium van infectie van pasgeborenen van seropositieve HCV-moeders;

■ bewaking van de effectiviteit van antivirale behandelingen.

Alle bovenstaande kenmerken van de evaluatie van resultaten en benaderingen voor de diagnose van HCV met behulp van PCR zijn relevant voor andere infecties.

De PCR-methode maakt het niet alleen mogelijk HCV-RNA te detecteren in het testmateriaal, maar ook om het genotype vast te stellen. Bepaling van het genotype van het virus is van groot belang voor de selectie van patiënten met chronische HCV bij de behandeling van interferon-alfa en ribavirine. De laboratoriumindicaties voor de behandeling van chronische HCV-interferon-alfa zijn als volgt:

■ verhoogde activiteit van transaminasen;

■ aanwezigheid van HCV-RNA in het bloed;

■ genotype 1 HCV;

■ hoge viremie in het bloed( meer dan 8x105 kopieën / ml).

Het is nu mogelijk om het HCV-RNA-gehalte in het bloedserum kwantitatief te bepalen met PCR, wat van groot belang is voor het beheer van interferon-alfabehandeling. Het niveau van viremie wordt als volgt beoordeeld: voor HCV-RNA van 102 tot 104 kopieën / ml - zwak;van 105 tot 107 kopieën / ml - medium, boven 108 kopieën / ml - hoog. Met effectieve behandeling neemt het niveau van viremie af.