Fermentu un izoenzīmu izpēte
Fermenti ir specifiski proteīni, kas atbilst bioloģisko katalizatoru lomai organismā.Fermenti atrodas visās ķermeņa šūnās, kur to koncentrācija ir daudz augstāka nekā asins plazmā.Asinsrites
serums, kuru enzīmu sastāvs ir salīdzinoši nemainīgs, visbiežāk tiek izmantots kā pētījuma objekts. Normal fermentu aktivitāte serumā atspoguļo attiecību starp biosintēzes un atbrīvot fermentu( normālas šūnas update), un to savākšanai no asinsritē.Enzīmu atjaunošanās ātruma palielināšanās, šūnu bojājums parasti palielina fermentu aktivitāti serumā.Asins serumā izšķir trīs enzīmu grupas: šūnu, sekrēžu un izdalošās.
mobilo fermenti atkarībā no atrašanās vietas audos iedalīt divās grupās:
■ nonspecific fermenti, kas katalizē kopīgas visiem audiem apmainīties reakcijas un vairumā orgānos un audos;
■ organisma specifiskos vai indikatora enzīmus, kas raksturīgi tikai konkrētam audu veidam.
Šūnu fermentu aktivitāte serumā ir zema vai tā nav. In patoloģiskiem procesiem seruma fermenta aktivitātes šīs grupas ir atkarīga no likmi atbrīvošanu no šūnām, kuras savukārt nosaka ar ātrumu un pakāpi bojājumiem.
sekretorā fermenti( ceruloplazmīns, pseudocholinesterase, lipopro-lipāzes proteīnu polimēri) ieiet tieši asins plazmā un veikt tajā specifiskas funkcijas.Šie fermenti tiek sintezēti aknās un pastāvīgi izplūst plazmā.To aktivitāte serumā ir augstāka nekā šūnās vai audos. Klīniskajā praksē tie ir nozīmīgi, ja to darbība asins serumā kļūst zemāka nekā parasti, jo ir traucēta aknu funkcija. Izdalīšanās veidojas
fermenti gremošanas orgāni( aizkuņģa dziedzera, zarnu gļotādu, aknu, žults ceļu endotēlija).Tie ietver a-amilāzes, lipāzes, sārmainās fosfatāzes utt. Parasti to seruma aktivitāte ir zema un nemainīga. Tomēr patoloģijā, kad kāds no parastajiem ekskrēcijas ceļiem ir bloķēts, šo fermentu aktivitāte serumā ievērojami palielinās.
Mērītā fermentu aktivitāte var būt saistīta ar ļoti tuvu īpašībām, bet nedaudz atšķirīgām fermentu molekulārajām formām.Šīs dažādās formas sauc par izoenzīmiem. Studiju izoenzīmi klīniskajā praksē ir interese, veidojas, kad atsevišķas izoenzīmi dažādos audos( piemēram, dažādi LDH izozīmu dominē sirds un aknu).
Lai kvantitatīvi enzīmu aktivitāti fermentiem Starptautiskās Bioķīmijas savienības Komisija ieteica, ka standarta starptautiskā vienība( SV).Viena vienība no darbības jebkuru fermenta ņemot par summu, kas optimālos apstākļos katalizē pārveidošanu 1 mikromolu substrāta vienā minūtē( pmol / min).
No fermenta aktivitāte tiek vērtēta ar kuru katalizē reakcijas ātruma pie noteiktas temperatūras un pH, substrāts koncentrācijas. Tāpēc, nosakot fermentu aktivitāti, stingri jāievēro tie paši nosacījumi.
Fermentatīvā reakcija ir jutīga pret temperatūras izmaiņām. Tas ir ierasts, lai veiktu to temperatūrā, kas atrodas robežās
25-40 ° C, bet pie dažādām temperatūrām optimālais pH, bufera koncentrācija, substrāts un pārējie parametri ir atšķirīgs. Maksimālā fermentu aktivitāte cilvēka ķermenī tiek novērota aptuveni 37 ° C temperatūrā.Tāpēc, lai veiktu starptautisku standartizāciju, fermentu aktivitātes mērījumus veic noteiktā temperatūrā.Zem fermenta aktivitātes normālām vērtībām tiek dota 37 ° C temperatūra. Pētījums
fermenti, ko lieto klīniskajā praksē dažādiem uzdevumiem: diagnostika, deferenciāldiagnozi, novērtēšanas dinamiku slimības, nosaka efektivitātes terapiju, reģenerācijas pakāpi un prognozi. Ir trīs veidu fermenti izmaiņu patoloģijas: giperfermente mia - palielināja aktivitāti fermentu nekā parasti, hipo-enzīms saturu - tās samazinās disfermentemiya - ar izskatu enzīmu, kas parasti nav atrasts.