Polimerāzes ķēdes reakcija infekcijas slimību diagnostikā

PCR - viens no metodēm DNS diagnostikai, kas ļauj palielināt kopiju skaitu nosakāmā daļu genoma( DNS), baktēriju vai vīrusu ir miljons reižu, izmantojot DNS polimerāzes fermentu. Nukleīnskābes segmentu, kas testēts konkrētam genomam, daudzkārt reizina( pastiprina), kas ļauj to identificēt. First, DNS molekula no baktēriju vai vīrusu karsējot sadalīta divās ķēdēs, tad klātbūtnē sintezēto DNS praimeriem( secība ir īpaši definētajai genoma nukleotīdu) ir saistošs tos ar papildu posmos DNS, sintezēts otro aspektu nukleīnskābes pēc katras gruntēšanas klātbūtnē Thermostable DNS polimerāze. Ir iegūtas divas DNS molekulas.Šo procesu atkārtojas vairākas reizes. Diagnozei pietiek ar vienu DNS molekulu, proti, vienu baktēriju vai vīrusu daļiņu. Pakļaušanu reakcijai papildu soli - DNS sintēze uz RNS molekulas, izmantojot fermentu reversās transkriptāzes - ir atļauts pārbaudīt RNS vīrusu, piemēram, HCV vīrusu. PCR - trīspakāpju process, atkārtotus cikli denaturation, rūdīšana praimeru, DNS sintēze( polimerizācija).Sintezēts DNS daudzums tiek identificēts pēc ELISA vai elektroforēzes.

PCR var izmantot dažādu bioloģisku materiālu - serumu vai asins plazmu, nokasot no urīnizvadkanāla, biopsijas, pleiras šķidrumā, cerebrospinālais šķidrums uttKur pirmā PCR tika diagnosticēšanai izmanto infekcijas slimību, piemēram, HBV, HCV, HBV, CMV infekcija, infekcijas seksuāli transmisīvām infekcijām( gonoreja, trash diynaya, myco plazmas ureaplasmal infekcija), tuberkuloze, HIV un tā tālāk.e.

PCR priekšrocība diagnostikā infekcijas slimību salīdzinājumā ar citām metodēm pētījumos ir šāds:

■ infekcijas aģents var noteikt jebkādu bioloģisko vidi organisma, tai skaitā tām iegūtajiem materiāliem biopsijas;

■ Infekcijas slimību diagnostika agrīnā slimības stadijā;

■ pētījumu rezultātu kvantitatīvais novērtējums( cik vīrusu vai baktēriju atrodas izmeklējamajā materiālā);

■ metodes augstā jutība;piemēram, jutība PCR, lai atklātu HBV vīrusa DNS asinīs ir 0,001 pg / ml( aptuveni 4h102 kopijas / ml), bet jutība DNS hibridizācijas metodi, izmantojot sazarota zondes - 2.1 pg / ml( aptuveni 7h105 kopijas / ml).